In Vivo Elektroporering: En platsspecifik metod för att transfekt zebrafisk

- Placera först en bedövad fisk med den dorsala sidan vänd uppåt i en förtorkad svamp. Före elektroporering, injicera genetiskt material i målvävnaden, i detta fall en del av förhjärnan som kallas telencefalon.

Tryck nu elektroderna försiktigt mot huvudet och administrera flera pulser av elektrisk ström. Strömmen skapar tillfälliga porer i plasmamembranet av elektroporerade celler och gör dem genomsläppliga. Strömmen underlättar också rörelsen av negativt laddade partiklar, såsom DNA-uttrycksplasmider eller RNAi oligonukleotider som finns i omgivningen, in i cellerna.

- Täck fisken telencephalon med en liten mängd ultraljud gel. För elektroporering av det plasmid-injicerade djuret, ta bort svampen från utmatningsuppsättningen och sänk ned elektrodspetsarnas inre sida i ultraljudsgelen. Placera sedan fiskhuvudet mellan elektroderna, med den positiva elektroden på huvudets ventrala sida och den negativa elektroden på dorsalsidan. är klara.