Name: תפוקה גבוהה של מגבלות תרמיות קריטיות בחרקים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 58 s
Description: חקור שיטות לבדיקת סובלנות תרמית ב-Drosophila באמצעות מבחני קור וחום בזרימה גבוהה. פרוטוקולים אלה מאפשרים הערכה מהירה של מגבלות טמפרטורה קריטיות בהשפעת שינויי האקלים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים לאלי מקייב על העזרה בהתענופת הזבובים. עבודה זו נתמכת על ידי משרד החקלאות הלאומי של ארצות הברית המכון הלאומי למזון וחקלאות הצוהר פרויקט מענק 1010996 והקרן הלאומית למדע להעניק OIA-1826689 כדי N.M.T.

<ol><li>Dowd, W. W., King, F. A., Denny, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermal+variation%2C+thermal+extremes+and+the+physiological+performance+of+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Thermal variation, thermal extremes and the physiological performance of individuals.</a> Journal of Experimental Biology. 218 (12), 1956-1967 (2015).</li>
<li>Angilletta, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAngilletta%2C+MJ+%22Thermal+Adaptation%3A+A+Theoretical+and+Empirical+Synthesis%22">Thermal Adaptation: A Theoretical and Empirical Synthesis</a>. , New York, NY. (2009).</li>
<li>Coumou, D., Rahms Torf, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+decade+of+weather+extremes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Climate+Change%22%5BJournal%5D)">A decade of weather extremes.</a> Nature Climate Change. 2 (7), 491-496 (2012).</li>
<li>Wang, G., Dillon, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+geographic+convergence+in+diurnal+and+annual+temperature+cycling+flattens+global+thermal+profiles%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Climate+Change%22%5BJournal%5D)">Recent geographic convergence in diurnal and annual temperature cycling flattens global thermal profiles.</a> Nature Climate Change. 4 (11), 988-992 (2014).</li>
<li>MacMillan, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+cause+from+consequence%3A+A+systematic+approach+to+thermal+limits%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Dissecting cause from consequence: A systematic approach to thermal limits.</a> Journal of Experimental Biology. 222 (4), 191593(2019).</li>
<li>Sinclair, B. J., Coello Alvarado, L. E., Ferguson, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+invitation+to+measure+insect+cold+tolerance%3A+Methods%2C+approaches%2C+and+workflow%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thermal+Biology%22%5BJournal%5D)">An invitation to measure insect cold tolerance: Methods, approaches, and workflow.</a> Journal of Thermal Biology. 53, 180-197 (2015).</li>
<li>Lutterschmidt, W. I., Hutchison, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+critical+thermal+maximum%3A+History+and+critique%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Zoology%22%5BJournal%5D)">The critical thermal maximum: History and critique.</a> Canadian Journal of Zoology. 75 (10), 1561-1574 (1997).</li>
<li>Cooper, B. S., Williams, B. H., Angilletta, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unifying+indices+of+heat+tolerance+in+ectotherms%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thermal+Biology%22%5BJournal%5D)">Unifying indices of heat tolerance in ectotherms.</a> Journal of Thermal Biology. 33 (6), 320-323 (2008).</li>
<li>Jørgensen, L. B., Malte, H., Overgaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+assess+Drosophila+heat+tolerance%3A+Unifying+static+and+dynamic+tolerance+assays+to+predict+heat+distribution+limits%5BTitle%5D)+AND+%22Functional+Ecology%22%5BJournal%5D)">How to assess Drosophila heat tolerance: Unifying static and dynamic tolerance assays to predict heat distribution limits.</a> Functional Ecology. 33 (4), 629-642 (2019).</li>
<li>Hazell, S. P., Pedersen, B. P., Worland, M. R., Blackburn, T. M., Bale, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+the+rapid+measurement+of+thermal+tolerance+traits+in+studies+of+small+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Entomology%22%5BJournal%5D)">A method for the rapid measurement of thermal tolerance traits in studies of small insects.</a> Physiological Entomology. 33 (4), 389-394 (2008).</li>
<li>Andersen, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+assess+Drosophila+cold+tolerance%3A+Chill+coma+temperature+and+lower+lethal+temperature+are+the+best+predictors+of+cold+distribution+limits%5BTitle%5D)+AND+%22Functional+Ecology%22%5BJournal%5D)">How to assess Drosophila cold tolerance: Chill coma temperature and lower lethal temperature are the best predictors of cold distribution limits.</a> Functional Ecology. 29 (1), 55-65 (2015).</li>
<li>Hu, X. P., Appel, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seasonal+variation+of+critical+thermal+limits+and+temperature+tolerance+in+Formosan+and+eastern+subterranean+termites+%28Isoptera%3A+Rhinotermitidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Seasonal variation of critical thermal limits and temperature tolerance in Formosan and eastern subterranean termites (Isoptera: Rhinotermitidae).</a> Environmental Entomology. 33 (2), 197-205 (2004).</li>
<li>Rolandi, C., Lighton, J. R. B., de la Vega, G. J., Schilman, P. E., Mensch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+variation+for+tolerance+to+high+temperatures+in+a+population+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Ecology+and+Evolution%22%5BJournal%5D)">Genetic variation for tolerance to high temperatures in a population of Drosophila melanogaster.</a> Ecology and Evolution. 8 (21), 10374-10383 (2018).</li>
<li>Overgaard, J., Kristensen, T. N., Sørensen, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+of+thermal+ramping+assays+used+to+assess+thermal+tolerance+in+arthropods%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Validity of thermal ramping assays used to assess thermal tolerance in arthropods.</a> PLoS ONE. 7 (3), 1-7 (2012).</li>
<li>Klok, C. J., Chown, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+thermal+limits%2C+temperature+tolerance+and+water+balance+of+a+sub-Antarctic+kelp+fly%2C+Paractora+dreuxi+%28Lepidoptera%3A+Tineidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Critical thermal limits, temperature tolerance and water balance of a sub-Antarctic kelp fly, Paractora dreuxi (Lepidoptera: Tineidae).</a> Journal of Insect Physiology. 43, 685-694 (1997).</li>
<li>Salachan, P. V., Burgaud, H., Sørensen, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testing+the+thermal+limits%3A+Non-linear+reaction+norms+drive+disparate+thermal+acclimation+responses+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Testing the thermal limits: Non-linear reaction norms drive disparate thermal acclimation responses in Drosophila melanogaster.</a> Journal of Insect Physiology. 118 (September), 103946(2019).</li>
