Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- 斑马鱼眼包括角膜、硬膜、透镜和视网膜。 角膜是一个透明的组织,允许光线进入眼睛。 鳞片是一种不透明的组织,与角膜连续,形成外部保护层。透镜是一个球形结构,将光线聚焦到视网膜上,视网膜是一种对光敏感的组织层,将光线转化为神经信号。
要解剖眼睛,用硅胶填充培养皿,让它设置。现在,在盘子里放一条麻醉鱼,用微剪刀切除眼睛。将眼睛转移到装满PBS的盘子中,以保持组织中的恒定 pH,并将眼睛朝上,后侧朝上。 用钳子抓住眼睛,小心地通过囊泡和视网膜进行三次径向切口。
接下来,将组织折叠出来,露出镜头。现在,将眼睛与前侧朝上定位,并去除囊泡和视网膜。 从解剖的眼睛中取出镜片,并去除周围任何剩余的组织。 在下列协议中,我们将执行幼鱼和成年斑马鱼镜片解剖,以分析镜头形态。
后 确认 之 足够 镇静 跟 三卡因, 用 微解剖 剪刀 自 马上 切除 双 眼睛 从 也 一 成人 或 幼虫 斑马 鱼 和 地方 双 眼睛 到 一 35毫米 定制 佩特里 菜 跟 一 有机 硅 解剖 模具 㿙 跟 PBS。 自 收获 这 镜头 从 一 成人 斑马 鱼 地方 这 眼睛 后面的 边 向上 和 插入 钳子 在 一 少 比 45 度 角度 通过 这 光 磁盘。 用 解剖 剪刀 自 做 二 或 三 径向 切口 通过 这 视网膜 和 巩膜 从 这 光 磁盘 自 这 睫 状 区 在 这 固定 眼睛 和 皮 返回 这 视网膜 和 巩膜 喜欢 花 花瓣。 转化 这 眼睛 角膜 边 向上 和 用 这 平 边 之 这 剪刀 自 固定 这 镜头 间接 通过 操纵 之 这 巩膜 和 角膜 而 用 钳子 自 拉 離開 这 视网膜 和 附加 组织。 然后 仔细 修剪 離開 任何 过剩 组织 从 这 镜头。
对于幼虫斑马鱼镜头的收获,在PBS硅胶盘的扁平部分扮演幼虫眼的后侧。使用锋利的钨针,使射电穿过视网膜和硬膜,同时用另一根针或钳子固定眼睛。然后用定制的钨丝针的钝面轻轻地从分离的眼睛中挖出镜片,并小心地拉开附着的组织。