本研究提出了一种简单且可行的方法，用于评估白背飞虱在实验室条件下取食水稻时的非偏好性抗性。文中还讨论了当前鉴定白背飞虱和褐飞虱抗性方法的策略优化与改进方案。
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本研究提出了一种简单且可行的方法，用于评估白背飞虱在实验室条件下取食水稻时的非偏好性抗性。文中还讨论了当前鉴定白背飞虱和褐飞虱抗性方法的策略优化与改进方案。
利用抗虫水稻种质资源及其相关基因是培育抗虫品种的首要需求，但水稻抗虫表型鉴定的准确性仍是主要难题。迫切需要开发新方法或改进现有方法，以筛选水稻抗虫性。本文介绍了一种在实验室条件下评估水稻对白背飞虱（Sogatella furcifera）非偏好性抗性的简便可行的方法。通过成对比较法，持续分析成虫白背飞虱在成熟水稻植株上的取食或栖居偏好性，并以白背飞虱在水稻植株上动态分布的变化作为抗性鉴定的指标。该方法操作简便、易于观察，且周期较短。该方法的应用还可拓展至研究其他类似半翅目昆虫（如褐飞虱 Nilaparvata lugens（Stål））的取食与产卵偏好性。
水稻是全球超过三分之一人口的主食，其中90%以上的水稻在亚洲生产并消费1,2。褐飞虱（WBPH）和白背飞虱（BPH）是水稻最具破坏性的害虫，对水稻生产构成严重威胁3。从成本和环境角度考虑，培育和应用抗虫水稻是防控飞虱危害最有效的途径4,5,6。因此，筛选抗性水稻种质资源是培育抗虫水稻的关键前提。准确鉴定水稻抗性表型有助于目标基因的精细定位及后续功能研究。然而，由于抗性机制复杂，表型鉴定已成为主要难点。水稻对害虫的抗性可分为三种类型，即抗生性、耐害性和非偏好性7。每种类型反映了水稻抗虫机制的不同方面。目前，应用最广泛的飞虱抗性筛选方法是标准苗箱筛选技术（SSST），该方法可用于快速鉴定大量水稻植株的抗性表型，并在短时间内获得候选抗性种质系8。
然而，苗期茎鞘刺吸法仅能反映水稻在苗期的抗性，且在评估耐害型抗性机制方面更为有效。水稻对昆虫的抗性还体现在抗生性方面，如若虫存活率、若虫历期和卵孵化率，以及非偏好性方面，如栖境、取食和产卵偏好
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1. 准备飞虱、水稻植株和聚氯乙烯笼
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本研究使用了三个水稻品系。水稻品系 FY01 对褐飞虱（WBPH）敏感，作为对照组。水稻品系 HZ08 和 HZ06 是在 FY01 背景基础上分别导入潜在的抗褐飞虱 X1 基因和 X5 基因的转基因品系。因此，通过比较 HZ08/HZ06 与 FY01 的抗性，可以判断相应插入基因是否具有潜在抗性功能。本研究比较了两种水稻植株在取食或栖居方面的抗性表现，从而揭示这两个基因是否可能参与非偏好型抗性机制。
记录了不同时间点实验水稻植株上褐飞虱（WBPH）的数量。通过将每株水稻上的褐飞虱数量除以笼内两株水稻植株上褐飞虱总数（不包括位于地面或笼壁等其他位置的个体），计算出褐飞虱的比率。使用商业软件进行进一步的统计数据分析。采用单因素方差分析（ANOVA），随后进行Tukey多重比较检验，以评估各比较组之间的显著性差异。百分比数据在进行方差分析前经反正弦平方根转换。结果表明，在HZ08和FY01两个水稻品系的比较实验中，0至6小时初期阶段，两个品系水稻上的褐飞.......
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水稻植株在成熟期会通过叶片鞘表面的一种特殊物理结构释放挥发性次生代谢物，以控制害虫或降低其交配能力（如在褐飞虱中所示），这是关键的抗性机制13。在水稻植株中，非偏好性不仅与取食行为有关，还与栖息环境和交配行为相关。然而，目前的研究主要集中在若虫阶段的非偏好性4,12，尚需建立一种用于鉴定成虫非偏好性的新方法。本研究主要描述了一种用于鉴定成熟水稻植株对成年褐飞虱非偏好型抗性的方法。该方法所需实验材料较少，操作步骤简便。但前期准备工作极为重要，因为实验过程中需要大量褐飞虱。为确保实验结果的准确性和说服力，必须使用处于相似生长阶段的褐飞虱。考虑到水稻生长期较长，需提前周密规划实验，以保证水稻植株成熟时有充足的飞虱来源。此外，每种水稻品系应种植多个重复作为备用。需要注意的是，在执行步骤2.8时，不要将褐飞虱直接释放到水稻植株上，而应尽量确保在实验开始时飞虱在笼内均匀分布。
该方法更适用于飞行害虫的非趋性抗性鉴定，尤其适用于那些.......
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作者无任何利益冲突需要披露。
作者感谢杨朗博士在白背飞虱饲养和水稻培养方面提供的帮助。本工作得到了深圳市大鹏新区产业发展专项资金（项目编号：KY20180216 和 KY20180115）的资助。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 温湿度可控室 | Ningbo Jiangnan Instrument Factory | SZJYS2013 | 温度、相对湿度、光周期控制 |
| 带海绵塞的玻璃管 | / | / | 直径 2 cm，高 15 cm |
| 手工制作的吸虫器 | / | / | / |
| 防虫网笼 | / | / | 200目，（长 × 宽 × 高，75 × 75 × 75 cm） |
| 尼龙网 | / | / | 200目 |
| 水稻土 | / | / | / |
| 塑料育苗盒 | / | / | （长 × 宽 × 高，20 × 15 × 10 cm） |
| 塑料育苗盆 | / | / | 直径10 cm |
| 塑料托盘 | / | / | （直径 × 高，28 × 10 cm） |
| FY01品系水稻种子 | / | / | 60粒 |
| HZ06品系水稻种子 | / | / | 30粒 |
| HZ08品系水稻种子 | / | / | 30粒 |
| TN1品种水稻种子 | / | / | 若干 |
| 橡胶圈 | / | / | 直径1.5 mm，周长32 cm |
| 透明胶带 | / | / | / |
| SPSS Statistics 19.0 | IBM Corporation | / | 统计数据分析 |
| 订书机 | / | / | / |
| 透明PVC | / | / | 尺寸为120 cm × 90 cm，厚度0.5 mm |
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