Name: 종양 내 이질성, 온코스트림 및 침략의 공간 및 분자 특성화를 위한 신경교종 소구역의 레이저 캡처 미세 분해 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-04-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: 학습하세요 레이저 캡처 미세 분해를 이용한 신경교종 조직의 공간적 분자 프로파일링 방법. 이 기술은 종양 내 이질성과 침략 메커니즘 연구에 활용됩니다.

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작업은 건강의 국가 학회에 의해 지원되었다, (NIH / NINDS) 보조금: R37-NS094804, R01-NS105556, R21-NS107894 M.G.C.; (NIH/닌드) R01-NS076991, R01-NS096756, R01-NS082311을 P.R.L.에 부여합니다. (NIH/NIBI): R01-EB022563; (NIH/NCI) U01CA224160; 미시간 대학의 로겔 암 센터, 채드터프 재단, 레아의 해피 하트 재단에서 M.G.C. 및 P.R.L. RNA 생물 의학 그랜트 F046166에 신경 외과의 학과, UL1 TR002240 미시간 임상 및 건강 연구 (MICHR), 연구 및 건강 연구 (MICHR) 프로젝트 F049768 미시간 포브스 암 연구소의 A.C. 대학, 실명을 방지하기 위해 연구에서 의사 - 과학자 상, Inc., Inc.,(RPB), NIH의 NEI에서 R01 EY022633을 부여 (AK), 및 안과 및 시각 과학의 부서에 RPB에서 무제한 보조금. 이 연구는 비전 연구 코어 (P30 EY007003) 및 암 센터 연구 코어 (P30 CA046592)를 활용했습니다. AK는 A. 알프레드 타우브만 의학 연구소에서 부인 윌리엄 데이비슨 신흥 학자 상에 의해 지원됩니다.

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이 백서의 모든 저자는 잠재적 이해 상충을 선언하지 않습니다.

신경교종 이질성 및 침략의 근본적인 분자 기전을 이해하는 것은 새로운 치료표적13을밝히는 것이 매우 중요하다. 이 원고에서는 레이저 포획 미세 해부(LMD)를 이용한 신경교종 이질성 및 침범의 분자 경관을 분석하고 전사성 분석을 통해 보다 자세하고 최적화된 방법을 설명합니다.
레이저 포획 미세해부(LMD)는 종양 내의 상이한 영역 또는 단일 세포를 식별하는데 사용될 수 있으며,종양(14)의공간 적 맥락을 유지하는 분자 패턴을 추가로 분석하기 위해 특정 샘플을 제공한다. 이러한 기술은 고형종양에서공간 전사체를 분석하는 데 사용되는 다른 방법에 비해 신뢰할 수 있고 저렴한 가격(15)이다. 우리는 LMD를 사용하여 유전자 조작 마우스 종양 모형 또는 두개내 이식형 모형에 있는 신경교종 이질성 및 침략을 분석했습니다. 이 모형은 신경교종 이질성 및 침략의 연...