<li>Everatt, M. J., Bale, J. S., Convey, P., Worland, M. R., Hayward, S. A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+acclimation+temperature+on+thermal+activity+thresholds+in+polar+terrestrial+invertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">The effect of acclimation temperature on thermal activity thresholds in polar terrestrial invertebrates.</a> Journal of Insect Physiology. 59 (10), 1057-1064 (2013).</li>
<li>MacMillan, H. A., Sinclair, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+gut+in+insect+chilling+injury%3A+Cold-Induced+disruption+of+osmoregulation+in+the+fall+field+cricket%2C+Gryllus+pennsylvanicus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The role of the gut in insect chilling injury: Cold-Induced disruption of osmoregulation in the fall field cricket, Gryllus pennsylvanicus.</a> Journal of Experimental Biology. 214 (5), 726-734 (2011).</li>
<li>Huey, R. B., Crill, W. D., Kingsolver, J. G., Weber, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+rapid+measurement+of+heat+or+cold+resistance+of+small+insects%5BTitle%5D)+AND+%22British+Ecological+Society%22%5BJournal%5D)">A method for rapid measurement of heat or cold resistance of small insects.</a> British Ecological Society. 6 (4), 489-494 (1992).</li>
<li>Jenkins, N. L., Hoffmann, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+maternal+variation+for+heat+resistance+in+drosophila+from+the+field%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic and maternal variation for heat resistance in drosophila from the field.</a> Genetics. 137 (3), 783-789 (1994).</li>
<li>Ransberry, V. E., MacMillan, H. A., Sinclair, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+chill-coma+onset+and+recovery+at+the+extremes+of+the+thermal+window+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+and+Biochemical+Zoology%22%5BJournal%5D)">The relationship between chill-coma onset and recovery at the extremes of the thermal window of Drosophila melanogaster.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 84 (6), 553-559 (2011).</li>
<li>Sørensen, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+induction+of+the+heat+hardening+response+in+an+Arctic+insect%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Letters%22%5BJournal%5D)">Rapid induction of the heat hardening response in an Arctic insect.</a> Biology Letters. 15 (10), (2019).</li>
<li>Shuman, D., Coffelt, J. A., Weaver, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+computer-based+electronic+fall-through+probe+insect+counter+for+monitoring+infestation+in+stored+products%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Society+of+Agricultural+Engineers%22%5BJournal%5D)">A computer-based electronic fall-through probe insect counter for monitoring infestation in stored products.</a> Transactions of the American Society of Agricultural Engineers. 39 (5), 1773-1780 (1996).</li>
<li>MacKay, T. F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+melanogaster+Genetic+Reference+Panel%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The Drosophila melanogaster Genetic Reference Panel.</a> Nature. 482 (7384), 173-178 (2012).</li>
<li>Ashburner, M., Golic, K. G., Hawley, R. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAshburner%2C+M+%22Drosophila%3A+A+laboratory+handbook%22">Drosophila: A laboratory handbook</a>. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. Cold Spring Harbor, N.Y. (2005).</li>
<li>Garcia, M. J., Teets, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cold+stress+results+in+sustained+locomotor+and+behavioral+deficits+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Zoology+Part+A%3A+Ecological+and+Integrative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Cold stress results in sustained locomotor and behavioral deficits in Drosophila melanogaster.</a> Journal of Experimental Zoology Part A: Ecological and Integrative Physiology. 331 (3), 192-200 (2019).</li>
<li>Teets, N. M., Hahn, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+variation+in+the+shape+of+cold-survival+curves+in+a+single+fly+population+suggests+potential+for+selection+from+climate+variability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">Genetic variation in the shape of cold-survival curves in a single fly population suggests potential for selection from climate variability.</a> Journal of Evolutionary Biology. 31 (4), 543-555 (2018).</li>
<li>Kelty, J. D., Lee, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+rapid+cold+hardening+by+cooling+at+ecologically+relevant+rates+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Induction of rapid cold hardening by cooling at ecologically relevant rates in Drosophila melanogaster.</a> Journal of Insect Physiology. 45 (8), 719-726 (1999).</li>
<li>MacMillan, H. A., Sinclair, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+insect+chill-coma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying insect chill-coma.</a> Journal of Insect Physiology. 57 (1), 12-20 (2011).</li>
<li>Salachan, P. V., Sørensen, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+thermal+limits+affected+differently+by+developmental+and+adult+thermal+fluctuations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Critical thermal limits affected differently by developmental and adult thermal fluctuations.</a> Journal of Experimental Biology. 220 (23), 4471-4478 (2017).</li>
<li>Hoffmann, A. A., Hallas, R., Anderson, A. R., Telonis-Scott, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+a+robust+sex-specific+trade-off+between+cold+resistance+and+starvation+resistance+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">Evidence for a robust sex-specific trade-off between cold resistance and starvation resistance in Drosophila melanogaster.</a> Journal of Evolutionary Biology. 18 (4), 804-810 (2005).</li>
<li>Kelty, J. D., Lee, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+cold-hardening+of+Drosophila+melanogaster+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29+during+ecologically+based+thermoperiodic+cycles%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Rapid cold-hardening of Drosophila melanogaster (Diptera: Drosophilidae) during ecologically based thermoperiodic cycles.</a> Journal of Experimental Biology. 204 (9), 1659-1666 (2001).</li>
<li>Sinclair, B. J., Vernon, P., Klok, C. J., Chown, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insects+at+low+temperatures%3A+An+ecological+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Ecology+and+Evolution%22%5BJournal%5D)">Insects at low temperatures: An ecological perspective.</a> Trends in Ecology and Evolution. 18 (5), 257-262 (2003).</li>
</ol>

