הרכבה מלאה בהכלאה במקום (WMISH) היא טכניקה נפוצה המשמשת להדמיית המיקום של RNAs מבוטא בעוברים. בתהליך זה, בדיקות RNA המיוצרות באופן סינתטי קשורות תחילה באופן משלים, או “היברידיות”, לתעתיקים של גני היעד. אימונוהיסטוכימיה או פלואורסצנטיות משמשת לאחר מכן לזיהוי היברידיות RNA אלה, וחושף דפוסים מרחביים וטמפורליים של ביטוי גנים. שלא כמו טכניקות היברידיות מקומיות מסורתיות, הדורשות מקטעי רקמות דקות שתמונותיהם יצטרכו להיות להרכיב מחדש חישובית, טכניקת ההר שלם מאפשרת להעריך דפוסי ביטוי גנים על כל העובר או המבנה.
וידאו זה יציג את המושגים הבסיסיים של כתמי הרכבה שלמה ויפרט את הצעדים הפרוצדורליים העיקריים, כולל עיצוב וייצור של בדיקה, קיבוע והכתמה של עוברים וזיהוי אותות לאחר הכלאה. לאחר מכן הצופים ילמדו על האופן שבו ביולוגים התפתחותיים מיישמים את WMISH במחקרים הנוכחיים.
Procedure
הרכבה מלאה בהכלאה במקום היא טכניקה רבת עוצמה המאפשרת למדענים להבין את הבסיס המולקולרי של התפתחות עוברית. “הר שלם” מציין כי העובר כולו ישמש, לא רק פרוסת רקמה. ” במקום ” הוא ביטוי לטינישפירושו”בעמדה”. ולבסוף, “הכלאה” מתייחסת לכריכה המשלימה של מולקולת RNA המיוצרת באופן סינתטי לתעתיק mRNA ב…