Denne protokol præsenterer en ny, robust, og reproducerbare kultur system til at generere og vokse tre-dimensionelle sfæroider fra Caco2 kolon adenocarcinoma celler. Resultaterne giver den første proof-of-concept for hensigtsmæssigheden af denne tilgang til undersøgelse af kræft stamcellebiologi, herunder reaktionen på kemoterapi.