A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
בידוד חומצות גרעין מ שמרים
English
Share
Overview
אחד היתרונות הרבים לשימוש בשמרים כמערכת מודל הוא שניתן לטהר כמויות גדולות של ביומקרומולקולים, כולל חומצות גרעין (DNA ו- RNA), מהתאים בתרבית.
וידאו זה יתייחס לשלבים הנדרשים לביצוע מיצוי חומצת גרעין. נתחיל בקצרה בהתווית הצמיחה והקציר, ותסיסה של תאי שמרים, שהם הצעדים הראשוניים המשותפים לבידוד של כל הביו-קומקרוקולקולים. לאחר מכן, נדון בשתי שיטות טיהור ייחודיות להפרדת חומצות גרעין: כריכת עמודות והפרדת פאזה. בנוסף, אנו להדגים מספר דרכים שבהן שיטות אלה מיושמות במעבדה, כולל הכנת חומצות גרעין לטכניקות ביולוגיה מולקולרית כגון PCR ו blotting הדרומי, כימות ביטוי גנים בתגובה גירויים סביבתיים, וטיהור של כמויות גדולות של חלבונים רקומביננטיים.
Procedure
היום אנחנו נראה לכם איך לטהר חומצות גרעין מ Saccharomyces cerevisiae, הידוע גם בשם שמרי אופה. חומצות גרעין יכולות לכלול DNA או RNA. וידאו זה ידון בבידוד של מולקולות אלה מתאי שמרים על ידי הפרדת פאזה וכרומטוגרפיה. למרות שקיימות שיטות רבות ושונות לטיהור חומצות גרעין מפני שמרים, רובם חולקים …
Disclosures
No conflicts of interest declared.
Transcript
Tags
Isolating Nucleic AcidsYeastSaccharomyces CerevisiaeBaker’s YeastDNARNAPhase SeparationChromatographyPurify Nucleic AcidsYeast CellsYPD MediaOptical DensityOD ValueCentrifugationResuspensionLysis BufferCell WallsEnzymatic TechniquesPhysical TechniquesSpheroplastsCell Lysis TechniquesSodium Dodecyl SulfateSDSHomogenization
Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Isolating Nucleic Acids from Yeast. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