신경교종은 중추 신경계의 가장 공격적인 원발성 종양입니다. 그들은 매우 침략적이고 이질적인1. 종양의 세포 및 분자 분대의 분석은 새로운 치료 표적을 드러낼 것입니다.
현재 이용 가능한 다른 방법 들 중에서, 동결 된 뇌 종양 조직의 레이저 캡처 미세 해부 (LMD)는 종양 조직에서 이산 해부학 영역 또는 특정 세포 집단을 분리하여 분자 프로필을 연구 할 수있는 비용 효과적이고 신뢰할 수있는 기술입니다2,,3. LMD는 선택된 단일 세포 또는 다세포구조의mRNA 유전자 발현 프로파일의 분석을4,5. LMD는 종양 진행 도중 일어나는 분자 사건에 관하여 심층적인 기계론적인 지식을 얻기 위하여 이용될 수 있습니다. 종양 조직의 처리개선은 조직 형태와 RNA 품질6의최적의 광학 적 분해능을 얻기 위해 필요하다. 파라포름알데히드 고정이 형태학적 분석을 위한 최선의 선택이지만, RNA 품질은 이러한 조건하에서 영향을 받고 저하되어 RNA-seq 분석을 위한 RNA 품질이 저하됩니다. 동결 된 조직 섹션의 사용은 세포막을 부수고 세포 내의 구멍을 생성 할 수있는 얼음 결정 형성을 피하고 RNA-Seq 분석7을위한최상의 옵션으로 남아 있습니다.
여기서, 우리는 LMD에 대한 동결 마우스 뇌종양 조직을 처리하기 위해 최적화된 단면 고정 및 염색 방법을 설명한다. 얼음 결정이 조직에서 형성되는 것을 방지하기 위해, 우리는 30 % 자당의 용액으로 마우스를 주입했습니다. 이 용액은 극성 물 분자 사이의 상호 작용을 방해하고 얼음 결정의 형성을 방지하여 조직 형태를 보존합니다. 조직 염색은 종양 내의 세포 또는 해부학적으로 명백한 지역의 특정 인구를 분화하고 장악하기 위하여 필요합니다. RNA 무결성을 유지하기 위해 무해한 염료로 조직을 수정하고 염색하는 것이 필수적입니다. 이전에 는 헤마톡신/에오신(H&E)으로 조직을 염색하면 RNA 무결성이 저하되는 것으로 나타났습니다8. 우리는 에탄올, 크레실 바이올렛 4%, 에오신 Y 0.5% 솔루션으로 관심 조직을 고정하고 염색했습니다. 크레실 바이올렛은 진한 청색으로 세포 핵을 더럽는 산성염 염료입니다. Eosin Y는 세포의 기본 성분을 더럽게 하는 호염약 염료로, 세포질및 다른 세포 구조 의 구별을 제공하는8. 두 염료 모두 에탄올에 용해되며 RNA 품질을 저하시키지 않습니다. 조직 손상을 방지하고 세포 구조의 높은 광학 해상도를 유지하기 위해 LMD9이전에 조직 섹션을 장착했습니다.

<table><tbody><tr><td>Accutase 세포 박리 용액</td><td>Biolegend</td><td>423201</td><td></td></tr><tr><td>동물 무첨가 재조합 인간 EGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15</td><td></td></tr><tr><td>항생제-항진균제(100X)</td><td>Gibco</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>B-27 보충제(50X), 무혈청</td><td>Gibco</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>완충액 RLT</td><td>Qiagen</td><td>79216</td><td></td></tr><tr><td>Corning PCR 튜브</td><td>Sigma Aldrich</td><td>CLS6530</td><td></td></tr><tr><td>Cresyl Violet Acetate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C5042</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12 - Dulbecco's Modified Eagle medium: Nutrient Mixture F-12</td><td>Gibco</td><td>11330057</td><td></td></tr><tr><td>Eosin Y</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E4009</td><td></td></tr><tr><td>HiSeq 4000</td><td>Illumina</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Laser Microdissection (LMD) System</td><td>Leica</td><td>LMD7000</td><td></td></tr><tr><td>N-2 보충제 (100X)</td><td>Gibco</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Normocin - 항균 시약</td><td>Invivogen</td><td>ant-nr-1</td><td></td></tr><tr><td>Peel Away 일회용 임베딩 몰드</td><td>전자 현미경 과학</td><td>70182</td><td></td></tr><tr><td>PEN 막 유리 슬라이드 (2 &micro; m)</td> <td>Lieca</td><td>1150518</td><td></td></tr><tr><td>Pinpoint 솔루션</td><td>Zymo Research</td><td>D3001-1</td><td></td></tr><tr><td>재조합 인간 FGF - 기본</td><td>Peprotech</td><td>100-18B-1MG</td><td></td></tr><tr><td>연구 저온 유지 장치 Leica</td><td></td><td>CM3050s</td><td></td></tr><tr><td>RNaseZap RNase 오염 제거 솔루션</td><td>Fisher Scientific</td><td>AM9780</td><td></td></tr><tr><td>RNeasy Plus Micro Kit</td><td>Qiagen</td><td>74034</td><td></td></tr><tr><td>SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 - Pico Input Mammalian</td><td>Takara Bio</td><td>634411</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Plus O.C.T. 컴</td><td>파운드 Fisher Scientific</td><td>23-730-571</td><td></td></tr></tbody></table>