לסופרים אין מה לחשוף.

שתי השיטות המפורטות לעיל יוצרות נתונים בעלי תפוקה גבוהה של מדדים רלוונטיים למען איכות המידע עבור מגבלות תרמיות גבוהות ונמונות. פרוטוקולים אלה מתבססים על מתודולוגיות שנקבעו בעבר המשותפות למחקר על מגבלות תרמיות של חרקים (המסוכמות בסינקלייר ואח'). 6. שני הפרוטוקולים ניתן להשלים בתוך פרק זמן קצר (~ 2 שעות כל אחד), לייצר ערכות נתונים עם גדלים לדוגמה גדולה, לא להקריב חזרה או דיוק, ולמזער את שגיאת הנסיינים על ידי ביטול הקלטה ידנית של נתונים וכניסה (CTמינימום assay), או על ידי יצירת הקלטות ...

גבולות תרמיים של חרקים שינויים בתנאים סביבתיים, כולל טמפרטורה, הוא גורם מרכזי המשפיע על הביצועים, כושר, הישרדות, והפצה גיאוגרפית שלאורגניזמים 1,,2. מגבלות תרמיות עליונות ונמיכות קובעות את הטווח התיאורטי של סביבות אורגניזם יכול לסבול, ולכן, מגבלות אלה הן מנבאים חשובים של התפלגות צמחים ובעלי חיים, במיוחד לנוכחשינוי האקלים 3,4. לפיכך, פרוטוקולים למדי מידה מדויקת של מגבלות תרמיות הם כלים חשובים עבור אקולוגים, פיזיולוגים, ביולוגים אבולוציוניים וביולוגים לשימור, בין היתר.
כחיות הארציות השופעות והמגוונות ביותר, חרקים משמשים לעתים קרובות למדידות של גבולות תרמיים. מקסימום תרמי קריטי (CTמקסימום)ומינימה תרמית קריטית (CTmin)משמשים בדרך כלל להערכת וריאציה פנים-ו- interspecificבסובלנות תרמית 5,6,7. בעוד CTמקסימום ו CTדקות ניתן למדוד עבור פנוטיפים מרובים, כולל צמיחה, תפוקת הרבייה, והתנהגות, הם מוחלים בדרך כלל על פונקציית locomotor5,6,7. לפיכך, CTמקסימום (המכונה גם טמפרטורת נוקאאוט חום) ו CTדקות מוגדרים לעתים קרובות כטמפרטורות גבוהות ונמוכות שבו חרקים מאבדים את התפקוד המוטורי ואינם מסוגלים להישארזקוף 5,6,7,8,9,10,11. CTדקות עולה בקנה אחד עם תחילתה של תרדמת צינה, שיתוק הפיך הביא על ידי טמפרטורות קרות6. בעוד שיתוק בגבולות התרמיים הוא לעתים קרובות הפיך, חשיפה מתמשכת לטמפרטורות אלה מובילה למוות אקולוגי5.
שיטות נפוצות למדידת מגבלות תרמיות מגוון של ציוד שימשו כדי למדוד מגבלות תרמיות (מסוכם סינקלייר ואח '. 6. בקצרה, חרקים מחוממים או מקורריםבאינקובטורים 12,13,מכולות שקועות באמבטיותנוזלים 11,14,15,16,בלוקיאלומיניום 10,,17,או מכולותז'קט 18, ומעקב עד שהקטר מפסיק. כדי לפקח על חרקים במהלך ההתאסה, השיטה הנפוצה ביותר היא התבוננות ישירה, שבה אנשים מנוטרים ברציפות בזמן אמת או בדיעבד עםוידאו מוקלט 6,9,10,11,15,17. בעוד שיטות תצפית ישירה יש דרישות ציוד מינימליות, הם עבודה אינטנסיבית ולהגביל את התפוקה. לחלופין, ניתן לצפות בחרקים בעקיפין על ידי איסוף אנשים בזמנים דיסקרטייםכאשר הם נופלים מספנות 6,19,20,21 או באמצעות צגי פעילות13.
שיטות עקיפות למדידת מגבלות תרמיות הן בדרך כלל תפוקה גבוהה יותר ועלולות להיות פחות מועדות לטעויות מאשר שיטות תצפית ישירה. השיטה הנפוצה ביותר לניטור עקיף משתמשת בעמודה מבוקרת טמפרטורהעם ז'קטים 6,,8,,19,,20,,21. חרקים ממוקמים בתוך עמוד עם צבים, והטמפרטורה של התא הפנימי נשלטת על ידי שאיבת נוזלים מאמבט נוזלי מבוקר טמפרטורה דרך הבטנה הז'קט של הטור. אנשים שמגיעים לגבול התרמי שלהם נופלים מהמקום שלהם ונאספים בטמפרטורות דיסקרטיות או במרווחי זמן. בעוד שיטה זו פועלת היטב עבור CTדקות, זה נמצא לא מתאים CTמקסימום, כי זבובים מרצון לצאת מתחתית העמודה כאשר הטמפרטורה עולה. השיטה החדשה המתוארת כאן עוקפת בעיה זו על ידי כך שהיא מכילה זבובים באופן אישי במהלך מדידות אוטומטיות.
