Neuroscience
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Summary April 21st, 2020
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此处介绍的是一种用于制造植入式系统的协议,用于在体内按时间顺序记录唤起和自发的肌电图电位。该系统适用于神经损伤后喉部肌肉再生的调查。
Transcript
该系统可用于制造一个简单、经济且可植入的系统,用于长期记录唤起或自发的肌电位。与传统慢性 EMG 记录系统相比,该系统的主要优点是导线盘绕,可抵抗唤醒移动动物的破损或中断。该技术的主要应用是研究喉肌肉在电调节疗法的存在下改造的特异性,以避免合成。
该技术还可用于其他神经肌肉系统,其中慢性神经刺激和/或E动激素记录在清醒移动的动物是必要的。介绍这个程序的将是我实验室耳鼻喉科研究助理教授黄山。在准备 RLN 刺激电极袖口之前,将每个袖口的 Teflon 涂层多丝 316 不锈钢丝长度的 170 厘米切割,并使用盘绕装置将导线卷成 12 厘米长的弹簧。
如有必要,拉伸弹簧以增加每个植入点的长度。将三毫米的一端和 10 毫米的另一端保持直,并去绝缘每一端。然后将镀金铜母针焊接到每个卷绕引线三毫米端。
要准备神经袖口,请从一卷管子中切开五毫米的硅管段。在操作显微镜下,使用 25 量表皮针刺穿管壁 1.5 毫米,从端和关闭中心靠近内壁。将一根引线10毫米端回填到针头尖端,并提取针头,将去绝缘部分放入管中。
弯曲回管外裸露的导线端,将导线扭到导线进入管的引线上,将导线固定到管上。为了从管的另一端插入第二个引线 1.5 毫米,请将入口点与第一引线入口点对齐。使用针头刺穿墙壁,并在第一条引线对面的内壁附近滑动其轴。
用去绝缘的 10 毫米端回填针头并取出针头。两个刺激电极应形成一个45度的V形,将跨越神经,以确保电流通过神经从阳极传递到阴极。使用一双弯曲的剪刀在电极入口点对面的管壁上做一个 S 形的缝隙,并使用弯曲的显微手术针将长度为 6-0 的单丝非吸附缝合线插入袖口壁的每一端。
将一团医用级A型硅胶与EPpendorf管中的溶剂混合,在涡流搅拌器上混合。使用 30 单位胰岛素注射器应用凝胶准备,重新绝缘袖口外所有裸露的裸线。要准备 SLN 刺激电极袖口,请组装袖口,就像使用更小的直径管演示的一样。
要准备 PCA EMG 记录电极,请为 PCA 肌肉电极组装盘绕引线,并在铅的三毫米端焊接一个母针,如所证明的。使用 25 量针将 PCA 肌肉引线 10 毫米端插入深层脑刺激电极的尖端,并弯曲引线端形成挂钩。然后剪辑引线,以提供总共五毫米的录制长度。
要准备一个皮肤插座,用于连接电极和外部设备之间的连接,从单排母针条连接器中切割两块 17.5 毫米的片断,每个片包含八个针孔,并使用砂纸对每块的外部表面进行粗加工。使用酚将砂片粘在烟罩中,将产生的双排接头放在烟罩中 60-80 度水的容器中 30 分钟。当胶水变硬时,从条上切出一个 25.6 毫米的面板。
在面板中间钻一个洞。用钻头和手术刀放大孔,使一个5.4%17.4毫米的矩形孔以面板中间为中心。使用文件完成孔的角并平方。
胶水干燥后,将双排接头的边缘插入面板矩形孔内具有较大直径孔的接头,直到与面板表面齐平。使用苯酚将接头粘附在面板上,将组件放入 60-90 度水中。当苯酚硬化后,在面板的每一角和面板的每一侧从两端的一侧钻一个1.3毫米的孔。
切割一根15毫米长的针织聚酯嫁接管,并使用皮下针将不锈钢丝线穿过墙壁,沿移植物的长度相距3.8毫米,将管子固定到组件上。在接头的每个角处放置等等空间的凹口,将导线固定在装配表面上,并使用钳子扭动每根导线的末端,将管子夹紧到组件上。然后在插座一端的聚酯贴片上做一个永久标记。
做一个中线颈部切口从甲状腺缺口到毛孔。在麻醉犬中露出软骨的劣等边框后,将刺激袖口放在每个双边 SDN 和 RLN 上,并使用封闭的缝合线关闭每个袖口的嘴唇。使用活检冲孔在甲状腺软骨前表面的每一侧制作一个四毫米软骨窗口,并暴露甲状腺素侧向肌结物复合物的横向方面。
使用 23 表针将每个 EMG 记录电极的巴布插入 TA LCA 复合体,并将聚酯贴片缝合到四个角的每个尖骨软骨上。将深层脑刺激电极及其伴用钩线 EMG 记录电极放在 PCA 肌肉下方,并使用内窥镜确认刺激会为每个通道产生声折诱拐。使用 4-0 不可吸收的缝合线,使用锁定在引线上的锚将深层脑刺激电极锚定在金刚软骨上。
使用从 hemostat 中塑造的插入工具,将神经刺激 EMG 记录电极的所有导线通过母针插入插座。使用骨水泥密封插座的劣质表面,以绝缘铅销结。当水泥硬化后,将贮器放在中线切口的四角端,然后通过聚酯裙将插座缝合到皮下组织。
然后通过面板孔通过缝合线,将皮肤边缘连接到插座上。此处显示一个具有代表性的 EMG 记录,该会话中没有 RLN。在PCA肌肉的录音中,RLN刺激产生刺激神器,然后是巨大的诱发E姆格电位。
在从胸腺十字体横向肌结的录音中,SLN 刺激产生刺激神器,随后是短延迟单核关节肌肉反应和更长的延迟多合成反射光色闭合反应。在这段录音中,在正常灵感期间,可以从PCA肌肉记录自发E姆格活动的突发。这种吸气E姆格活动在二氧化碳的输送过程中以较慢的扫描速度增加。
甲状腺腺素侧向肌结物复合物没有吸气内向,因此不应从这些肌肉中检测到吸气电位。该技术已被调整,以研究电调节对兔子面部肌肉的再内侧特异性的影响,以及老化的大鼠舌头肌肉萎缩。
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