Name: Farelerin Motor Korteksinde LazerE Bağlı Beyin Hasarı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-09-26T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 5 s
Description: Öğrenin, farelerin motor korteksinde lazerle travmatik beyin hasarı modeli oluşturma yöntemini. Bu teknik düşük değişkenlik ve mortalite oranlarıyla güvenilir sonuçlar sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Soroka Üniversitesi Tıp Merkezi Anesteziyoloji Bölümü'ne ve Negev Ben-Gurion Üniversitesi laboratuvar personeline bu deneyin performansına yardımcı olan yardımcılarından dolayı teşekkür ederiz.

Aşağıdaki prosedür Avrupa Topluluğu'nun Deneysel Hayvanların Kullanımı Yönergeleri'ne göre yürütülmüştür. Deneyler, Negev'deki Ben-Gurion Üniversitesi Hayvan Bakım Komitesi tarafından da onaylandı.
1. Hayvan seçimi ve hazırlanması
<ol><li>Bu işlem için hiçbir overt patoloji ile 300 ila 350 g ağırlığında 65 erkek Sprague-Dawley sıçan seçin. Küçük boyutu MCAO prosedürü için teknik zorluklar teşkil.</li>
	<li>Kafes başına 3 sıçan atayın ve en az 3 gün uyum sağlar.</li>
</ol>2. MCAO prosedürü
<ol><li>MCAO için 25 sıçan seçin ve prosedür11ile ilişkili -20 mortaliteye izin verin.</li>
	<li>McAO'yı standart bir teknik kullanarak gerçekleştirin, daha önce ayrıntılı olarak açıklandığı gibi12.</li>
</ol>3. Lazer kaynaklı beyin hasarı deneysel prosedür
<ol><li>Lazer grubu olarak işaretlenmiş bir gruba 20, başka bir kontrol grubuna (sahte işletilen) 20 fare atayın.</li>
	<li>Lazer grubu sıçanları 50J X 10 noktada lazer ışınlama ile aşağıdaki şekilde takın:<ol>
<li>Spontan havalandırma için izin oksijen% 2 izofluran karışımı ile anestezi sıçan. Çekilme refleksinin yokluğunu görmek için kuyruğu forsepslerle sıkıştırarak yeterli anestezi derinliği olup olmadığını kontrol edin.</li>
		<li>Rektal sıcaklık teredirısıtma yastığı kullanarak deneysel prosedür boyunca farenin temel vücut sıcaklığını 37 °C'de koruyun.</li>
		<li>Bir tıraş makinesi ile yerel saç çıkarın ve% 70 alkol ve% 0.5 klorheksidin glukonat ile dezenfekte. Dezenfeksiyon adımını iki kez daha tekrarlayın. NOT: Cerrahi kesi büyüklüğü yaklaşık 3 cm olmalıdır. Kesi bölgesi etrafında en az 2 cm saç çıkarın.</li>
		<li>Sıçanı stereotaksik bir baş tutucuya yatkın bir pozisyonda yerleştirin ve kafa derisini yanal olarak yansıtmak ve Bregma ile Lambda arasındaki alanı ortaya çıkarmak için 3 cm'lik bir kesi yapın.</li>
