Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Поместите усыпляемую рыбу на кровать для вскрытия и используйте хирургическое лезвие, чтобы обезглавить рыбу на уровне жабры. Держите голову с брюшной стороны лицом вверх и удалить мягкие ткани, пока вы не увидите оптический чиазм, структура из зрительных нервов, которая соединяет мозг с глазами.
Вырезать зрительные нервы и удалить глаза. Теперь, сориентировать рыбу с спинной стороны лицом вверх и удалить части черепа, чтобы изолировать мозг. Передача мозга в чашку Петри, содержащую вскрытие среды для поддержания постоянного рН ткани.
Обонятельные луковицы являются парой структур на передней части, подключенных к обонятельным органам, которые обнаруживают запах сигналов. Теленцефалон включает в себя области, связанные с памятью. Хабенула передает информацию из теленцефалона в другие части мозга.
Оптическая тектум является центром сенсорной обработки информации. Мозжечок играет роль в соматической двигательной функции и балансе. А медулла передает информацию из спинного мозга в мозг. В следующем протоколе мы будем изолировать мозг от взрослой зебры для сбора нервных стволовых клеток из разных областей.
Для начала подготовьте расчленительное ложе, заполнив чашку Петри гель-пакетами.Затем накройте блюдо соответствующей крышкой и инкубировать его при температуре минус 20 градусов по Цельсию. После того, как гель замерз, удалите блюдо из морозильной камеры и поместите чистый квадрат фильтровальной бумаги поверх крышки.
Далее обработать все микро-рассечение приборов с 70% этанола. Поместите эти стерилизованные инструменты рядом с рассечением микроскопа и распоистите завершенную кровать вскрытия под микроскопом с оптическим освещением волокна.
Затем используйте ножницы, чтобы сделать продольный прорезать мягкую ткань от задней части головы до рта. После этого вырежьте основание черепа с помощью щипцы и удалите все прилегающие ткани. Далее, вырежьте одну из боковых стенок черепа, начиная с задней части головы и двигаясь к области тектума мозга. Повторите этот процесс для контралатеральной стороны.
Наконец, поверните голову брюшной стороны вверх. И с типсами, снять наиболее апической части черепа подвергать мозг. После этого, передача мозга и любых оставшихся частей черепа в блюдо, содержащее вскрытие среды, которая состоит из DMM F12 дополняется пенициллин стрептомицин. С пластиковой ручкой микроночь под микроскопом, очистить ткань мозга, будучи осторожным, чтобы не повредить любые нервные структуры.
