Name: À haut débit, multi-images Cryohistology de minéralisés Tissues (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 18 s
Description: Découvrez la cryohistologie à haut débit pour l'analyse automatisée des tissus minéralisés en biologie musculosquelettique. Cette méthode numérique permet l'imagerie multi-signaux sur une même lame de façon efficace et reproductible.

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Les auteurs tiennent à remercier les sources de financement suivantes : NIH R01-AR063702, R21-AR064941, K99-AR067283 et T90-DE021989.

<ol><li>Schofield, P. N., Vogel, P., Gkoutos, G. V., Sundberg, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+the+elephant%3A+histopathology+in+high-throughput+phenotyping+of+mutant+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Exploring the elephant: histopathology in high-throughput phenotyping of mutant mice.</a> Dis Model Mech. 5 (1), 19-25 (2012).</li>
<li>Adissu, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathology+reveals+correlative+and+unique+phenotypes+in+a+high-throughput+mouse+phenotyping+screen%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+and+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Histopathology reveals correlative and unique phenotypes in a high-throughput mouse phenotyping screen.</a> Disease Models and Mechanisms. 7 (5), 515-524 (2014).</li>
<li>Johnson, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Virtual+histology+of+transgenic+mouse+embryos+for+high-throughput+phenotyping%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Virtual histology of transgenic mouse embryos for high-throughput phenotyping.</a> PLoS Genet. 2 (4), e61(2006).</li>
<li>Ayadi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+large-scale+phenotyping+initiatives%3A+overview+of+the+European+Mouse+Disease+Clinic+%28EUMODIC%29+and+of+the+Wellcome+Trust+Sanger+Institute+Mouse+Genetics+Project%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm.Genome%22%5BJournal%5D)">Mouse large-scale phenotyping initiatives: overview of the European Mouse Disease Clinic (EUMODIC) and of the Wellcome Trust Sanger Institute Mouse Genetics Project.</a> Mamm.Genome. 23 (9-10), 600-610 (2012).</li>
<li>Utreja, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+and+matrix+response+of+temporomandibular+cartilage+to+mechanical+loading%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthr+Cartil%22%5BJournal%5D)">Cell and matrix response of temporomandibular cartilage to mechanical loading.</a> Osteoarthr Cartil. 24 (2), 335-344 (2016).</li>
<li>Dyment, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gdf5+progenitors+give+rise+to+fibrocartilage+cells+that+mineralize+via+hedgehog+signaling+to+form+the+zonal+enthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.Biol%22%5BJournal%5D)">Gdf5 progenitors give rise to fibrocartilage cells that mineralize via hedgehog signaling to form the zonal enthesis.</a> Dev.Biol. 405 (1), 96-107 (2015).</li>
<li>Lalley, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+biomechanical+and+biological+outcomes+in+the+MRL%2FMpJ+murine+strain+following+a+full-length+patellar+tendon+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.Orthop.Res%22%5BJournal%5D)">Improved biomechanical and biological outcomes in the MRL/MpJ murine strain following a full-length patellar tendon injury.</a> J.Orthop.Res. 33 (11), 1693-1703 (2015).</li>
<li>Breidenbach, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ablating+hedgehog+signaling+in+tenocytes+during+development+impairs+biomechanics+and+matrix+organization+of+the+adult+murine+patellar+tendon+enthesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.Orthop.Res%22%5BJournal%5D)">Ablating hedgehog signaling in tenocytes during development impairs biomechanics and matrix organization of the adult murine patellar tendon enthesis.</a> J.Orthop.Res. 33 (8), 1142-1151 (2015).</li>