בנוסף לשיטת התצפית, שני סוגים של משטרי טמפרטורה משמשים בדרך כלל כדי להעריך את הגבולות התרמיים העליונים. ההתייענות הדינמית מורכבת מהגברת הטמפרטורה בהדרגה עד שהתפקוד המוטורי אובד; טמפרטורה זו היא CT דינמימקסימום7,8,9,13. לעומת זאת, ההתייחדות הסטטית מורכבת מטמפרטורה מלחיצה מתמדת עד לאיבוד התפקוד המוטורי; נקודת זמן זו היא זמן הנוקאאוט של החום (חום KDT), המכונה גםמקסימום CT סטטי (sCTmax)בניירשפורסם לאחרונהעל ידי יורגנסן ואח'7,8,9,,16,22. למרות CTמקסימום וחום נוקאאוט (חום KD assays) לייצר מדדים עם יחידות שונות, מידול מתמטי של שתי התכונות מציין שהם נותנים מידע דומה על עמידות חום ושניהםרלוונטיים מבחינה אקולוגית 8,9. בדיקות דינמיות מניבות טמפרטורה שניתן להשוות לתנאים סביבתיים, והן עדיפות כאשר יש הבדלים גדולים בסובלנות לחום, כגון השוואות בין מינים עם גומחות תרמיות שונות באופן נרחב. עם זאת, בשל Q10 גבוה להצטברות פציעות חום, שקע סטטי עשוי להיות עדיף לזיהוי גדלי אפקט קטן, כגון וריאציה תוך ספציפית בסובלנותחום 9. כמו כן, מבחינה מעשית, אסיי סטטי דורש ציוד פחות מתוחכם מאשר אסיי דינמי.
המטרה מטרת נייר זה היא להפוך שיטות לפורמלית עבור CTדקות וחום KD assays שניתן להשתמש במחקר עתידי כדי להעריך את הגבולות התרמיים של חרקים מוטיב. הפרוטוקולים מותאמים ממתודולוגיות שנקבעו בעבר ומתועדים להיות בעלי תפוקה גבוהה, אוטומטית וחסכונית. ניתן להשלים את שני ההתאסות תוך זמן קצר (~ 2 שעות), מה שאומר שניתן לערוך ניסויים מרובים ביום אחד, ולייצר כמויות גדולות של נתונים מבלי להקריב יכולת חזרה או דיוק. עם התקנה זו, ניתן למדוד בו-זמנית את עמידות החום של 96 זבובים, בעוד שהטור עבור CTmin יכול להכיל יותר מ-100 זבובים, בתנאי שיש שטח פנים מתאים לתפס.
שיטת התפוקה הגבוהה להתבוננות ב- CTmin משנה את מתודולוגיית העמודות הנפוצה עם תוספת של חיישן אינפרא אדום לספירת זבובים באופן אוטומטי. השימוש בחיישן אינפרא אדום לספירה הוצע לראשונה על ידי שומן ואח' בשנת 199623, אך לא אומץ באופן נרחב. התוספת של חיישן האינפרא-אדום מאפשרת יצירת נתונים רציפים במקום לאסוף נתונים במרווחי זמן שונים. פרוטוקול זה גם ממזער את שגיאת הניסוי על-ידי ביטול הזנת נתונים ידנית והצורך להחליף צינורות איסוף באופן ידני מתחת לעמודה הנספסת בנקודות זמן שונות.
שיטת התפוקה הגבוהה לתיעוד חום KDT משתנה משני מחקרים קודמים של עמידותלחום בחרקים 10,12. זבובים בודדים מאוחסנים בצלחת 96 באר באינקובטור מבוקר טמפרטורה ווידאו מוקלט. פרוטוקול זה ממזער הטיית ניסויים בקביעת KDT חום מכיוון שניתן לסקור ולאמת ניסויים על-ידי השמעת ההקלטה. פרוטוקול זה מספק גם קבוצה של קבצי Script מותאמים אישית של פיתון שניתן להשתמש בהם כדי להאיץ את ניתוח הווידאו. השימוש בארות בודדות מבטל הפרעות שעלולות להתרחש כאשר אנשים אחרים לנוע או ליפול, אשר יכול להיות בעיה כאשר קבוצות שלאנשים נצפו באותה זירה 10,17. יתר על כן, האינקובטור מבוקר טמפרטורה מספק טמפרטורה יציבה על פני כל 96 הבאות, בניגוד לטמפרטורה הדרגתית שנצפתה לעתים על פני בלוק אלומיניום מבוקרטמפרטורה 10. כמו כן, שים לב כי שיטת הקלטה 96 גם ניתן להתאים למדוד CTדינמי מקסימום ופוטנציאל CTדקות (ראה דיון).
כדי להדגים כל פרוטוקול, הגבולות התרמיים של נקבות מלנוגסטר דרוזופילה בוגרות מן השורות הנבחרות של לוח הייחוס הגנטי Melanogaster Drosophila (DGRP)הושוו 24. קווים אלה נבחרו מכיוון שניסויים ראשוניים הצביעו על הבדלים משמעותיים בסובלנות תרמית. אלה הוכחו כשיטות חזקות להפלות הבדלים בסובלנות תרמית. שני הפרוטוקולים הבאים, תפוקה גבוהה CTמינימום assay (סעיף 1) ו חום תפוקה גבוהה KD assay (סעיף 2), לתאר את הפעולות הדרושות כדי לייצר CTדקות וחום נתוני KDT עבור כל שלב חיי חרקים מוטיב מסוגל להתאים את האביזרים, כגון דרוסופילה למבוגרים. עבור CTדקות זה גם חיוני כי החרק להיות מסוגל לעמוד. כאן, כל תסה מדגים במלנוגסטר דרוזופילה למבוגרים. עם זאת, ייתכן שיהיה צורך בשינויים עבור מסה אחרים או שלביםחיים 6. שינויים קלים עשויים לכלול שימוש בחומר חריץ עם פתחים גדולים יותר כדי להכיל דגימות גדולות יותר ב- CTמינימום assay או שימוש במצלמה באיכות גבוהה יותר כדי להבחין KDT עדין של חרק נע לאט או שלב החיים בהאשה KD חום. פרוטוקול זה אינו מתאר שיטות להכנת זבובים, אך חשוב לתקנן פרוטוקולי גידול כדי להבטיחיכולת חזרה 25 (ראה גרסיה ו-Teets26 ו-Teets ו-Hahn27). הפרוטוקולים שסופקו כוללים מידע על אופן הבנייה וההגדרה של ההתאגנות, כיצד להקליט מדידות ותיאור קצר של ניתוח נתונים.

