Name: Memeli Doku Lazer Yakalama Mikrodisseksiyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 34 s
Description: Öğrenin, lazer yakalama mikroskobu kullanarak memeli dokusundan hassas örnek izolasyonu yöntemini. Leica A-S-L-M-D ile RNA analizi için donmuş kesitlerden hedef hücreleri seçin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

memeli doku lazer yakalama mikrodisseksiyon

Laser Capture Microdissection of Mammalian Tissue

Lazer yakalama mikroskobu, lazer mikrodiseksiyon (LMD) olarak da bilinen, kullanıcı dondurulmuş veya formalin ile fikse, parafine gömülü doku kesitlerinde doku veya hücrelerin az sayıda izole etmek için sağlar. LMD teknikleri bir termo labil ya üstüne yerleştirilen membran, ya da altına, doku bölümü güveniyor. Odaklı bir yöntem lazer enerjisi, sonra doku bölümü kaldırılabilir yatan hücreleri, üzerine membran eritmek için kullanılır. Diğer lazer enerjisi, seçili hücrelerin toplama cihazı içine düşmesine izin, doku &quot;çizilmiş&quot; bir yol boyunca folyo buharlaşan. Her teknik birkaç mikron minimum çözünürlük ile hücre seçimi sağlar. DNA, RNA, protein ve lipid örnekleri mikro-disseke örneklerinden izole ve analiz edilebilir. Bu videoda, örnek yakalama tüpler montaj ve kurma kullanmak için alet, numune hazırlama için genel düşünceler, başlatılıyor, LMD ilkelerine bir giriş de dahil olmak üzere yedi segmentlerinde Leica AS-LMD lazer mikrodiseksiyon alet kullanımı, göstermek , mikroskop hizalayarak yakalama kontrolleri ayarlayarak ve doku örnekleri yakalamak. Lazer yakalama mikro diseksiyon küçük saf hücre popülasyonlarının örnekleri birkaç hücre benzerleri olarak izole etmek için araştırmacı sağlar. Bu ilgi hücrelerinin deneysel sonuçlar karıştırıcı komşu kirleticiler, ücretsiz analiz etmenizi sağlar.

Memeli Doku Lazer Yakalama Mikrodisseksiyon

Lazer mikrodissection (LMD) olarak da bilinen lazer yakalama mikroskopisi, kullanıcının dondurulmuş veya ... dondurulmuş veya taze dokulardan az sayıda hücreyi veya dokuyu izole etmesine olanak tanır.

Merhaba, benim adım Rob Edwards. University of California Irvine Lazer Yakalama mikroskobu tesisinin direktörüyüm. Size burada bulunan lazer yakalama mikroskobunun kullanımını anlatacağım.Kullandığımız cihaz, yaklaşık üç yıl önce satın aldığımız bir Leica A-S-L-M-D'dir. İki farklı lazer yakalama sistemi türü bulunmaktadır. Bunlardan biri, doku parçasının bir cam lam üzerinde ve dokuyu örten plastik bir membranın altında yer aldığı bir nokta kaynağına benzetilebilir.Ardından, membranı eritmek için bir lazer kaynağı kullanılır; bu işlemle doku aslında membrana nokta kaynağı ile sabitlenmiş olur ve daha sonra membran, yakalanan dokuyu da beraberinde götürerek çıkarılır. Tamam. LCM sistemini başlatmak için buradaki bir dizi cihazı sırayla açıyoruz. Buradan güç verdiğimiz A-S-L-M-D kontrol kutusu ile başlayacağız.Ardından bilgisayarı basitçe açıyoruz. Yakalanacak hücrelerin tanımlanması için floresan optik gerektiren bir örneğiniz varsa, floresan aydınlatma için cıva lambasını açarsınız. Bu demonstrasyon için bunu kullanmayacağız.Numunelerin işlem öncesi ve sonrası yüksek kaliteli görüntülerini yakalamak istiyorsanız, mantık kutusu ve bilgisayar açıldıktan sonra buradaki spot kamerayı a

laser-capture-microdissection-of-mammalian-tissue

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Video, 3D organotipik ko-kültür modelinin mikron düzeyinde hassasiyetle lazer diseksiyonunu açıklamaktadır. 3D organotipik modellerde, fibroblastlar gibi stromal bileşenler, kanser epitel hücreleri ile 3 boyutlu olarak birlikte kültürlenir. 3D model, invazyon ve kanser-stroma etkileşimlerinin yakın fizyolojik koşullarda incelenmesini sağlayan deneysel bir araç olarak hizmet eder.

Lazer Mikrodiseksiyon: İstilacı Kolorektal Kanser hücrelerini 3D Organotipik Kültür Modelinden İzole Etme Tekniği

Diseksiyon yaygın doku içindeki DNA, RNA ve protein incelenmesi için kullanılmıştır. Lazer yakalama mikroskobu (LCM) en sık kullanılan yöntem, ancak, yeni bir freze tekniği, mesodissection, son zamanlarda kullanılabilir. Biz mesodissected formalin sabit parafin Mycobacterium tuberculosis granülomlarının gömülü doku slaytlar RNA çıkarma göstermektedir.