<li>Ushiku, C., Adams, D., Jiang, X., Wang, L., Rowe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+Bone+Fracture+Repair+in+Mice+Harboring+GFP+Reporters+for+Cells+within+the+Osteoblastic+Lineage%5BTitle%5D)+AND+%22J.Orthop.Res%22%5BJournal%5D)">Long Bone Fracture Repair in Mice Harboring GFP Reporters for Cells within the Osteoblastic Lineage.</a> J.Orthop.Res. 28 (10), 1338-1347 (2010).</li>
<li>Matthews, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+asMA-labeled+progenitor+cell+commitment+identifies+notch+signaling+as+an+important+pathway+in+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J.Bone+Miner.Res%22%5BJournal%5D)">Analysis of asMA-labeled progenitor cell commitment identifies notch signaling as an important pathway in fracture healing.</a> J.Bone Miner.Res. 29 (5), 1283-1294 (2014).</li>
<li>Dyment, N. A., Hagiwara, Y., Jiang, X., Huang, J., Adams, D. J., Rowe, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+of+knee+fibrocartilage+to+joint+destabilization%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Response of knee fibrocartilage to joint destabilization.</a> Osteoarthritis Cartilage. 23 (6), 996-1006 (2015).</li>
<li>Grcevic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+fate+mapping+identifies+mesenchymal+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">In vivo fate mapping identifies mesenchymal progenitor cells.</a> Stem Cells. 30 (2), 187-196 (2012).</li>
<li>Hong, S. H., Jiang, X., Chen, L., Josh, P., Shin, D. G., Rowe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computer-Automated+Static%2C+Dynamic+and+Cellular+Bone+Histomorphometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Tissue+Sci+Eng%22%5BJournal%5D)">Computer-Automated Static, Dynamic and Cellular Bone Histomorphometry.</a> J Tissue Sci Eng. Suppl 1, 004(2012).</li>
<li>Matthews, B. G., Torreggiani, E., Roeder, E., Matic, I., Grcevic, D., Kalajzic, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteogenic+potential+of+alpha+smooth+muscle+actin+expressing+muscle+resident+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Osteogenic potential of alpha smooth muscle actin expressing muscle resident progenitor cells.</a> Bone. 84, 69-77 (2016).</li>
<li>Hagiwara, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fixation+stability+dictates+the+differentiation+pathway+of+periosteal+progenitor+cells+in+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J.Orthop.Res%22%5BJournal%5D)">Fixation stability dictates the differentiation pathway of periosteal progenitor cells in fracture repair.</a> J.Orthop.Res. 33 (7), 948-956 (2015).</li>
<li>Jiang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+analysis+of+GFP+expression+in+murine+bone%5BTitle%5D)+AND+%22J.Histochem.Cytochem%22%5BJournal%5D)">Histological analysis of GFP expression in murine bone.</a> J.Histochem.Cytochem. 53 (5), 593-602 (2005).</li>
<li>Nissanov, J., Bertrand, L., Tretiak, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryosectioning+distortion+reduction+using+tape+support%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc.Res.Tech%22%5BJournal%5D)">Cryosectioning distortion reduction using tape support.</a> Microsc.Res.Tech. 53 (3), 239-240 (2001).</li>
<li>Kawamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+new+adhesive+film+for+the+preparation+of+multi-purpose+fresh-frozen+sections+from+hard+tissues%2C+whole-animals%2C+insects+and+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.Histol.Cytol%22%5BJournal%5D)">Use of a new adhesive film for the preparation of multi-purpose fresh-frozen sections from hard tissues, whole-animals, insects and plants.</a> Arch.Histol.Cytol. 66 (2), 123-143 (2003).</li>
</ol>