<table><tbody><tr><td>ARCTIC A40 סירקולטור נוזל מקורר (רמפות טפרטורות הניתנות לתכנות)</td><td>תרמו מדעי; וולת'אם, MA</td><td>153-5401</td><td></td></tr><tr><td>C922 Pro Stream מצלמת אינטרנט</td><td>Logitech; ניוארק, קליפורניה</td><td>960-001087</td><td></td></tr><tr><td>מהדק פלדה מתכוונן עגול &ndash; 5.08 ס"מ עד 7.62 ס"מ</td><td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צינורות אקריליק שקופים &ndash; 5.7 ס"מ x 5.1 ס"מ x 0.3 ס"מ</td><td>United States Plastic Corp., OH</td><td>44036</td><td></td></tr><tr><td>צינורות אקריליק שקופים &ndash; 6.35 ס"מ x 5.7 ס"מ x 0.3 ס"מ</td><td>United States Plastic Corp., OH</td><td>440515</td><td></td></tr><tr><td>צינורות אקריליק שקופים &ndash; 7 ס"מ x 6.35 ס"מ x 0.3 ס"מ</td><td>United States Plastic Corp., OH</td><td>44041</td><td></td></tr><tr><td>איטום סיליקון שקוף</td><td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צינור איסוף (15 מ"ל)</td> <td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מקדחה אלחוטית</td><td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צג משפך דרוזופילה (DFM)</td> <td>TriKinetics; Waltham, MA</td><td>DFM</td><td>משמש לספירת מספר הזבובים שנופלים דרך המשפך בנקודת זמן נתונה</td></tr><tr><td>תוכנת איסוף נתונים DAM</td><td>TriKinetics; וולת'ם, מסצ'וסטס</td><td></td><td>רשומות קלט נתונים ממכסה אחסון הזבובים של DFM</td></tr><tr><td></td><td>FlySorter; סיטל, וושינגטון</td><td>FS-96LID-5PK</td><td>משמש להעמסת זבובים לתוך לוחית האחסון עבור בדיקת sCTmax</td></tr><tr><td>FlySorter של לוחית אחסון זבובים</td><td>; סיטל, וושינגטון</td><td>FS-96PLATE-5PK</td><td>משמש להחזקת זבובים במהלך בדיקת sCTmax</td></tr><tr><td>מגש מזון זבוב</td><td>FlySorter; סיטל, WA</td><td>FS-TRAY-5PK</td><td>משמש לשמירת זבובים על מזון לאחר העמסה לצלחת 96 בארות עד לבדיקת sCTmax</td></tr><tr><td>משפך זכוכית</td><td>Kimax</td><td>28950-75 75</td><td>מ"מ</td></tr><tr><td>מגן מרזב</td><td>כל</td><td>פתחים</td> <td>בקוטר 0.5 ס"מ</td></tr> כל <tr><td>מסור</td><td></td><td></td><td></td>כל</tr><tr><td>חממה Heratherm Thermo Scientific</td><td>Thermo Scientific; Waltham, MA</td><td>OMS100</td><td></td></tr><tr><td>מתאמי ניילון צינור (2) &ndash; &frac14; MNPT x 3/8</td><td>United States Plastic Corp., OH</td><td>61135</td><td></td></tr><tr><td>אקדח דבק חם ודבק</td><td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מקור אור</td><td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מגנטים</td><td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מקליט OMEGA TC-08 ותוכנת נגן TC-08</td><td>OMEGA; נורווק, צמד תרמי CT</td><td></td><td></td></tr><tr><td>OMEGA (סוג T)</td><td>OMEGA; נורווק, CT</td><td>5LRTC-TT-K-20-36</td><td></td></tr><tr><td>משפך פלסטיק</td><td>כל</td><td>צינורות</td> פלסטיק <td>בקוטר 2 אינץ'</td></tr><tr><td>- קוטר 0.6 ס"מ</td><td>United States Plastic Corp., OH</td><td>62852</td><td></td></tr><tr><td>טבעת רטרט</td><td>כל</td><td>מעמד</td> רטרט <td>בקוטר 2 אינץ'</td></tr><tr><td>כל כל</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מהדק רטרט בעל שלושה שיניים</td><td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחבר</td> יציאה טורית Rstudio <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>(PSIU9)</td><td>TriKinetics; Waltham, MA</td><td>PSIU9</td><td>חיבור ביניים בין ה-DFM למחשב, מאפשר חיבורי DFM מרובים</td></tr><tr><td>קלקר (עובי 2 אינץ')</td> <td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>קלטת</td><td>כל</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ספק כוח ללא הפרעה (PS9-1)</td> <td>TriKinetics; Waltham, MA</td><td>PS9-1</td><td>ספק כוח עבור DFM ו-PSIU9</td></tr><tr><td>Weld-on #4 אקריליק צמנט</td><td>ארצות הברית פלסטיק Corp., OH</td><td>45737</td><td></td></tr></tbody></table>

