A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 01:03Reconstitution of a Histone Octamer with Differentially Isotope-labeled and Asymmetrically-modified Histone H3
- 03:20Tandem Affinity Purification of Reconstituted Octamer
- 05:28Nucleosome Reconstitution
- 07:07Results: Generation of Differentially Isotope-labeled Nucleosomes for Investigating Cross-talk Mechanisms
- 08:58Conclusion
פרוטוקול זה מתאר את הכינון מחדש של נוקלאוזום המכיל היסטונים אחות איזוטופ שכותרתו דיפרנציאלי. במקביל, סימטרית שלאחר translationally נוקלאוזום שונה יכול להיווצר לאחר שימוש בעותק היסטון premodified. תכשירים אלה יכולים לשמש בקלות ללמוד מנגנוני crosstalk השינוי, בו זמנית משני ההיסטונים אחותו, באמצעות ספקטרוסקופיית NMR ברזולוציה גבוהה.