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

Ici, nous avons présenté un protocole de cryohistology détaillé pour co-localiser et quantifier plusieurs mesures biologiques en alignant les images provenant de plusieurs cycles de coloration / imagerie sur une seule section. La méthode décrite à l&#39; aide de la cryotape est particulièrement utile car il conserve la morphologie des tissus difficiles à la section (par exemple, os minéralisé et le cartilage). En outre, le tissu sectionné adhère fermement à la lame de verre, ce qui permet plusieurs cycles de co...

La recherche biologique nécessite souvent phénotypage efficace, qui est souvent associée à une sorte d&#39;analyse histologique 1-3. Ce besoin est encore plus évident avec les projets ambitieux de perturber chaque gène dans le génome de la souris 4. Ces analyses histologiques peuvent varier d&#39;évaluer la morphologie des cellules et / ou des caractéristiques anatomiques de l&#39;expression de la cartographie de gènes ou de protéines spécifiques aux cellules individuelles. En fait, l&#39;un des apports fondamentaux de l&#39;histologie au domaine de la génomique est la possibilité d&#39;associer un signal moléculaire spécifique à une région ou d&#39;une cellule de type spécifique. Les méthodes traditionnelles de l&#39;histologie, en particulier pour les tissus musculo-squelettiques, sont souvent longue et laborieuse, nécessitant parfois des semaines pour fixer, détartrer, section, tache, et l&#39;image de l&#39;échantillon, puis d&#39;analyser les images via l&#39;interprétation humaine. L&#39; analyse des signaux moléculaires multiples, que ce soit par immunohistochimie, hybridizat in situion, ou des colorations spéciales, nécessite de multiples sections et même des échantillons multiples pour effectuer de manière appropriée. En outre, ces réponses multiples ne peuvent pas être co-localisés à la même cellule et parfois ne peuvent pas être co-localisée à une région spécifique dans un échantillon donné. Comme le domaine de la génomique et épigénomique se déplace dans l&#39;ère numérique, le champ histologique doit également suivre pour fournir efficace, à haut débit, et l&#39;analyse automatisée d&#39;une variété de signaux moléculaires dans une coupe histologique unique. En effet, il existe une demande pour une amélioration des techniques histologiques qui peuvent associer des signaux moléculaires multiples à des cellules spécifiques dans un échantillon donné. Récemment, nous avons publié un nouveau haut-débit méthode cryohistological pour évaluer plusieurs mesures d&#39;intervention au sein d&#39; une section donnée de tissu minéralisé 5-14. Le procédé consiste à stabiliser la cryosection avec cryotape congelé, faire adhérer l&#39;article collé de façon rigide sur une lame de microscope, etla réalisation de plusieurs cycles de coloration et de l&#39;imagerie sur chaque section. Ces séries d&#39;images sont ensuite alignées manuellement ou grâce à l&#39; automatisation de l&#39; ordinateur avant l&#39;analyse de l&#39; image (figure 1). Ici, nous présentons des protocoles détaillés de ce processus et de fournir des exemples où ces techniques ont amélioré notre compréhension des différents processus biologiques.

