Name: E16 Rat Embriyolar Utero İntraventriküler Enjeksiyon ve Elektroporasyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 19 min 4 s
Description: Öğrenin, E16 sıçan embriyolarında intraventriküler enjeksiyon ve elektroporasyon tekniklerini kullanarak gelişimsel nörolojide genetik manipülasyon nasıl yapılır. Bu yöntem, gen fonksiyonlarını in vivo çalışmak için güçlü bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

e16 rat embriyolar utero İntraventriküler enjeksiyon ve elektroporasyon

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E16 Rat Embryos

-Utero embriyonik sıçan neokorteks in vivo enjeksiyon ve elektroporasyon lateral ventrikül duvarlarıyla bireysel atalarıdır manipülasyon için güçlü bir araç sağlar. Bu teknik, şu anda yaygın olarak aşırı eksprese veya genlerin aşağı vurma ve hücresel proliferasyon, göç, ve farklılaşması üzerine etkileri gözlemlemek corticogenesis yer süreçlerini incelemek için kullanılır. Geleneksel nakavt stratejileri ile karşılaştırıldığında, in-utero elektroporasyon belirli bir zaman penceresi sırasında hücre bir nüfus işlemek için hızlı bir yöntem sağlar. Bu video protokolde, biz, ameliyat için sıçanlarda hazırlanması laporatomy yoluyla rahim boynuzları açığa, gelişmekte olan embriyonun lateral ventriküller içine DNA enjekte lateral duvarını kaplayan atalarıdır içine DNA electroporating ve hayvanların bakımı için deneysel bir metodoloji Mesaj cerrahi. Laboratuvarımız bu videoda gösterildiği gibi, ancak en yaygın E16, E15-E21 sıçanlarda ameliyatları için bu protokolü kullanır.

E16 Rat Embriyolar Utero İntraventriküler Enjeksiyon ve Elektroporasyon

Embriyonik sıçan neokorteksinin in-utero in-vivo enjeksiyonu ve elektroporasyonu, bireysel progenitörlerin manipülasyonu için güçlü bir araç sağlar...

Merhaba, benim adım William Ti. Arnold Creek Stein Laboratuvarı'ndan geliyorum. Bugün, ben ve diğer çalışma arkadaşlarım size E 16 sıçan embriyolarına yapılan intrauterin enjeksiyonu göstereceğiz. Merhaba, benim adım Laura Elias.Bugün sizlere mikroenjeksiyon pipetlerinin nasıl hazırlanacağını ve bugün gerçekleştireceğimiz intraventriküler enjeksiyonlar ile elektroporasyon için pipetlerin nasıl doldurulacağını göstereceğim. Ayrıca, E16 sıçan embriyolarında intraventriküler enjeksiyonların ve elektroporasyonun nasıl yapılacağını da göstereceğim. Sıçanlarda utero içi enjeksiyonlar ve elektroporasyon özellikle yararlıdır; çünkü sıçan, genetik manipülasyonların kolayca yapılamadığı bir sistemdir.Tamam, bu işlem için kullandığımız bir dizi cerrahi alet bulunmaktadır. Bir freer, bir çift adson pensi (biri tırtıklı, diğeri ucunda küçük bir dişi olan) ve bir çift hemostat kullanıyoruz.Bu bir makastır ve ardından bu iki zımbayı kullanıyoruz. Bunlardan büyüğü sıçanlar için kullandığımızdır. Diğeri ise fareler için kullandığımız daha küçük olanıdır; biri 7 numara zımba kullanır, diğeri ise 9 numara zımba kullanır ve her ikisi de yaylıdır.Cerrahi işlemlere yardımcı olmak için burada kullandığım

in-utero-intraventricular-injection-electroporation-e16-rat

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

E15 Fare Embriyolar Utero İntraventriküler Enjeksiyon ve Elektroporasyon

Utero elektroporasyon nöronal progenitör hücrelerinin in vivo transfecting için değerli bir yöntemdir. Elektrotlar ve elektroporasyon gelişimsel timepoint yerleştirme bağlı kortikal hücrelerin bazı altkümelerini hedeflenebilir. Hedeflenen hücreler daha sonra in vivo veya in vitro genetik değişiminin etkileri analiz edilebilir.

In utero Elektroporasyon Kortikal nöronlar Altküme Gen Fonksiyonu Öğrenmenin İlköğretim Nöronal Kültür takip

Utero elektroporasyon gelişmekte olan merkezi sinir sistemi (MSS) bir mekansal ve zamansal olarak kontrollü bir şekilde hızlı bir gen teslimat için izin verir. Burada son derece uyarlanabilir tarif telencephalon diensefalon ve retina da dahil olmak üzere birden fazla embriyonik MSS etki alanı ifade yapıları sunmak için kullanılabilir utero elektroporasyon protokol.

