Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- اعتلال عضلة القلب هو حالة تضعف فيها عضلة القلب وتفقد القدرة على ضخ الدم. يمكن تكرار هذه الحالة في حمار وحشي. أولا ، تمييع محلول مخزون دواء مسؤول عن السمية القلبية في حل الملح المتوازن لهانكس لإعداد العديد من تركيزات العمل.
الآن دفع بلطف الإبرة 1 إلى 2 ملليمتر في تجويف الصفاق وحقن ببطء محلول المخدرات. انتظر خمس ثوان قبل سحب الإبرة لمنع تسرب المحلول. على الفور نقل الأسماك إلى خزان نظيف يحتوي على مياه النظام العذبة. سجل عدد الأسماك التي تموت كل يوم بسبب السمية القلبية الشديدة، وتلف عضلة القلب.
إنشاء منحنى البقاء على قيد الحياة، رسم بياني يعرض احتمال البقاء على قيد الحياة مع مرور الوقت لكل تركيز المخدرات.
قبل حقن السمك مع DOX، بسرعة الأسماك لمدة 24 ساعة. بعد ذلك، قم بتجميع الأسماك. أثناء تخديرها، استخدم ورقة فلتر نظيفة لتجفيف كل سمكة وقياس وزن جسمها.
ثم، تمييع مخزون DOX في 1x HBSS. خلط التخفيف مع دوامة ومن ثم نبض تدور التخفيف للحفاظ على تجميعها معا في الأنبوب. للحقن، وإعداد منصة حقن. في طبق بيتري نظيفة 100 ملليمتر، ووضع اسفنجة.
بعد ذلك ، على إبرة قياس 34 ، قم بإرفاق microsyringe 10 ميكرولتر. الآن، تخدير لفترة وجيزة الأسماك الكبار مع tricaine. ثم، نقع الإسفنج في ماء الجنين مع tricaine ونقل سمكة على الإسفنج مع بطنها حتى للحقن.
ثم، حرر ببطء كل محلول DOX. قبل سحب الإبرة، انتظر خمس ثوان. بدلا من ذلك، يمكن وضع السمكة أفقيا مع الداخل إلى اليمين.
بعد الحقن، بسرعة نقل الأسماك إلى خزان عبور نظيف مليء بمياه النظام العذب حيث يمكن أن يتعافى. ثم، شطف الإبرة مع HBSS والمضي قدما لحقن الأسماك القادمة.