<table><tbody><tr><td>10 % de formol neutre tamponné</td><td>Sigma Aldrich</td><td>HT501128-4L</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles. Toxique. Peut être remplacé par 4 % de paraformaldéhyde.</td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S9378</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P5368</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Cryomoules Fisher</td><td>Scientific</td><td>Fisherbrand #22-363-554</td><td>Différentes tailles peuvent être utilisées en fonction du tissu</td></tr><tr><td>Cryomatrice</td><td>Thermo Scientific</td><td>6769006</td><td>Peut être remplacé par d’autres cryomatrices. Cependant, les résines à base de PVA/PEG ont mieux fonctionné entre nos mains.</td></tr><tr><td>2-méthyl-butane</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M32631</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Leica Biosystems</td><td>3050s</td><td>Peut être remplacé par d’autres marques/modèles.</td></tr><tr><td>Disque d’échantillon</td><td>Leica Biosystems</td><td>14037008587</td><td>Peut être remplacé par d’autres marques/modèles.</td></tr><tr><td>Lames de cryostat</td><td>Thermo Scientific</td><td>3051835</td><td>Peut être remplacée par d’autres marques/modèles.</td></tr><tr><td>Cryotape</td><td>Section Lab</td><td>Cryofilm 2C</td><td></td></tr><tr><td>Roller</td><td>Microscopie électronique Sciences</td><td>62800-46</td><td>Peut être remplacé par d’autres marques/modèles.</td></tr><tr><td>Lames de microscope en plastique</td><td>Microscopie électronique Sciences</td><td>71890-01</td><td>Peut être remplacée par d’autres marques/modèles.</td></tr><tr><td>Lames de microscope en verre</td><td>Thermo Scientific</td><td>3051</td><td>Peut être remplacée par d’autres marques/modèles.</td></tr><tr><td>Adhésif optique Norland, 61</td><td>Adhésif optique Norland Norland, 61</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lumière noire UV</td><td>General Electric</td><td>F15T8-BLB</td><td></td></tr><tr><td>Acide acétique glacial</td><td>Sigma Aldrich</td><td>ARK2183</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Chitosan</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C3646</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Microscophes rouges InSpeck</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>I-14787</td><td></td></tr><tr><td>Microsphères vertes InSpeck</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>I-14785</td><td></td></tr><tr><td>Calcein Blue</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M1255</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Calcein</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C0875&nbsp ;</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Alizarine complexone</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A3882&nbsp ;</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Déméclocycline</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D6140&nbsp ;</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S5761</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Glycérol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G5516</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Substrat de phosphatase acide fluorescent jaune ELF 97</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>E-6588</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>62247</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles. Peut être remplacé par du Hoechst 33342 ou d’autres colorants nucléaires.</td></tr><tr><td>TO-PRO-3 (contre-coloration nucléaire Cy5)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>T3605</td><td></td></tr><tr><td>Iodure de propidium</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>R37108</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Acétate de sodium anhydre</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S2889</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>tartrate de sodium dibasique dihydraté</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T6521</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Nitrite de sodium</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S2252</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Tris</td><td>Sigma Aldrich</td><td>15504</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>MgCl2 hexahydrate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M9272</td> Plusieurs <td>fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S7653</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Fast Red TR Salt</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F8764</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles. Peut également être remplacé par d’autres kits de substrat tels que Vector Blue (Vector Laboratories, Cat# SK-5300)</td></tr><tr><td>Naphtol AS-MX&nbsp ;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>N4875</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>N,N diméthylformamide</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D158550</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Bleu toluidine O</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T3260</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Axio Scan.Z1</td><td>Carl Zeiss AG</td><td>Axio Scan.Z1</td><td>D’autres scanners linéaires ou en mosaïque peuvent également être utilisés.</td></tr><tr><td>Jeu de filtres DAPI</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>49000</td><td></td></tr><tr><td>CFP Jeu de filtres</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>49001</td><td></td></tr><tr><td>Jeu de filtres GFP</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>49020</td><td></td></tr><tr><td>YFP Jeu de filtres</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>49003</td><td></td></tr><tr><td>Ensemble de filtres jaunes personnalisés (ELF 97)</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>coutume; HQ409sp, HQ555/30m, 425dxcr</td><td></td></tr><tr><td>Ensemble de filtres TRITC</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>49004</td><td></td></tr><tr><td>Cy5 Jeu de filtres</td><td>Chroma Technology Corp.</td><td>49009</td><td></td></tr><tr><td>CryoJane Tape Transfer System</td><td>Microscopie électronique Sciences</td><td>62800-10</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>CryoJane Tape Windows</td><td>Microscopie électronique Sciences</td><td>62800-72</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr><tr><td>Lames adhésives CryoJane</td><td>Microscopie électronique Sciences</td><td>62800-4X</td><td>Plusieurs fournisseurs disponibles.</td></tr></tbody></table>