תפוקה גבוהה של מגבלות תרמיות קריטיות בחרקים

High-Throughput Assays of Critical Thermal Limits in Insects

גבולות תרמיים עלונים ונמונים של צמחים ובעלי חיים הם מנבאים חשובים של הביצועים שלהם, הישרדותם והתפלגויות גיאוגרפיות, והם חיוניים לחיזוי תגובות לשינויי האקלים. עבודה זו מתארת שני פרוטוקולים בתפוקה גבוהה למדידת מגבלות תרמיות של חרקים: האחד להערכת מינימה תרמית קריטית (CTmin), והשני להערכת זמן ההשבתה של חום (KDT) בתגובה לגורם לחץ חום סטטי. ב- CTמינימום assay, אנשים ממוקמים בעמודה אקריליק ז'קט, נתון לרמפת טמפרטורה יורדת, ונספר כפי שהם נופלים מהסחזים שלהם באמצעות חיישן אינפרא אדום. בחום KDT assay, אנשים כלולים צלחת 96 גם, ממוקם באינקובטור להגדיר למלחיץ, טמפרטורה חמה, וידאו הוקלט כדי לקבוע את הזמן שבו הם כבר לא יכולים להישאר זקוף ולזוז. פרוטוקולים אלה מציעים יתרונות על פני טכניקות נפוצות. שני המקרים הם בעלות נמוכה ותוקף להשלים במהירות יחסית (~ 2 שעות). ה-CTמינימום assay מפחית שגיאת experimenter והוא יכול למדוד מספר גדול של אנשים בו זמנית. פרוטוקול KDT חום יוצר תיעוד וידאו של כל תס"א ובכך מסיר הטיה experimenter ואת הצורך לפקח ברציפות על אנשים בזמן אמת.

המגבלות התרמיות (כלומר, CTmin וחום KDT) של נקבות מפאנל ההתייחסות הגנטית של דרוזופילה מלנוגסטר (DGRP) נמדדו כדי להדגים את נתוני התפוקה הגבוהה שנוצרו משני הפרוטוקולים המתוארים. CTmin היה assayed באמצעות קווי DGRP 714 (n = 37) ו 913 (n = 45). חום KDT היה eded בהשוואה קווי DGRP 189 (n = 42) ו 461 (n = 42), וקבצי וידאו נותחו באופן ידני. הזמן הכולל של הניסויים, כולל צפייה בסרטון, לקח &lt;2 שעות עבור כל פרוטוקול.
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-...

מגבלות תרמיות יכולות לחזות את סביבות אורגניזמים לסבול, שהוא מידע בעל ערך לנוכח שינוי האקלים המהיר. מתואר כאן פרוטוקולים בתפוקה גבוהה כדי להעריך מינימה תרמית קריטית וזמן נוקאאוט חום בחרקים. שני הפרוטוקולים ממקסמים את התפוקה וממזערים את עלות ההתייענות.

Upper and lower thermal limits of plants and animals are important predictors of their performance, survival, and geographic distributions, and are ...

