Encyclopedia of Experiments: Biology
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Transcript
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- E3 배지에서 배아를 함유하는 페트리 접시로 시작합니다.
유리 파이펫을 사용하여 점진배 중 하나를 중앙에 얕은 유리 바닥으로 작은 페트리 접시에 옮기고 과잉 매체를 제거합니다.
아가로즈의 첫 번째 층을 배아 위에 붓고 얕은 우물을 완전히 채웁니다.
아가로즈가 고화되면, 트리카인을 함유하는 E3 배지로 페트리 접시를 채우게 한다. 이것은 제3층이며 아가로즈와 배아를 수화시켰다.
- 장착 직전에 아가로즈 용액을 섭씨 65도로 가열한 다음 약 30°C까지 식히면 배아가 열에 의해 손상되지 않도록 하고 아가로즈 용액에 트리카인을 추가하십시오. 숫자 0 덮여 유리 바닥35 밀리미터 유리 바닥 접시를 사용하십시오. 유리 파이펫 이나 마이크로 파이프로 접시의 바닥을 향해 측면 중 하나가있는 점진 배아를 부드럽게 놓습니다.
더하다 첫 아가로즈 용액 받는 사람 작다 잘 만든 곁에 표지 잔 연결 받는 사람 밑바닥 의 접시 받는 사람 표지 배 만들기 물론 그 아가로즈 커버 작다 잘 하지만 않습니다 안 넘치다 술래. 표지 작다 잘 와 표지 잔 받는 사람 창조하다 a 좁다 아가로즈로 가득 우주 와 배 사이 2 표지 안경. 장소 a 층 의 1% 아가로즈 용액 에 맨 위로 의 표지 잔 모두 위에 밑바닥 의 접시 어느 할 것이다 유지 표지 잔 안으로 장소 만큼 술래 굳은. 그러면 채우다 나머지 부분 의 접시 와 E3 포함 0.02% 트리카인 받는 사람 유지 체계 수산화. 받는 사람 식별 최적의 아가로즈 농도 때문에 층 1 오르다 배아 안으로 증가 농도 의 아가로즈 그리고 연주하다 타임랩스 이미징 받는 사람 식별 농도 그 최소화 배 왜곡 그리고 운동성, 그러면 테스트 a 미세한 레인지 의 농도 기반 에 결과.
- 이 프로토콜의 가장 중요한 단계는 층 1층에 대한 아가로즈의 최적 농도를 식별하는 것입니다.
