/
/
CRISPR-Cas9-baserte genomet Engineering generere Jurkat Reporter modeller for HIV-1 smitte med valgte Proviral integrasjon nettsteder
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Title
- 00:42Choice of Targeted Locus, Guide RNA (gRNA), and Targeting Vector Design
- 03:08CRISPR-Cas9-based Targeting of Jurkat Cells
- 04:36Generation of Clonal Lines and Screening for Correct Targeting
- 07:50Screening of Single-cell Clones by Flow Cytometry and PCR
- 11:46Results: Screening and Analysis of Single-cell Clones for Correct Reporter Integration
- 13:16Conclusion
Vi presenterer en genomet engineering arbeidsflyt for generering av nye i vitro modeller for HIV-1 smitte som recapitulate proviral integrering på utvalgte genomisk områder. Målretting av HIV-avledet journalister er tilrettelagt av CRISPR-Cas9-mediert, områdespesifikke genomet manipulasjon. Detaljert protokoller for encellede klone generasjon, screening og riktig målretting verifisering tilbys.
