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Avancée des Techniques de microscopie confocale afin d’étudier les interactions entre protéines et cinétique aux lésions de l’ADN
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Advanced Confocal Microscopy Techniques to Study Protein-protein Interactions and Kinetics at DNA Lesions
DOI:

12:43 min

November 12, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 00:44Cultivation of HeLa-derived Cell Lines
  • 01:48Cell Transfection
  • 03:21Induction of Local DNA Lesions and Confocal Microscopy
  • 04:47Fluorescence Lifetime Image Microscopy
  • 06:24FRET Efficiency Using the FLIM-FRET Script
  • 07:48FRAP Analysis
  • 08:50Results: Analysis of Recruitment of mCherry-tagged PCNA and -53BP1 at DNA Lesions in HeLa Cells
  • 11:00Conclusion

Summary

Automatic Translation

Laser microirradiation est un outil utile pour l’étude de la réparation de l’ADN dans les cellules vivantes. Une approche méthodologique pour l’utilisation des lasers UVA pour induire diverses lésions de l’ADN est montrée. Nous avons optimisé une méthode pour microirradiation locale qui gère le cycle cellulaire normal ; ainsi, les cellules irradiées passent par mitose.

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