		<li>Burun konisi ile anestezi yi koruyun.</li>
		<li>50J X 10 noktalarıyönetmek için Neodimyum-YAG (Nd-YAG) lazer (Nd-YAG) lazer (pik dalga boyu 1064 nm) kullanın, 1 s darbe süresi ile, sağ yarımküreüzerinde kafatasının maruz kalan alana.</li>
		<li>Lazer ışını üretmek için cihazın lazer üreten kısmının maruz kalan bölgeden 2 mm uzaklıkta olduğundan emin olun. Farklı enerji/yüzey kombinasyonlarının dikkatli bir şekilde değerlendirilmesi nden sonra 50J X 10 puan seçilmiştir. Bu kombinasyon verimlidir ve ikincibir 10'dandaha az bir süre için uygulamadan sonra kafatasıkemik yıkımına neden olmaz. NOT: 2 mm lazer ışınının terminali (geçtiği optik kablodan) ile kafatası kemiği arasındaki mesafedir. Bir odaklama lens kullanılması durumunda, mesafe, merceğin istenilen hasar alanına odaklama eğim açısı dikkate alınarak hesaplanmalıdır. Uygun eğitim ve göz koruması da dahil olmak üzere bir lazer cihazı kullanırken uygun güvenliği sağlayın.</li>
		<li>Cihazdan sıçan çıkarın ve 3-0 ipek cerrahi dikiş ile kafa derisi kapatın.</li>
		<li>Anesteziyi durdurun ve tedavi için fareyi kafesine geri getirin. Ameliyat sonrası ağrıyı hemen azaltmak için lokal olarak 0.1 mL 0.1 mL bupivacaine uygulayın. NOT: Doğru yapılırsa işlemin tamamı 5 dakikadan az sürmelidir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Anestezi sonrası iyileşme sırasında herhangi bir sıkıntı belirtisi için sıçanı gözlemleyin. Anesteziortaya çıkmadan önce, postoperatif analjezi için 0.01mg/kg intramüsküler buprenorfin verin ve en az 48 saat boyunca her 12 saatte bir tekrarlanan dozlarla devam edin.</li>
	<li>Lazere maruz kalmadan kontrol fareleri aynı koşullara tabi türün.</li>
</ol>4. Nörolojik şiddet skoru (NSS)
<ol><li>Lazer kaynaklı beyin hasarından sonra nörolojik şiddet skoru 24 saat 43 puan13kullanarak değerlendirin. Daha önce ayrıntılıolarak 13,nörolojik açıkları, davranış bozuklukları, ışın dengeleme görevi ve refleksleri için hayvanlar test edin.</li>
</ol>5. Yaralanma sonrası manipülasyonlar
<ol><li> </li><li></li><li></ol><ol><li> <ol><li><li><li></li><li></li><li></li><li> <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/60928/60928eq1.jpg"></li><li> <img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/60928/60928eq2.jpg"></li></ol></li><li> <ol><li><li></li><li><ol><li><li></ol></li><li><li><li><li></li><li> </li></ol></li></ol>