סובלנות תרמית היא מרכיב קריטי בהפצות מינים ותגובות לשינויי האקלים. כאן אנו מספקים שיטות להערכת חום וסובלנות קרה במהירות בחרקים קטנים. שיטות אלה למדידת עמידות לקור, באמצעות המינימום התרמי הקריטי וסובלנות לחום, באמצעות חום המופל זמן הם תפוקה גבוהה, חצי אוטומטיים ודורשים ציוד מינימלי.הדגמת ההליך יהיה דוד Awde, פוסטדוק מהמעבדה שלי. כדי להקים תצהירה מינימלית תרמית קריטית, כוח על אמבטיית נוזלים מבוקרת טמפרטורה ולחץ על כפתור ההפעלה כדי להפעיל תוכנית, העלאת ושמירה על הטמפרטורה של האמבטיה ל 25 מעלות צלזיוס. המתן חמש עד עשר דקות כדי לאפשר לעמוד האמבטיה הנוזלי להגיע ל-25 מעלות צלזיוס, לפני החלפת התקע בחלק העליון של העמוד במסנן בקוטר 5.08 ס"מ.הקש על כ 40 זבובים מבקבוקון המזון שלהם לתוך העמוד דרך המשפך במהירות להחליף את המשפך עם התקע, דואג לא לתת לכל זבובים לברוח. אז תן לזבובים להתיישב. מדי פעם הקשה על התקע התחתון כדי לעודד את הזבובים לטפס.לאחר חמש דקות, לחץ על כפתור ההתחלה על הרווח אמבטיה נוזל, כדי להתחיל את תוכנית הרמפה מיני תרמית קריטית. לחץ כדי לפתוח את תוכנת ההקלטה הזוגית התרמית במחשב ולחץ על הקלט כדי להתחיל להקליט את הטמפרטורה בתוך העמודה, כל שנייה למשך ההתלהמה. ודא שכל הקלטת טמפרטורה כוללת את חותמת הזמן הספציפית לשניה, כך שניתן יהיה למזג נתוני טמפרטורה מאוחר יותר עם נתונים מהצג משפך דרוסופילה.הוסיפו חמישה מיליליטר של 90% אתנול לצינור צנטריפוגה חרוטי של 15 מיליליטר והניחו את הצינור במתלה מתחת לעמוד. מדי פעם הקש על התקע התחתון של העמוד כדי לפתות את כל הזבובים בתחתית לטפס. רוב הזבובים יהיו על עמוד או ליד החלק העליון של הטור על ידי 15 מעלות צלזיוס.ב 15 מעלות צלזיוס, מניחים משפך זכוכית בקוטר חיצוני 75 מילימטר לתוך צג משפך Drosophila. הסר את התקע התחתון ולאסוף את כל הזבובים עדיין על התקע באתנול. כוונן את טבעת ההתרעה, צג המשפך והמשפך, כך שהם יהיה מתחת לעמודה.ודא כי השפה של המשפך לאטום לחלוטין את החלק התחתון של העמודה ולהכניס את החלק התחתון של המשפך לתוך צינור אוסף 15 מיליליטר. פתח את תוכנת צג משפך דרוסופילה. התוכנה תתחיל מיד להקליט את השעה והתאריך שבהם הזבובים מגיעים למינימה התרמית הקריטית שלהם.זבובים מגיעים למינימה התרמית הקריטית שלהם, יאבדו את התפקוד הנוירומוסקולרי שלהם ויפלו מהמושכים שלהם, דרך צג משפך דרוסופילה. כדי לעקוב אם כל הזבובים הגיעו למינימה התרמית הקריטית שלהם, ככל שהטמפרטורה יורדת, בדוק את התקע העליון ואת התקע כדי לראות אם זבובים כלשהם עדיין יושבים. כאשר כל הזבובים, הגיעו למינימה התרמית הקריטית שלהם, הזז את צג משפך דרוסופילה והתרחק מפתיחת העמוד.במקרים נדירים, זבובים עשויים להגיע למינימה התרמית הקריטית שלהם, אך נשארים תקועים בעמודה. פתח את התקע העליון כדי להסיר זבובים אלה. כדי להקים חום תפוקה גבוהה הפיל את ההקפאה, להשתמש שאפתן ומכסה מחיצה, כדי לטעון זבובים בודדים פחמן דו חמצני הרגעה, לתוך כל באר שונה 96 אין צלחת תחתונה ולאטום את הצלחת עם מכסה ברור הדוק הולם.לאחר מכן מניחים את הצלחת על אספקת מזון ולאפשר את הזבובים להתאקלם 96 צלחת גם לפחות 48 שעות. ביום ההקפאה, להגדיר את החממה ל 37.5 מעלות צלזיוס, לאחר 30 דקות מניחים את צלחת תרבות זבוב לתוך החממה עם החלק התחתון של הצלחת על הנייר הלבן על החלק התחתון של המגש. שים לב לכיוון של שמות הטורים וה השורות היטב על המגש ובמסגרת מצלמת האינטרנט והצב סרט צבעוני לאורך הצדדים והקצוות של הלוח כדי לסייע באימות הכיוון.כאשר הצלחת נמצאת בעמדה, סגור את דלת החממה ולחץ על הקלט בתוכנת הקלטת הווידאו. לאחר שעתיים, בדוק את ההקלטה כדי לראות אם כל הזבובים, הגיעו למקום מנוחתם האחרון והפסיקו לזוז. כאשר כל הזבובים הפסיקו לזוז, לחץ על עצור והשליך את הזבובים.פתח את קובץ הווידאו והקלטת את זמן ההפלה של כל טיסה בכל באר. המדד העקבי ביותר של החום שהפיל את זמן ההשבתה בין הניסויים לתצפיות הוא הזמן שבו זבוב מגיע למקום מנוחתו הסופי. לאחר מכן לעקוב אחר הווידאו במהופך, התמקדות באר אחת ונוהגים את הזמן שבו לטוס הראשון נע את נקודת המנוחה הסופית שלה.קביעת זמן המנוחה הסופי של כל זבוב יכולה להיות קשה. כדי להבטיח ניתוח מדויק, חשוב לקחת את הזמן שלך ולהתבונן כל טוב בנפרד. בניתוח מייצג זה, נקבות מ קו פאנל התייחסות גנטי Drosophila, היה נמוך באופן משמעותי ממוצע טמפרטורות מינימה תרמית מאשר נקבות מ קו DGRP 714.בנוסף, החום הפיל את הזמן ב 37.5 מעלות צלזיוס, שונה באופן משמעותי בין הנקבות מ 73 ו 461 קווי DGRP. עם שינויים קלים, שיטה זו למדידת החום הפיל את הזמן, יכול לשמש כדי למדוד תכונות אחרות סובלנות תרמית, כגון זמן התאוששות תרדמת צונן או מקסימום תרמי קריטי. על ידי צמצום משמעותי של זמן הידיים לחוקרים, שיטות אלה אפשרו חקר של וריאציה גנטית תכונות סובלנות תרמית בקנה מידה שלא היה אפשרי בעבר.

high-throughput-assays-of-critical-thermal-limits-in-insects

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

במאמר זה, אנחנו מדגימים מבחני ללמוד nociception...

