Encyclopedia of Experiments: Biology
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-没有感官刺激, C. elegans 运动通常是向前的,并且被反转和转弯打断-随机重新定向操作,导致方向改变。 C. 电子元件具有电感。 即,它们能感知电场。 当暴露在温和的直流或直流中时,蠕虫会沿着直不间断的路径向负电极或阴极的方向移动,这种行为称为电解。
为了更准确地观察蠕虫的运动,将动物置于微流体装置中,并应用直流电场。 逆场方向,蠕虫将转向相反的方向-朝阴极的方向。应用交替电流、交流电和蠕虫将停止。 该场方向的交替变化压倒了蠕虫的神经运动系统,导致蠕虫的固定。 重新应用直流场,蠕虫将恢复向阴极前进的运动。
在下列示例协议中,我们将看到在微流体设备中演示电解检测的设置。
- 开始这一步骤,将刚刚组装的微通道置于显微镜的可移动阶段,安装的摄像头连接到监视器上。将电源连接到微通道的电极。
在确认微通道的电阻约为0.6兆欧姆后,将微通道的输出管连接到一次性注射器上,然后将入口管的口腔浸入M9生理缓冲液中悬浮的线虫溶液中,在注射器内施加负压,将液体吸进通道。
当入口和插座管都填满时, 通过调整管子的相对高度将蠕虫置于通道中心,从而断开注射器和水文静态操纵流量。然后将两个管子平放在同一高程处。在电解实验中切换蠕虫样本时,在将两个进水管调平到同一高程后,如果仍有流量,则对管子相对的高度进行小调整,从而保持微通道内的零流量。
- 如果我们不确定流量是否为零,我们可以通过改变电场的极性,然后评估蠕虫的线性速度来诱发蠕虫运动的逆转。
- 现在,将电源设置为适当的电压。激活电信号,并允许蠕虫在接触前一分钟适应该字段,在此期间,蠕虫应开始向阴极移动。当分钟过去时,开始录制。
实验结束后,从通道中取出所有的液体和蠕虫。用去离子水冲洗腔室,在125摄氏度的高温下将设备放在热板上晾干。