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La identificación fiable de las neuronas dopaminérgicas de estar en el mesencéfalo culturas utilizando ARN-Secuenciación y promotor impulsado TH expresión de EGFP
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Chapters
- 00:05Title
- 00:59Isolation of Embryonic Midbrain
- 02:55Dissociation and Plating of Cells
- 05:34Harvesting Cultured Dopaminergic Neurons for RNA Sequencing
- 07:04Generation, Purification and Amplification of First-strand cDNA
- 09:13Results: RNA-seq Detection of Expressed Transcripts in Single Dopaminergic Neurons
- 09:39Conclusion
En la enfermedad de Parkinson (EP), Sustancia negra (SNC) se degeneran las neuronas dopaminérgicas, que conduce a la disfunción motora. Aquí se presenta un protocolo para el cultivo de las neuronas del cerebro medio ventral de un ratón expresan EGFP impulsada por una secuencia promotora tirosina hidroxilasa (TH), cosechando las neuronas fluorescentes individuales de los cultivos, y la medición de su transcriptoma utilizando ARN-ss.