<ol><li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+health+estimates%3A+deaths+by+cause%2C+age%2C+sex+and+country%2C+2000-2012%5BTitle%5D)+AND+%22World+Health+Organization%22%5BJournal%5D)">Global health estimates: deaths by cause, age, sex and country, 2000-2012.</a> World Health Organization. 9, Geneva. (2014).</li>
<li>Meadows, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+focal+and+multifocal+cerebral+ischemia%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Reviews+in+the+Neurosciences%22%5BJournal%5D)">Experimental models of focal and multifocal cerebral ischemia: a review.</a> Reviews in the Neurosciences. 29, 661-674 (2018).</li>
<li>Durukan, A., Strbian, D., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+ischemic+stroke%3A+a+useful+tool+for+stroke+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Pharmaceutical+Designs%22%5BJournal%5D)">Rodent models of ischemic stroke: a useful tool for stroke drug development.</a> Current Pharmaceutical Designs. 14, 359-370 (2008).</li>
<li>Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+ischemic+stroke+and+their+application+in+clinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Design%2C+Development+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research.</a> Drug Design, Development and Therapy. 9, 3445-3454 (2015).</li>
<li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li>
<li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+model+of+focal+ischemia+using+an+internal+carotid+artery+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">An experimental model of focal ischemia using an internal carotid artery approach.</a> Journal of Neuroscience Methods. 193, 246-253 (2010).</li>
<li>Zhao, Q., Memezawa, H., Smith, M. L., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperthermia+complicates+middle+cerebral+artery+occlusion+induced+by+an+intraluminal+filament%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Hyperthermia complicates middle cerebral artery occlusion induced by an intraluminal filament.</a> Brain Research. 649, 253-259 (1994).</li>
<li>Braeuninger, S., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia%3A+procedural+pitfalls+and+translational+problems%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Translational+Stroke+Medicine%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal cerebral ischemia: procedural pitfalls and translational problems.</a> Experimental and Translational Stroke Medicine. 1, 8(2009).</li>
<li>Choi, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobehavioural+deficits+correlate+with+the+cerebral+infarction+volume+of+stroke+animals%3A+a+comparative+study+on+ischaemia-reperfusion+and+photothrombosis+models%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Neurobehavioural deficits correlate with the cerebral infarction volume of stroke animals: a comparative study on ischaemia-reperfusion and photothrombosis models.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 33, 60-69 (2012).</li>
<li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Alternative+Model+of+Laser-Induced+Stroke+in+the+Motor+Cortex+of+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Procedure+Online%22%5BJournal%5D)">An Alternative Model of Laser-Induced Stroke in the Motor Cortex of Rats.</a> Biological Procedure Online. 21, 9(2019).</li>
<li>Bleilevens, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+anesthesia+and+cerebral+blood+flow+on+neuronal+injury+in+a+rat+middle+cerebral+artery+occlusion+%28MCAO%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of anesthesia and cerebral blood flow on neuronal injury in a rat middle cerebral artery occlusion (MCAO) model.</a> Experimental Brain Research. 224, 155-164 (2013).</li>
<li>Kuts, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Middle+Cerebral+Artery+Occlusion+Technique+for+Inducing+Post-stroke+Depression+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (147), e58875(2019).</li>
<li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphological+and+neuro-behavioral+parallels+in+the+rat+model+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Morphological and neuro-behavioral parallels in the rat model of stroke.</a> Behavioural Brain Research. 223, 17-23 (2011).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Lazer grubunda ölüm veya SAH olmadığı göz önüne alındığında, lazer tekniğinin minimal invaziv olduğunu varsaymak yanlış olmaz. Ölüm ve SAH birincil nedeni intrakranial basınç (ICP) bir yükseklik yol açan kan damarlarının hasarı, orijinal MCAO teknikleri gösterildiği gibi10. Lazer grubunda ölüm ve SAH yokluğu lazerlerin özel etkileri nedeniyle muhtemeldir: onlar kan damarları üzerinde doğrudan etkisi yoktur ve sızıntı durumunda pıhtılaşma neden olabilir. Düşük enfarkt hacmi ve beyin ödemi de ölüm r...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/60928">Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats</a>. The Authors section was updated.
One of the author names was updated from:
Dmitri Frank
to
Dmitry Frank