שיטות מקומיים וכלל עולמיים של הערכת Nociception תרמי ב<em&gt; תסיסנית</em&gt; רימה

לזחלי דרוזופילה יש נוירונים חושיים ייעודיים – nociceptors – שתגובתם לגירויים תרמיים שעלולים להיות מזיקים מעוררת התנהגויות מרתיעות – או מה שמכונה "nocifensive" – אצל החיה. סרטון זה מתאר שיטה להערכת נוסיספטציה תרמית על ידי רישום התנהגות הזחל בתגובה ליישום מקומי של בדיקת חום על הקוטיקולה. שיטה זו נקראת, אם כן, בדיקת חום מקומית.

בדיקת חום מקומית: שיטה להערכת נוסיספטציה של טמפרטורות גבוהות בזחלי דרוזופילה

מקור: עלי, א., ואחרים. סקר בתפוקה גבוהה של מבודדים מיקרוביאליים עם השפעה על בריאות Caenorhabditis elegans . J. Vis. Exp. (2022)הסרטון הזה מדגים בדיקה פלואורסצנטית בעלת תפוקה גבוהה להערכת האופן שבו חיידקי המעיים משפיעים על עמידות ללחץ ב-Caenorhabditis elegans. על ידי מעקב אחר פלואורסצנציה כחולה מגרגרי מעי שנקרעו, הבדיקה חושפת אותות מוות מוקדמים יותר בתולעים שנחשפו לחיידקי בדיקה.

בדיקה פלואורסצנטית בתפוקה גבוהה לחקר אינטראקציות בין מיקרואורגניזמים לתולעים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לקביעת הטמפרטורה הסביבתית המועדפת של הזחלים דרוזופילה באמצעות הדרגה תרמי רציפה.

וזמינותו שינוי טמפרטורה כדי לקבוע העדפות תרמי של הזחלים דרוזופילה

כאן, אנו מאפיינים את התגובות הסלולר מדגיש התגובה התאית ב-נמטודות C. אלגיה על ידי מדידת ההפעלה של כתבים פלורסנט ההמרה ולומר רגישות ללחץ פיזיולוגי.

מדידות התגובות הפיזיולוגיות של הלחץ בג. אלגיה

כאן מתואר פרוטוקול זול ונגיש להערכת התאוששות הלם קר של פרפרים בתנאי סביבה.

בדיקה פיזיולוגית תרמית מבוססת שדה: התאוששות הלם קר בתנאי סביבה

חיידקי מעיים עשויים להשפיע באופן חיובי או שלילי על בריאות המארח שלהם באמצעות מנגנונים ספציפיים או שמורים. Caenorhabditis elegans היא פלטפורמה נוחה לסינון עבור חיידקים כאלה. הפרוטוקול הנוכחי מתאר סינון בתפוקה גבוהה של 48 חיידקים מבודדים להשפעה על עמידות לעקה של נמטודה, המשמשים כפרוקסי לבריאות התולעים.

הקרנה בתפוקה גבוהה של מבודדים מיקרוביאליים עם השפעה על בריאות Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans משמשים כמערכת מודל מצוינת עם שיטות חזקות ובעלות נמוכה לסקר את תוחלת החיים, תוחלת החיים והחוסן ללחץ.

סקר שיטות בעלות נמוכה למדידת תוחלת החיים ותוחלת הבריאות ב - Caenorhabditis elegans

לחרקים יש טווח טמפרטורות סביבתי אופטימלי שהם מבקשים להישאר בתוכו, וגורמים חיצוניים ופנימיים רבים יכולים לשנות העדפה זו. כאן אנו מתארים שיטה חסכונית ופשוטה לחקר בחירת הטמפרטורה, המאפשרת לחרקים להפגין בחופשיות את התנהגותם הטבעית.

קביעת העדפת טמפרטורה של יתושים ואקטותרמיות אחרות

הפרוטוקול הנוכחי ממחיש את השימוש ברכיבים זמינים מסחרית ליצירת שיפוע תרמי יציב וליניארי. לאחר מכן ניתן להשתמש בשיפוע כזה כדי לקבוע את הגבול התרמי העליון של אורגניזמים פלנקטוניים, במיוחד זחלים חסרי חוליות.

קביעת גבולות תרמיים עבור זואופלנקטון באמצעות בלוק חום

דו"ח זה מתאר שיטה למדידת זמן Drosophila melanogaster בוגר להפלה באמצעות מוניטור פעילות דרוזופילה (DAM2) בתגובה ללחץ חום בהולכת אוויר בתוך תא אינקובטור. DAM2 מודד פעילות על ידי רישום תנועות זבוב בודדות כאשר הן חוצות קרן אינפרא אדום. ניתוח הנתונים מקל על ידי קובץ הפעלה חדשני שנוצר על ידי המחברים.

בדיקות עמידות לחום באמצעות מערכת ניטור פעילות דרוזופילה : מדריך ליישום הפעלה לניתוח נתונים

חקור שיטות לבדיקת סובלנות תרמית ב-Drosophila באמצעות מבחני קור וחום בזרימה גבוהה. פרוטוקולים אלה מאפשרים הערכה מהירה של מגבלות טמפרטורה קריטיות בהשפעת שינויי האקלים.

תפוקה גבוהה של מגבלות תרמיות קריטיות בחרקים

גלה סרטונים נוספים