À haut débit, multi-images cryohistology de minéralisés tissues

High-Throughput, Multi-Image Cryohistology of Mineralized Tissues

Il existe un besoin croissant de phénotypage et d’histopathologie efficaces d’une variété de tissus. Ce besoin de phénotypage est évident avec les projets ambitieux visant à perturber chaque gène du génome de la souris. La communauté des chercheurs a besoin de moyens rapides et peu coûteux pour phénotyper les tissus par histologie. Les analyses histologiques des tissus squelettiques prennent souvent du temps et, au mieux, sont au mieux semi-quantitatives, nécessitant régulièrement une interprétation subjective des lames par des personnes formées. Ici, nous présentons un paradigme cryohistologique pour un phénotypage efficace et peu coûteux des tissus minéralisés. Tout d’abord, nous présentons une nouvelle méthode de cryosectionnement par bande stabilisée qui préserve la morphologie des tissus minéralisés. Ces sections sont ensuite collées de manière rigide sur des lames de verre et imagées à plusieurs reprises sur plusieurs cycles de coloration. Les images résultantes sont ensuite alignées manuellement ou à l’aide d’un logiciel informatique pour produire des piles composites de plusieurs images superposées. Le protocole permet la co-localisation de nombreux signaux moléculaires vers des cellules spécifiques au sein d’une section donnée. De plus, ces signaux fluorescents peuvent être quantifiés objectivement à l’aide d’un logiciel informatique. Ce protocole permet de surmonter de nombreuses lacunes associées à l’histologie des tissus minéralisés et peut servir de plate-forme pour le phénotypage à haut débit et à haut contenu des tissus musculo-squelettiques à l’avenir.

Un flux de travail général pour le haut-débit, multi-images Cryohistology La figure 1 représente le processus général utilisé pour cette technique. Il comprend plusieurs étapes de fixation à travers plusieurs cycles de l&#39;imagerie et enfin l&#39;image d&#39;alignement / analyse. Le processus peut prendre aussi peu que d&#39;une semaine pour aller de l&#39;échantillon fixati...

Dans ce manuscrit, nous présentons une plateforme de cryohistologie semi-automatisée à haut débit pour produire des images composites alignées de plusieurs mesures de réponse à partir de plusieurs séries d’imagerie fluorescente sur des coupes congelées de tissus minéralisés.

À haut débit, multi-images Cryohistology de minéralisés Tissues

There is an increasing need for efficient phenotyping and histopathology of a variety of tissues. This phenotyping need is evident with the ambitious ...

L'objectif de cette technologie est de fournir des outils histologiques capables d'intégrer des systèmes modèles complexes de manière haut débit, indépendante de l'observateur et entièrement numérique, tout en étant rentable et pertinent pour les biologistes musculosquelettiques. L'histologie, bien qu'essentielle pour la plupart des chercheurs en biologie, est souvent laborieuse et non quantitative. Il existe donc un besoin de techniques histologiques offrant une analyse efficace, haut débit et automatisée.Avec notre plateforme de cryohistologie, le chercheur peut associer plusieurs signaux moléculaires à des cellules spécifiques au sein d'un échantillon donné en réalisant plusieurs cycles d'imagerie et de coloration sur la même lame, de manière haut débit. La démonstration de cette procédure sera effectuée par le docteur Xi Jiang et Li Chen, assistants de recherche dans mon laboratoire, qui ont été à l'origine du développement et de la mise en œuvre de ces techniques. Pour commencer cette procédure, retirez l'échantillon du formol, disséquez tout tissu excédentaire, puis transférez-le dans du saccharose à 30 % préparé dans du PBS 1x.Incuber les échantillons dans du saccharose pend

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Biology

Biologie

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Automated quantification des cellules hématopoïétiques - Interactions cellulaires stromales dans les images histologiques de décalcifiées os

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Horizontal Whole Mount: un protocole de traitement et d&#39;imagerie géniaux pour les sections transversales épaisses en tissu tridimensionnel

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Imagerie multimodale de hiérarchique de coupes sériées, pour trouver les cibles cellulaires spécifiques au sein de grands Volumes

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Tracing génétique clonale à l'aide de la souris confettis pour étudier les tissus minéralisés

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La rétine présente une organisation spatiale complexe à travers sa structure laminaire. Les techniques modernes de transcriptomique spatiale et de séquençage nécessitent des coupes de tissus &lt; 20 μm d’épaisseur, ce qui limite leur applicabilité à la recherche rétinienne. Cette méthode de cryosectionnement fraîchement congelée produit de fines sections de la rétine de la souris tout en préservant les relations spatiales planes, permettant une cartographie moléculaire complète à travers les...

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À haut débit, multi-images Cryohistology de minéralisés Tissues

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