종양 내 이질성, 온코스트림 및 침략의 공간 및 분자 특성화를 위한 신경교종 소구역의 레이저 캡처 미세 분해

Laser Capture Microdissection of Glioma Subregions for Spatial and Molecular Characterization of Intratumoral Heterogeneity, Oncostreams, and Invasion

글리오마는 그들의 침략성과 이질성을 특징으로 하는 1 차적인 뇌종양입니다. 의사 팔리세이드, 미세 혈관 증식, 중간엽 변형 및 괴사와 같은 특정 조직학적 패턴은 고급 신경교종의 조직학적 이질성을 특징으로합니다. 우리의 실험실은 온코 스트림이라는 이름의 중간 엽 세포의 높은 밀도의 존재가 종양 악성 종양과 상관 관계가 있음을 입증했습니다. 우리는 신경교종의 성장과 침략의 기초가 되는 기계장치를 이해하기 위하여 독특한 접근을 개발했습니다. 여기서, 우리는 레이저 포획 미세 내부(LMD) 및 RNA 염기서열 분석을 활용하여 종양 내 이기종 다세포 구조(즉, 중간엽 영역 또는 종양 침윤 영역)의 미분 mRNA 발현을 분석하는 포괄적인 프로토콜을 기술한다. 이 방법은 좋은 조직 조직학 및 RNA 무결성을 유지합니다. 관류, 동결, 임베딩, 단면화 및 염색은 형태를 보존하고 고품질 레이저 미세 해부 샘플을 얻기 위해 최적화되었습니다. 결과는 30% 자당을 사용하여 신경교종 베어링 마우스의 관류가 좋은 형태와 RNA 질을 제공한다는 것을 표시합니다. 또한, 4% 크레실 바이올렛과 0.5% 에오신으로 종양 섹션을 염색하면 RNA 무결성을 유지하면서 좋은 핵 및 세포 염색을 초래합니다. 기재된 방법은 민감하고 매우 재현성이 있으며 다양한 종양 모델에서 종양 형태를 연구하는 데 활용될 수 있다. 요약하면, 우리는 고형 종양 내의 이기종 다세포 구조의 분자 특징을 연구하기 위해 시퀀싱을 위한 형태학 및 RNA 품질을 보존하는 LMD를 수행하는 완전한 방법을 설명합니다.

우리의 실험실은 수면 미용 트랜스포사아제 시스템을 사용하여 유전자 조작 마우스 모델(GEMMs)을 생성하였다(그림1A). 이 시스템은 신생아 마우스에 있는 신경 전구 세포의 게놈으로 특정 유전 변경을 통합합니다. 이 변경된 전구 세포는 내인성 신경교종 종양을 형성합니다. 종양을 생성하는 데 사용되는 플라스미드 서열은 다음과 하였다: (1) pT2C-LucPGK-SB100X 슬리핑 뷰티 트랜스포슨 및 루시퍼라제 발현, (2) NRAS 발현을 위한 pT2-NRASSV12, (3) pT2-shp53-GFP4 p53 녹아웃 및 GFP 단백질 발현, 및 (4) ATRX 노크다운을 위한 pT2-shATRx-GFP4. 플라스미드는 앞서11일설명한 바와 같이 1일된 신생아 새끼의 측면 심실에 주입되었다. 플라스미드 섭취량 및 종양 형성은 생체 내 생물 발광 이...

