Dissection des lentilles oculaires : une technique pour observer la morphologie des lentilles zebrafish

- Un œil de poisson zèbre comprend la cornée, la sclère, la lentille et la rétine. La cornée est un tissu transparent qui permet à la lumière d’entrer dans l’œil. La sclère est un tissu opaque qui est continu avec la cornée, formant une couche protectrice externe. La lentille est une structure sphérique qui concentre la lumière sur la rétine, qui est une couche sensible à la lumière des tissus qui convertit la lumière en un signal neural.

Pour disséquer l’œil, remplissez une boîte de Pétri de silicone et laissez-la régler. Maintenant, placez un poisson anesthésié dans le plat et excisez les yeux à l’aide d’un micro-ciseaux. Transférez les yeux dans une assiette remplie de PBS pour maintenir un pH constant dans le tissu et orientez l’œil avec le côté postérieur face vers le haut. Tenez l’œil avec des forceps et faites soigneusement trois coupures radiales à travers la sclère et la rétine.

Ensuite, pliez le tissu pour révéler la lentille. Maintenant, placez l’œil avec le côté antérieur face vers le haut et retirez la sclère et la rétine. Retirez la lentille de l’œil disséqué et enlevez tout tissu restant autour d’elle. Dans le protocole suivant, nous effectuerons des dissections larvaire et adulte de lentille de poisson zèbre pour analyser la morphologie de lentille.

après confirmation de suffisant sédation avec tricaine, utiliser Microdissection ciseaux À immédiatement accise les deux yeux De ou un adulte ou larvaire poisson zèbre, et lieu les deux yeux dans un 35 millimètres sur mesure Petri plat avec un silicone dissection moule rempli avec Pbs. À récolter le lentille De un adulte poisson zèbre, lieu le oeil postérieur côté en haut et insérer forceps à un moins que 45 degré angle par le optique disque. utiliser dissection ciseaux À faire Deux ou Trois radial Incisions par le rétine et sclère De le optique disque À le ciliaire zone dans le Immobilisé oeil et éplucher Précédent le rétine et sclère comme fleur Pétales. renverser le oeil cornée côté en haut et utiliser le plat côté de le ciseaux À immobiliser le lentille indirectement via manipulation de le sclère et cornée pendant que Utilisant forceps À tirer loin le rétine et attaché Tissus. alors soigneusement couper loin quelconque excès tissu De le lentille.

Pour la récolte larvaire de lentille de poisson zèbre, joue un côté postérieur d’oeil larvaire vers le haut sur la partie plate d’un plat de silicone de PBS. Et emploiez une aiguille aiguisée de tungstène pour faire des coupures radio par la rétine et la sclère tout en immobilisant l’oeil avec une autre aiguille ou forceps. puis ramassez doucement la lentille de l’oeil dissocié avec le côté émoussé d’une aiguille faite sur commande de fil de tungstène et retirez soigneusement le tissu attaché.