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/60928">Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats</a>. The Authors section was updated.

Erratum: Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Küresel olarak, inme ölüm ikinci önde gelen nedeni ve sakatlık üçüncü önde gelen nedeni1. İnme de ağır sakatlık yol açar, genellikle tıbbi personel ve akrabalarıekstra bakım gerektiren. Bu nedenle, bozukluk ile ilişkili komplikasyonları anlamak ve daha olumlu sonuçlar için potansiyelini artırmak için bir ihtiyaç vardır.
Hayvan modellerinin kullanımı hastalıkları anlamak için ilk adımdır. En iyi araştırma sonuçlarını sağlamak için, tipik bir model basit bir teknik, karşılanabilirlik, yüksek tekrarlanabilirlik ve minimum değişkenlik içerecektir. İskemik inme modellerinde belirleyiciler beyin ödemi hacmi, infarkt boyutu, kan-beyin bariyeri ölçüde (BBB) arıza, ve fonksiyonel bozukluk genellikle nörolojik şiddetpuanı2 ile değerlendirilir .
Kemirgen modellerinde en yaygın olarak kullanılan inme indüksiyon tekniği orta serebral arteri (MCA) geçici veya kalıcı olarak3. Bu teknik insanlarda olanlara benzer bir inme modeli üretir: bu konturlu alanı çevreleyen bir penumbra vardır, son derece tekrarlanabilir, ve iskemi süresi ve reperfüzyon düzenler4. Bununla birlikte, MCAO yöntemi bazı komplikasyonlar vardır. Teknik intrakranial kanama ve görme korteks ve sık sık ek sonuçlara yol ortak hipertermi bir disfonksiyon ile ipsilateral retina yaralanması eğilimli5,6,7. Diğer sınırlamalar indüklenen inme yüksek varyasyonları dahil (istenmeyen bölgelere iskemi olası uzantısı kaynaklanan, dış karotis arter bölgesi gibi), MCA yetersiz oklüzyon, ve erken reperfüzyon. Ayrıca, farklı suş ve boyutlarda sıçanlar çeşitli enfarktüs hacimleri8sergilerler. Bahsedilen tüm dezavantajlara ek olarak, MCAO modeli derin beyin bölgelerinde küçük izole inmeler neden olamaz, kateterizasyon için minimum damar boyutu gereksinimi açısından teknik olarak sınırlı olduğundan. Bu alternatif bir model için ihtiyaç daha kritik hale getirir. Başka bir yöntem, fototromboz, MCAO prosedürleri için olası bir alternatif sağlar ama verimliliği geliştirmek değildir9. Bu teknik ışıkla inme hedefleyen ve önceki modellerde bazı iyileştirmeler sunuyor. Ancak, fototromboz ikincil kombinasyonları ile ilişkili bir invaziv kraniyotomi gerektirir9.
Özetlenen eksikliklerin ışığında, burada sunulan protokol kemirgenlerde beyin hasarına neden olmak için yetenekli bir alternatif lazer tekniği sağlar. Lazer tekniğinin etki mekanizması, lazerin canlı dokular üzerinde verilen fototermal etkilerine dayanır ve bu da vücut dokuları tarafından ışık ışınlarının emilimine ve ısıya dönüştürülmesine yol açar. Lazer tekniği kullanmanın avantajları güvenliği ve manipülasyon kolaylığıdır. Bir lazerin kanamayı durdurmak için ısı üretme yeteneği tıpta çok önemli hale getirirken, belirli bir buluşma noktasında farklı ışınları yükseltebilme yeteneği lazerlerin hedef nokta10'unönünde duran sağlıklı dokuları yok etmekten kaçınmasını sağlar. Bu protokolde kullanılan lazer ışını, kemik gibi düşük sıvı bir ortamdan, enerjisini yaymadan ve/veya herhangi bir tahribata neden olmadan geçebilir. Beyin dokuları gibi yüksek sıvı bir ortama ulaştığında, enerjisini hedef dokuları yok etmek için kullanır. Teknik, bu nedenle, beynin uygun alanda sadece beyin hasarı neden olabilir.
Burada sunulan teknik, ışınlama düzeylerini düzenleme yeteneğinin muazzam bir miktar gösterdi, başından itibaren amaçlanan beyin hasarı seçilen varyasyonları üreten. Hem korteks hem de striatumu etkileyen orijinal MCAO'nun aksine, lazer tekniği beyin hasarının etkisini düzenlemeyi başardı ve sadece amaçlanan motor korteksüzerinde yaralanmaya neden oldu. Burada, lazer kaynaklı beyin hasarı protokolü ve sıçanların serebral korteks üzerinde yapılan işlem için temsili sonuçların bir özeti sağlanır.