레이저 미세 해부 (LMD)는 신경교종 이질성과 침략을 중재하는 통로를 밝히기 위하여 이용될 수 있는 민감하고 높게 재현가능한 기술입니다. 여기에서, 우리는 전사성 분석에 선행된 레이저 LMD를 사용하여 신경교종 조직에서 이산 지역을 격리하기 위하여 최적화된 프로토콜을 기술합니다.

Gliomas are primary brain tumors characterized by their invasiveness and heterogeneity. Specific histological patterns such as pseudopalisades, ...

이 프로토콜은 레이저 미세 절과 RNA 염기를 사용하여 중간 엽 세포의 축적 영역 또는 종양 침입 영역과 같은 종양 이질성의 차등 mRNA 발현을 분석합니다. 이 방법은 고품질 의 레이저 미세 절시 샘플의 수집을 용이하게하기 위해 양질의 조직 조직 조직 및 RNA 무결성을 보존하도록 최적화되었습니다. 이 방법은 민감하고 재현성이 높습니다.그것은 다양한 종양 모델에서 종양 형태학 및 이질성을 연구하기 위해 활용할 수 있다. 냉동 뇌종양 조직의 레이저 미세 절제는 종양 조직에서 세포 집단의 이산 해부학 영역을 분리하여 분자 프로파일을 연구하는 비용 효과적이고 신뢰할 수 있는 기술입니다. LMD는 종양 진행 중에 일어나는 분자 사건에 대한 심층적인 기계론적 지식을 얻기 위해 활용될 수 있으며 새로운 치료 목표를 드러낼 수 있습니다.마우스 종양 부담의 생체 내 생물 발광은 7 광자 에서 10~10~10회 사이의 신호에 도달한다. 간과 폐가 완전히 혈액을 지울 때까지 안락사 종양 베어링 마우스의 순환 시스템을 통해 산소 로동 액액을 플러시합니다. 15분 동안 티로드 용액에 용해된 30% 자당 용액으로 동물을 계속 인내합니다.관류의 성공을 평가하기 위해, 목, 꼬리 및 다리가 순환의 끝에 경직되어 있는지 확인하십시오. 그런 다음 표준 프로토콜에 따라 뇌를 수확하고 신선한 30 % 자당 용액에 밤새 뇌를 저장합니다. 냉동 보존을 준비하기 위해, 감기 isopentane-2-메틸 부탄으로 항아리를 채우고 액체 질소로 채워진 용기에 항아리를 놓습니다.용매가 차가운 동안, 필터 종이에 뇌를 건조하고 라벨 크라이오폴드에 뇌를 배치합니다. 크릴로몰드의 중심으로 중간을 절단하는 최적의 온도의 약 5 밀리리터에서 조심스럽게 원하는 방향으로 금형에 뇌를 배치합니다. 깨끗한 집게를 사용하여, 신속하게 30 ~ 40 초 동안 차가운 isopentane-2-메틸 부탄에 크라이오폴드를 배치합니다.절단 매체가 고화되면, 드라이 아이스에 크라이오폴드를 전송하고 냉동 뇌 조직을 알루미늄 호일에 감싸고 영하 80도 저장합니다. 냉동 뇌종양 조직 섹션을 취득하려면 먼저 영하 20도에서 영하 24도 사이의 저온을 설정하고 샘플 블록을 30~60분 동안 저온챔버에 배치합니다. 샘플이 평형화되는 동안 챔버와 칼 홀더를 100% 에탄올로 청소하고 RNase 클리닝 용액으로 단면 브러시를 분사하십시오.시료가 준비되면 금형을 제거하고 냉동 조직 블록을 냉동 조직 블록에 부착하여 냉동 절단 매체를 사용하여 냉동 된 시편 디스크에 부착하십시오. 블록을 디스크 홀더에 놓고 블록을 칼날과 정렬합니다. Rnase 가 없는 브러시 중 하나를 사용하여 뇌의 10 마이크로미터 섹션을 획득하여 조직 조각을 절삭 표면에 조심스럽게 평평하게 하고 말리게 합니다.슬라이드에 뇌 조직 섹션을 장착하려면 라벨이 부착된 RNase 가 없는 PEN 유리 슬라이드의 양전하 측을 부드럽게 눌러 섹션에 슬라이드를 놓습니다. 모든 슬라이드가 수집되면 저장 상자를 섭씨 영하 80도에 놓습니다. 레이저 마이크로 해부 전에 절단 매체를 용해하려면 슬라이드를 30초 순차적 내림차순 에탄올 몰입으로 담그고 0.5%eosin Y 용액으로 20초 5초 동안 염색합니다.eosin Y 인큐베이션의 끝에서 필터 용지를 사용하여 슬라이드를 건조하게 차단하고 순차적으로 오름차순 에탄올 몰입으로 슬라이드를 탈수합니다. 