Verimli kullanarak birden çok CNS Topraklar&#39;da Gen Teslimat In Utero Elektroporasyon

Midgestation Fare Embryolarının Alt Rombik Dudak in vitro Elektroporasyon yılında

Somatik kök hücre genişleme kontrolü kendi çalışma ve tedavide kullanımı engelleyen önemli bir faktördür. Burada geçici olarak fare beyin üretilen nöron sayısını artırmak için kullanılabilir geliştirme ve yetişkinlik döneminde nöral kök hücrelerinin genişlemesi, kontrol etmek için bir sistemi tanımlamak.

Tarafından Embriyonik ve Erişkin Nöral Kök Hücre Genişletme<em&gt; In Utero</em&gt; Elektroporasyon veya Viral Stereotaksik Enjeksiyon

Kaynak: Koza, P., et al. Generation of Transgenic Rats using a Lentiviral Vector Approach. J. Vis. Exp. (2020)Bu video, transgenik sıçanların üretimi için stabil transgen entegrasyonu sağlamak amacıyla, döllenmiş sıçan embriyolarına lentiviral vektörlerin mikroenjeksiyon yardımıyla iletilmesini göstermektedir.

Sıçan Fertilize Embriyolarının Lentiviral Vektör Tabanlı Transdüksiyonu

Bu video, plazmid DNA'nın in utero elektroporasyon kullanılarak murin embriyolarının serebellar nöronal hücrelerine verilmesini göstermektedir. Bu yöntem, normal beyin gelişiminde genlerin in vivo fonksiyonunu ve tümör ilerlemesi sırasında nöron hücrelerinin gen ekspresyonundaki değişiklikleri anlamak için yararlıdır.

In Utero Elektroporasyona Dayalı Gen Dağıtımı: Murin Embriyolarının Embriyonik Serebellar Hücrelerine Plazmid DNA Enjekte Etme Tekniği

Genler yetişkin hayvanlarda davranış veya nöropatoloji sonraki çalışmalar için nöronal bağlantı hızlı ve hedeflenen değişiklikleri mümkün kılmak için, E16 de utero elektroporasyon (IUE) in ile korteks veya sıçanın hipokampusun gelişimi sırasında manipüle edilebilir. IUE başarı kontrolü için in vivo görüntüleme doğum sonrası ko-transfekte edilmiş lusiferaz aktive biyolüminesans ile gerçekleştirilir.

Topikal Transgenik Rats nesil tarafından<em&gt; Utero</em&gt; Elektroporasyon ve<em&gt; In vivo</em&gt; Biyoparlaklık Eleme

Bu protokol, in utero elektroporasyon yoluyla C57BL/6 merkezi sinir sistemindeki farklı bölgelerin spesifik olarak nasıl transfekte edileceğini ayrıntılı olarak açıklar. Bu protokolde korteks, hipokampus, talamus, hipotalamus, lateral septal çekirdek ve striatuma dönüşen bölgelerin transfeksiyonları için ayrıntılı talimatlar bulunmaktadır.

Korteks, Hippocampus-, Thalamus-, Hypothalamus-, Lateral Septal Nucleus- ve Striatum özgü<em&gt; In Utero</em&gt; C57BL / 6 Fare Elektroporasyon

Periventriküler Nodüler Heterotopya (PNH) malformasyonu kortikal gelişim (MCD) en sık görülen yetişkinlikte ama genetik temeli en dağınık durumda bilinmeyen kalır. Biz son zamanlarda roman aday genler MCD'ler için tanımlamak için ve doğrudan kendi etken rol içinde vivoonaylamak için bir strateji geliştirdik.

Dizi-CGH, Bütün exome sıralama ve rahim içinde elektroporasyon Rodents beyin malformasyonlar için sorumlu genlerin tanımlamak için birleştirerek yeni bir strateji

Öğrenin, E16 sıçan embriyolarında intraventriküler enjeksiyon ve elektroporasyon tekniklerini kullanarak gelişimsel nörolojide genetik manipülasyon nasıl yapılır. Bu yöntem, gen fonksiyonlarını in vivo çalışmak için güçlü bir araçtır.

E16 Rat Embriyolar Utero İntraventriküler Enjeksiyon ve Elektroporasyon

Daha fazla video keşfet