<table><tbody><tr><td>2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>298-96-4</td><td></td></tr><tr><td>%50 trikloroasetik asit</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>76-03-9</td><td></td></tr><tr><td>Beyin ve Doku Matrisleri</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>15013</td><td></td></tr><tr><td>Kanül Venflon 22 G</td><td>KD-FIX</td><td>1.83604E+11</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj Sigma 2-16P</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>Sigma 2-16P</td><td></td></tr><tr><td>Kompakt Analitik Teraziler</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>HR-AZ/HR-A</td><td></td></tr><tr><td>Dijital Tartı Terazisi</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>Rs 4.000</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon makası</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>Z265969</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf pipet</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>Z683884</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Tüpü</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>EP0030119460</td><td></td></tr><tr><td>Etanol %96</td> <td>ROMİK</td><td></td><td>Yanıcı Sıvı</td></tr><tr><td>Evans Mavi %2</td> <td>SIGMA - ALDRICH</td><td>314-13-6</td><td></td></tr><tr><td>Floresan dedektörü</td><td>Tecan, M&auml; nnedorf İsviçre</td><td>modeli Infinite 200 PRO çok modlu okuyucu</td><td></td></tr><tr><td>Termometreli ısıtıcı</td><td>Isıtma pedi-1</td><td>Model: HEATINGPAD-1/2</td><td></td></tr><tr><td>İnfüzyon Manşeti</td><td>ABN</td><td>IC-500</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran, USP %100</td> <td>Piramamal Critical Care, Inc</td><td>NDC 66794-017</td><td></td></tr><tr><td>Multiset</td><td>TEVA MEDICAL</td><td>998702</td><td></td></tr><tr><td>Olympus BX 40 mikroskop</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Optik tarayıcı</td><td>Canon</td><td>Cano Scan 4200F</td><td></td></tr><tr><td>Petri tabakları</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>P5606</td><td></td></tr><tr><td>Neşter bıçakları 11</td><td>SIGMA - ALDRICH</td><td>S2771</td><td></td></tr><tr><td>Sharplan 3000 Nd:YAG (neodimyum katkılı itriyum alüminyum granat) lazer makinesi</td><td>Lazer Endüstrileri Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereotaksik kafa tutucu</td><td>KOPF</td><td>900LS</td><td></td></tr><tr><td>Steril Şırınga 2 ml</td><td>Braun</td><td>4606027V</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga İğnesi 27 G</td><td>Braun</td><td>305620</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerin motor korteksinde lazere bağlı beyin hasarı

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Deneysel kemirgen modellerinde inme indükleme için yaygın bir teknik geçici içerir (genellikle MCAO-t olarak gösterilir) veya kalıcı (MCAO-p olarak belirlenmiş) orta serebral arter tıkanıklığı (MCA) bir kateter kullanarak. Ancak bu genel kabul görmüş tekniğin bazı sınırlamaları vardır ve böylece geniş kullanımını sınırlandırmıştır. Bu yöntemle inme indüksiyonu genellikle iskemik alanın lokalizasyonu nda ve boyutunda yüksek değişkenlik, periyodik kanama oluşumları ve yüksek ölüm oranları ile karakterizedir. Ayrıca, geçici veya kalıcı prosedürlerden herhangi birinin başarıyla tamamlanması uzmanlık gerektirir ve genellikle yaklaşık 30 dakika sürer. Bu protokolde, kemirgen modellerinde beyin hasarının indüklemesi ve incelenmesi için alternatif bir yöntem olarak hizmet edebilen bir lazer ışınlama tekniği sunulmuştur.
Kontrol ve MCAO gruplarında sıçanlar ile karşılaştırıldığında, lazer indüksiyon ile beyin hasarı vücut ısısı, infarkt hacmi, beyin ödemi, intrakraniyal kanama ve mortalite azaltılmış değişkenlik gösterdi. Ayrıca, lazer kaynaklı bir yaralanma kullanımı, hem motor korteks inanın hem de striatal dokuların tahrip edildiği MCAO deneylerinin aksine sadece motor kortekste beyin dokularında hasara yol açtı.
Bu araştırmadan elde edilen bulgular lazer ışınlama motor kortekste beyin hasarı indükleyen alternatif ve etkili bir teknik olarak hizmet olabileceğini düşündürmektedir. Yöntem ayrıca yordamı tamamlamak için süreyi kısaltır ve uzman işleyicileri gerektirmez.

Kontrol veya deney gruplarında ölüm veya SAH kaydı bulunmamaktadır(Tablo 1). MCAO grubunda hem mortalite hem de SAH oranı idi.
Her iki grubun sıçanlarında göreceli vücut ısısı değişiklikleri de benzerdi, her iki grubun değişkenlik farkı rağmen(Tablo 1).
Hem lazer (16 ± 1.1) hem de MCAO (20 ± 1.5) modellerinde, sham-operated kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha kötü NSS vardı (1 ± 0.3; Tablo 1; p&lt;0.01).
...