60초 에탄올침이 뚫린 후, 슬라이드를 자일렌 용기에 넣고 3분간 헹구십시오. 다음으로, RNase가 없는 물로 제조된 마운팅 매체에 샘플을 장착하기 전에 실온에서 RNase가 없는 표면의 슬라이드를 10초 동안 건조시하십시오.10~20초 후에 슬라이드를 현미경 현미경 마이크로 디스섹션 플랫폼으로 옮기십시오. 레이저 캡처 마이크로 절의 경우 레이저를 켜기 전에 전원을 켭니다. 다음으로, 컴퓨터의 현미경 컨트롤러를 켜고 레이저 캡처 마이크로 절제 소프트웨어를 시작합니다.현미경 제어판에서 10배 배율을 선택합니다. 레이저 제어하에 조직 해부에 대한 레이저 매개 변수를 설정하고 120 헤르츠의 레이저 주파수와 100 %의 레이저 전류를 선택하면 정확한 레이저 미세 절에 대해 속도를 10으로 설정하고 조리개를 10 마이크로 미터로 설정합니다. 그런 다음 전원을 53으로 설정합니다.단면 다음 조직을 캡처하는 조직 수집기와 두 번째 언로드 버튼을 클릭하는 조직 수집기로드합니다. 빈 컬렉터를 튜브당 30마이크로리터의 용액 버퍼를 포함하는 DNase 및 Rnase 가 없는 0.5 밀리리터 PCR 플랫헤드 튜브로 교체하십시오. 수집기를 컴퓨터에 반환하고 계속 진행하려면 클릭합니다.처리된 시편을 현미경에 로드하고 레이저 미세 절제 소프트웨어에서 언로드를 클릭합니다. 샘플을 슬라이드 홀더에 올려 놓고 슬라이드 홀더를 스테이지에 배치합니다. 계속 클릭하여 잘라낸 셰이프 창에서 그리기 컷을 선택합니다.현미경 제어를 사용하여 관심 영역을 찾고 관심 영역 주위에 윤곽을 그립니다. 그런 다음 대상 수집관을 선택하고 시작 컷을 클릭하여 조직 미세 절을 진행합니다. 관심 있는 모든 영역이 해부되면 수집가 튜브를 홀더에서 드라이 아이스로 옮겨 다운스트림 처리가 될 때까지 옮습니다.우수한 형태학 및 RNA 무결성을 가진 조직을 취득하기 위하여는, 각종 관류 접근이 평가되었습니다. 관심 영역을 해부하려면 RNA에 대한 무해한 염료로 조직을 얼룩지게해야합니다. 티로드 용액과 30%의 자당과 종양 베어링 마우스의 후속 관류는 30%의 자당에서 하룻밤 배양에 이어 마우스 조직의 형태 및 RNA 무결성의 보존을 초래한다.파라포름알데히드 조직 고정은 고품질 조직 형태학을 초래하지만 RNA 무결성은 부정적인 영향을 미칩니다. 티로드 용액 인큐베이션, 또는 티로드 용액 플러스 30% 자당 용액 인큐베이션을 사용하는 것과 같은 다른 접근법은 RNA 품질에 영향을 미치지 않지만 조직 형태에 대한 분해능이 감소되는 것으로 관찰된다. 조직이 장착 매체로 장착되지 않으면, 단면도가 탈수되고 물에 용해된 15%의 장착 배지를 가진 조직 견본의 장착하는 동안 형태학이 악화되는 것은 고품질 조직 형태를 유지합니다.레이저 포획 미세 절 현미경 이미징은 해부를 위한 종양 조직의 선택을 허용합니다. 관심 선택의 이 지역은 RNA 무결성 분석을 위한 각 조직 견본 내의 관심 있는 지역의 해부를 허용합니다. 고품질 종양 조직 형태와 RNA 무결성을 유지하는 것은 매우 중요합니다.30%의 자당에서 하룻밤 보존을 가진 타이로드 용액과 30%의 자당 관류는 LMD에 대한 조직 형태를 크게 향상시킵니다. GAN 용액으로 빠른 lyoma 고정, 염색 및 장착은 RNA 품질을 보존하고 조직 내에서 균열이 형성되는 것을 방지하는 중요한 단계입니다. RNA 품질 관리 및 전사 분석 모두에 적합한 양의 RNA를 얻기 위해 조직 영역당 6제곱마이크로미터 의 총 종양으로 최소 2.5배 10배 이상 을 배분하는 것이 좋습니다.LMD는 전임상 신경교종 모형에 있는 미래 번역 발달을 위한 새로운 잠재적인 표적을 드러낼 수 있던 신경교종 이질성 및 침략을 통제하는 분자 신호 통로의 분석을 가능하게 합니다.

