Journal
/
Neuroscience
/
Isolering af region-specifikke mikroglia fra en voksen mus hjerne halvkugle for dyb single-celle RNA Sequencing
JoVE Journal
Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Neuroscience
Isolation of Region-specific Microglia from One Adult Mouse Brain Hemisphere for Deep Single-cell RNA Sequencing

Isolering af region-specifikke mikroglia fra en voksen mus hjerne halvkugle for dyb single-celle RNA Sequencing

DOI:
10.3791/60347-v

•

09:49 min

•

December 03, 2019

•

,
1Department of Neurobiology,Stanford University School of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:43Brain Region Dissection
  • 01:43Mechanical Tissue Dissociation
  • 02:40Myelin Removal
  • 04:25Staining for Fluorescence-activated Cell Sorting
  • 05:18Index FACS Sorting
  • 05:46Single-cell RNA-sequencing Library Preparation
  • 07:17Results: Isolation of Region-Specific Microglia for Deep Single-Cell RNA Sequencing
  • 09:16Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Vi leverer en protokol til isolering af microglia fra forskellige dissekted regioner af en voksen mus hjerne halvkugle, efterfulgt af semi-automatiseret bibliotek forberedelse til dyb single-celle RNA sekvensering af fuld længde transkriptomer. Denne metode vil bidrage til at belyse funktionelle heterogenitet mikroglia i sundhed og sygdom.

Tags

MicrogliaSingle-cell RNA SequencingBrain RegionsCell IsolationCell SeparationDounce HomogenizerMagnetic SeparationRNA ExtractionLibrary PreparationDeep Sequencing

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Ikke-Laser Capture Mikroskopi Tilgang til mikrodissektion af diskrete Mouse Brain Regioner for Total RNA Isolation og downstream næste generation sekventering og Gene Expression Profiling

En mus, to kulturer: isolering og dyrkning af voksne neurale stamceller fra Two Neurogene zoner Individuel Mus

Brain Slice Biotinylering: En<em> Ex Vivo</em> Tilgang til Measure Region-specifikke plasmamembranprotein Trafficking in Adult neuroner

Karakterisering og Isolation af musen primære mikroglia ved tæthed Gradient centrifugering

Isolation og RNA udvinding af neuroner, makrofager og mikroglia fra larve zebrafisk hjerner

Isolering af voksen rygmarven kerner for massivt Parallel Single-kernen RNA sekventering

Encellede RNA sekventering af Fluorescently mærket mus neuroner ved hjælp af manuel sortering og dobbelt In Vitro transskription med absolut tæller sekventering (DIVA-Seq)

Vurdering af langvarig depression induktion i voksne cerebellar skiver

Opnåelse humane mikroglia fra voksent humant hjernevæv

Kvantificering af globale histonposttranslationelle modifikationer ved hjælp af intranukleær flowcytometri i isoleret musehjernemikroglia

Read Article