Burada sunulan protokol beyin hasarı bir kemirgen modeli oluşturmak için bir teknik gösterir. Burada açıklanan yöntem lazer ışınlama kullanır ve motor korteks hedefler.

Farelerin Motor Korteksinde LazerE Bağlı Beyin Hasarı

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Protokolümüz, motor kortekste odak etkisi yaratmak için lazer ışınlama kullanan farelerde travmatik beyin hasarı yaratmak için yeni bir metodoloji sunmaktadır. Bu tekniğin en büyük avantajı enfarktüs alanındaki düşük değişkenlik, düşük mortalite oranları ve uzman işleyicileri gerektirmeyen prosedürün göreceli basitliğidir. Prosedürü gösteren Dmitry Natanel, bizim laboratuvardan bir araştırmacı olacaktır.Lazer kaynaklı beyin hasarı gerçekleştirmek için, ilk olarak 20, 300 ila 350 gram Sprague Dawley sıçanı lazer grubuna, 20'sini ise Sham tarafından işletilen kontrol grubuna atayın. Çekilme refleksyanıt eksikliği doğruladıktan sonra, rektal sıcaklık düzenlenmiş ısıtma yastığı bir sıçan yerleştirin ve kesi etrafında yaklaşık iki santimetre saç serbest marjı ile yaralanma sitesinden yeterli saç kaldırmak için bir tıraş makinesi kullanın. Açıkta kalan deriyi %70 etanol ile dezenfekte edin ve fareyi stereotaksik bir kafa tutucuya yatkın konuma getirin.Bregma ve lambda arasındaki alanı ortaya çıkarmak için kafa derisi lateral yansıması sağlamak için üç santimetrelik bir kesi olun. Kafatasından iki milimetre uzaklıkta 1064 nanometre lik en yüksek dalga boyuna sahip Nd:YAG lazeri tutarak, k

laser-induced-brain-injury-in-the-motor-cortex-of-rats

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Glokom, dünyada körlüğün en önemli nedenlerinden biridir. Yükselmiş göz içi basıncı önemli bir risk faktörüdür. Lazer fotokoagülasyon bağlı oküler hipertansiyon, iyi kurulmuş hayvan modellerinde biridir. Bu video sıçan Argon lazer fotokoagülasyon oküler hipertansiyon nasıl ikna göstermektedir.

Lazer Kaynaklı SD Sıçanlarda Kronik Oküler Hipertansiyon Modeli

Kaynak: Wilson, K.L., et al. İnme Sonrası Beyne Hidrojel Biyomateryal İskele Enjeksiyonu.  J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, inme sonrası bir farenin inme çekirdeğine bir hidrojelin stereotaksik enjeksiyonunu göstererek, hücre dışı matrisi taklit eden, hücresel infiltrasyonu destekleyen ve anjiyogenezi destekleyen iskele oluşumundaki rolünü vurgulayarak inme iyileşmesindeki nöroterapötik potansiyelinin altını çizmektedir.

İnme Sonrası Fare Modeline Hidrojelin Stereotaktik Enjeksiyonu

Bu video, bir lazer kullanarak sıçan motor korteksinde hassas, kontrollü beyin hasarı oluşturmak için bir prosedürü göstermektedir.

Bir Sıçan Modelinde Lazer Kaynaklı Beyin Hasarı Gerçekleştirme

Kaynak: Kuts, R.  et al. Sıçanların Motor Korteksinde Lazere Bağlı Beyin Hasarı. J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, sıçanlarda lazerin neden olduğu beyin hasarını takiben kan-beyin bariyeri (BBB) bütünlüğünün değerlendirilmesini göstermektedir. Kuyruk damarına bir izleme boyası enjekte edilir, bu da beyne dolaşmasına ve hasarlı BBB yoluyla dokuya sızmasına izin verir. Beyin daha sonra boyayı serbest bırakmak için çıkarılır ve işlenir. Boyanın floresan yoğunluğu, lazerin neden olduğu BBB hasarının...