Kurtarma Bir Roman Mikrodiseksiyon Yaklaşımı<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</emAkciğer granülomlara Gömülü Formalinle Sabit Parafin dan&gt; Özel Transkript

Bireysel dopamin nöronlarının izolasyon ya da doğrudan veya dolaylı olarak immunohistokimyasal ile ventral tegmental alan lazer yakalama mikrodiseksiyon kullanılarak gösterilmiştir. Kızılötesi lazer kullanarak cam slayt doku izolasyonu ve bir kızılötesi ve morötesi lazer kombinasyonu kullanılarak membran slaytlar arasındaki parametreler tartışılmıştır.

Lazer Yakalama Mikrodisseksiyon - Bireysel Dopamin Nöronlar İzolasyonu ve Tüm ventral tegmental Area bir Gösteri

Bu protokolün amacı, aşağı akış RNA analizi için heterojen prostat dokularından saf hücre tipi popülasyonlarını izole etmek için etkili bir yöntem olarak lazer yakalama mikro-diseksiyonunu kullanmaktır.

RNA Analizi İnsan Prostat Epitelinin Lazer yakalama mikrodiseksiyon

Burada, biz bir tekrarlanabilir lazer yakalama mikrodiseksiyon (LCM) için bir protokol trabeküler meshwork (TM) aşağı akım RNA analizi için yalıtmak için açıklamak. TM ifadede gen değişiklikleri analiz yeteneği göz hastalıkları TM ile ilgili temel moleküler mekanizmaları anlamada yardımcı olacaktır.

Lazer yakalama mikrodiseksiyon son derece saf trabeküler Meshwork gen ifade analizi için fare gözlerinden

Kemik hücrelerinde gen ekspresyonu analizi için yeterli miktarda yüksek kaliteli RNA elde etmek için lazer yakalama mikrodisseksi (LCM) protokolü geliştirilmiştir. Mevcut çalışma fare uyluk bölümleri üzerinde duruluyor. Ancak, burada bildirilen LCM protokolü herhangi bir sert doku hücrelerinde gen ekspresyonu çalışmak için kullanılabilir.

Taze Dondurulmuş Fare Kemiklerinden Yüksek Kaliteli RNA Veren Lazer Yakalama Mikrodisksiyon Protokolü

Bu protokol, fare embriyosu taze dondurulmuş bölümlerinden kıkırdak ve kemik izolasyonu için lazer yakalama mikrodizeksiyon açıklar. Kıkırdak ve kemik hızla cresyl menekşe boyama ile görselleştirilmiş ve transkripsiyonanalizi için yüksek kaliteli RNA verim hassas toplanabilir.

Gen Ekspresyonu Analizi için Fare Embriyonik Kıkırdağı ve Kemiğinin Lazer Yakalama Mikrodizmesi

Lazer mikrodisesi ( LMD) glioma heterojenite ve invazyon aracılık yolları ortaya çıkarmak için kullanılabilecek hassas ve son derece tekrarlanabilir bir tekniktir. Burada lazer LMD kullanarak glioma dokusundan ayrık alanları izole etmek ve ardından transkripsiyonanalizi yapmak için optimize edilmiş bir protokol tanımlıyoruz.

İntratümöral Heterojenite, Oncostreams ve Invasion'ın Mekansal ve Moleküler Karakterizasyonu için Glioma Alt Bölgelerinin Lazer Yakalama Mikrodizması

RNA dizilimi için bireysel nematod dokularını izole etmek için lazer mikrodiseksiyonu kullanan bir protokol tanımlanmıştır. Protokol, türe özgü genetik araç setleri gerektirmez ve gen ekspresyon profillerinin tek doku örnekleri düzeyinde farklı türler arasında karşılaştırılmasına izin verir.

Türlerden Agnostik Tek Doku Uygulamaları için Lazer Mikrodiseksiyonu

Bu protokol, lazer mikrodiseksiyonu kullanarak histoloji ile çözülmüş hücre popülasyonlarının zenginleştirilmesi için lekeli, ince doku kesiti görüntülerinden patoloji onaylı ilgi alanlarının yapay zeka odaklı segmentasyonu için yüksek verimli bir iş akışını açıklamaktadır. Bu strateji, ilgilenilen hücre popülasyonlarını gösteren sınırların doğrudan lazer mikroskoplara aktarılmasını sağlayan yeni bir algoritma içerir.

Tümör Mikroçevresinin Mikro Ölçekli Proteomik Analizi için Endüstriyelleşmiş, Yapay Zeka Rehberliğinde Lazer Mikrodiseksiyonu

Bu protokol, paraformaldehit sabitlenmiş, Optimal Kesme Sıcaklığı bileşen gömülü fare karaciğer dokusunun tanımlı histolojik bölgelerinden RNA'yı lazer yakalama mikrodiseksiyonu kullanarak izole etme yöntemini tanımlar; böylece hedefe yönelik aşağı akım gen ekspresyonu analizi mümkün olur.

RNA analizi için paraformaldehit sabitli fare karaciğer dokusunun lazer yakalama mikrodiseksiyonu

Öğrenin, lazer yakalama mikroskobu kullanarak memeli dokusundan hassas örnek izolasyonu yöntemini. Leica A-S-L-M-D ile RNA analizi için donmuş kesitlerden hedef hücreleri seçin.

Memeli Doku Lazer Yakalama Mikrodisseksiyon

Daha fazla video keşfet