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Neuroscience

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이 비디오는 미크론 수준의 정밀도로 3D 유기형 공동 배양 모델의 레이저 해부를 설명합니다. 3D 유기형 모델에서는 섬유아세포와 같은 기질 성분이 암 상피 세포와 3차원으로 공동 배양됩니다. 3D 모델은 생리학적 조건에 가까운 조건에서 침입 및 암-기질 상호 작용을 연구할 수 있는 실험 도구 역할을 합니다.

레이저 미세해부: 3D 유기형 배양 모델에서 침입하는 대장암 세포를 분리하는 기술

출처: Parker, J. J., et al. 항침습적 약물의 종양 세포 이동 및 환자 특이적 효과 연구를 위한 인간 교모세포종 기관형 절편 배양 모델. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 공초점 현미경을 통해 녹색 형광 단백질(GFP)을 발현하는 교모세포종 조직 절편의 이미징을 보여줍니다. 고해상도 이미지는 종양 세포의 움직임과 방향을 추적하기 위해 일관된 간격으로 캡처됩니다.

타임랩스 스캐닝 공초점 현미경을 사용한 교모세포종 조직에서 종양 세포 이동 이미징

합성, 조직 공학 대장 암 모델에서 레이저 microdissected 세포 및 기질의 분자 프로파일은 침습적 전방 및 암 관련 기질 세포에서 종양 세포 간의 계면에서 독특한 생물학을 특성화하고 해부 소설과 같은 처리 방식을 나타낸다.

분자 대장 암 세포의 3 차원 모델의 침윤성 종양 미세 환경의 프로파일 및<em&gt; 예 생체 내</em&gt; 섬유 아세포

glioblastoma (GBM)의 현재 ex vivo 모델은 생리 학적으로 인간 종양 침습 연구에 최적화되어 있지 않습니다. 여기, 우리는 신선한 인간 GBM 조직에서 organotypic 슬라이스 문화의 생성 및 유지를위한 프로토콜을 제시한다. 시간 경과 현미경 및 정량 세포 이동 분석 기술에 대한 설명이 제공됩니다.