Lazer Kaynaklı Beyin Hasarı Sıçan Modelinde Kan-Beyin Bariyeri Bütünlüğünün Değerlendirilmesi 

Kaynak: Fritsch, B. et al. Uyarı Kemirgenlerinde Transkraniyal Elektriksel Beyin Stimülasyonu. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, elektrotların implantasyonunu ve transkraniyal elektriksel stimülasyonun (tES) uyarı sıçanlarının motor korteksine uygulanmasını göstermektedir. Elektrot yerleştirme, stimülasyon iletimi ve bunun sonucunda ortaya çıkan nöronal ve mikroglial aktivasyon ile ilgili adımları ana hatlarıyla belirterek nöroterapötik potansiyelini vurgular.

Uyanık Bir Sıçanda Motor Korteksin Transkraniyal Elektriksel Stimülasyonu

Serebral iskemi Çeşitli hayvan modellerinde inme insanlık durumu simüle etmek için geliştirilmiştir. Bu protokol sıçanlarda iskemik inme için endotelin-1 (ET-1) bağlı orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) modeli anlatılmaktadır. Buna ek olarak, önemli hususlar, avantajlar, ve bu modelin eksiklikler ele alınmaktadır.

Rat Lazer Doppler Flowmetri Rehberlik ile İskemik İnme için Endotelin-1 Bağlı Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Modeli

Lazer yakalama mikrodiseksiyon farklı beyin bölgelerini mikroRNA ve gen analizi için farklı hücre popülasyonlarının örnekleri almak için nasıl kullanılacağını açıklar. Bu teknik travmatik beyin hasarı sıçan beyin belirli bölgelerinde farklı etkileri bir çalışma sağlar.

Stereotaksik Atlas güdümlü lazer yakalama mikrodiseksiyon travma yaralanma tarafından etkilenen beyin bölgeleri

Biz aynı anda hem electrocorticography hem de yerel alan potansiyelleri fareler serbestçe hareket nosiseptif lazer uyaranlara yanıt kaydeder bir teknik geliştirmiştir. Bu teknik araştırma nosiseptif bilgi beyinde işleme kolaylaştırır electrocortical sinyalleri mezoskopik ve makroskopik düzeyde, doğrudan bir ilişki kurmak yardımcı olur.

Kortikal yerel alan potansiyelleri ve Electrocorticograms fareler serbestçe hareket nosiseptif lazer uyaranlara yanıt olarak eşzamanlı kayıt

Burada açık kafa kontrollü kortikal darbe ile murine travmatik beyin hasarı indüksiyon için bir protokol açıklar.

Travmatik Beyin Hasarı İndüksiyonu için Kontrollü Kortikal Etki Murine Modeli

Burada açıklanan fototrombotik inme modeli, bir inmenin, ışığa duyarlı bir boyanın kullanılmasından sonra lazer aydınlatma kullanılarak kalıcı mikrovasküler tıkanıklık indüklenerek sağlam kafatasından üretildiği yerdir.

Farelerde Modelleme İnme: Fototomboz ile Fokal Kortikal Lezyonlar

Bu protokol, kapalı kafa travması (CHI) yöntemiyle indüklenen tekrarlayan hafif travmatik beyin hasarının (rmTBI) modifiye edilmiş bir fare modelini sunar. Yaklaşım, meninkslere maruz kalmanın yaygın olarak neden olduğu iltihabı azaltmak için inceltilmiş bir kafatası penceresi ve sıvı perküsyonunun yanı sıra kemirgenlerde rmTBI modellemesinde gelişmiş tekrarlanabilirlik ve doğruluk içerir.

İnceltilmiş kafatası penceresi ve sıvı perküsyonu içeren tekrarlayan hafif travmatik beyin hasarının modifiye edilmiş fare modeli

Öğrenin, farelerin motor korteksinde lazerle travmatik beyin hasarı modeli oluşturma yöntemini. Bu teknik düşük değişkenlik ve mortalite oranlarıyla güvenilir sonuçlar sunar.

Farelerin Motor Korteksinde LazerE Bağlı Beyin Hasarı

Daha fazla video keşfet