Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Глаз зебры состоит из роговицы, склеры, хрусталика и сетчатки. Роговица представляет собой прозрачную ткань, которая позволяет свету проникать в глаз. Склера является непрозрачной тканью, которая непрерывна с роговицей, образуя внешний защитный слой.
Чтобы вскрыть глаз, заполните чашку Петри с силиконом и дайте ему установить. Теперь поместите анестезированной рыбы в блюдо и акциз глаза с помощью микро-ножницы. Передача глаза на тарелку, наполненную PBS для поддержания постоянного рН в ткани и ориентировать глаз с задней стороны вверх. Держите глаз с типсами и тщательно сделать три радиальных разрезов через склеру и сетчатки.
Затем сложите ткань, чтобы выявить объектив. Теперь, положение глаза с передней стороны вверх и удалить склеры и сетчатки. Scoop из объектива из расчлененного глаза и удалить все оставшиеся ткани вокруг него. В следующем протоколе, мы будем выполнять личинки и взрослых зебры линзы вскрытия для анализа морфологии объектива.
после подтверждение из достаточный успокоение ивовый прут tricaine, использование микродиссекция ножницы Кому немедленно акциз оба взор От каждый а взрослый или личиночный зебрафиш, и место оба взор в ля 35-миллиметровый заказной Петри блюдо ивовый прут ля силикон вскрытие плесень заполненный ивовый прут PBS. Кому урожай тем линза От а взрослый зебрафиш, место тем глаз последующий сторона вверх и вставка щипцы у ля менее чем 45 градус угол через тем зрительный диск. использование вскрытие ножницы Кому делать Два или Три радиальный Разрезов через тем сетчатка и склера От тем зрительный диск Кому тем ресничный зона в тем Иммобилизованных глаз и кожура Назад тем сетчатка и склера любить цветок Лепестки. инвертировать тем глаз роговица сторона вверх и использование тем плоский сторона из тем ножницы Кому иммобилизовать тем линза косвенно через манипуляция из тем склера и роговица пока использование щипцы Кому тянуть прочь тем сетчатка и прикомандированный Тканей. тогда осторожно подстригать прочь любой избыток ткань От тем линза.
Для личинки зебрафиш объектив урожая, играет личинки глаз задней стороне вверх на плоскую часть силиконовой блюдо PBS. И использовать заточенные вольфрама иглы, чтобы сделать радио разрезы через сетчатку и склеру в то время как иммобилизация глаза с другой иглой или типсами. Затем осторожно черпать объектив из диссоциированного глаза с тупой стороны на заказ вольфрама проволоки иглы и тщательно вытащить.