종양 세포 이동 연구를위한 인간 Glioblastoma Organotypic Slice 문화 모델 및 항 침윤성 약물의 환자 특이 적 효과

이 프로토콜은 chromogenic immunohistochemistry 및 ImageJ를 사용하여 glioblastoma 환자 절제술에서 종양 microenvironment 구성 요소를 정량적으로 식별하기 위해 개발되었습니다.

환자 Glioblastoma 절제술에서 세포 미세 환경의 정량적 면역 조직 화학

신경교종 암 세포 이동에 대한 신경교암 억제제의 효과는 히스톤 탈아세틸라제(HDAC) 억제제를 이용한 3차원(3D) 침입 분석에 대한 고해상도 공초점 현미경검사법을 특징으로 한다.

고분해능 공초점 현미경검사법에 의한 3D 종양 스페로이드 침습에 대한 Migrastatic 억제제의 특성화

단백질체 조절 장애는 확산 침윤성 신경교종의 확산에 중요한 역할을 하지만 몇 가지 관련 단백질은 아직 확인되지 않았습니다. 디지털 공간 처리(DSP)는 침윤성 신경교종의 침습 및 이동에 기여할 수 있는 후보 단백질의 차등 발현을 특성화하기 위한 효율적인 고처리량 접근 방식을 제공합니다.

성인형 미만성 침윤성 신경교종의 미세환경 특성화를 위한 디지털 공간 프로파일링

우리는 척추 동물의 뇌 조직을 침범하는 교 모세포종 (GBM) 세포에서 미세 소관 역학의 실시간 이미징을 허용하는 기술을보고합니다. 형광 태그가 부착된 GBM 세포를 투명한 제브라피쉬 뇌에 동종 주입하는 것을 고해상도 생체 내 이미징과 결합하면 현장 암 침범 중에 세포 골격 역학을 측정할 수 있습니다.

제브라피쉬의 뇌를 침범하는 교모세포종 세포의 미세소관 역학의 라이브 이미징

이 프로토콜은 레이저 미세 해부를 사용하여 조직학적으로 해결된 세포 집단의 농축을 위해 염색된 얇은 조직 섹션 이미지로부터 병리학적으로 확인된 관심 영역의 인공 지능 기반 세분화를 위한 고처리량 워크플로우를 설명합니다. 이 전략에는 관심 있는 세포 집단을 나타내는 경계선을 레이저 현미경으로 직접 전송할 수 있는 새로운 알고리즘이 포함되어 있습니다.

종양 미세환경의 미세스케일 프로테오믹 분석을 위한 산업화된 인공 지능 유도 레이저 미세 해부

구강 점막하 섬유증 조직의 레이저 캡처 미세해부를 통해 형태학적 및 공간 정보가 포함된 다중 오믹스 데이터를 분석하기 위해 조직학적 관심 영역에서 세포를 정밀하게 추출할 수 있습니다.

Laser Capture Microdissection에 의한 구강 점막하 섬유증 샘플에서 형태학적 및 공간적 정보가 있는 세포 분리

우리는 새로 진단되고 재발한 종양에서 생성된 환자 유도 자기 교모세포를 이용한 3D 교모세포종 이동 모델을 제시합니다. 이 플랫폼은 환자별 이동 역학을 시각화하고 치료 효과 평가를 가능하게 합니다. 이 분석법은 이동 후 다중화되어 단백질 위치와 발현 패턴을 평가할 수 있습니다.

저산소 조건에서 자기 나노입자를 이용한 구형 위치 측정을 이용한 재현 가능한 3D 교모세포종 이동 검사

학습하세요 레이저 캡처 미세 분해를 이용한 신경교종 조직의 공간적 분자 프로파일링 방법. 이 기술은 종양 내 이질성과 침략 메커니즘 연구에 활용됩니다.

종양 내 이질성, 온코스트림 및 침략의 공간 및 분자 특성화를 위한 신경교종 소구역의 레이저 캡처 미세 분해

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