Journal
/
Biology
/
In vitro Analyse van E3 Ubiquitine Ligase Functie
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
In Vitro Analysis of E3 Ubiquitin Ligase Function
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

In vitro Analyse van E3 Ubiquitine Ligase Functie

DOI:
10.3791/62393-v

•

06:06 min

•

May 14, 2021

•

, , ,
1Institute for Genetics and Cologne Excellence Cluster on Cellular Stress Responses in Aging Associated Diseases (CECAD),University of Cologne, 2Center for Molecular Medicine Cologne,University of Cologne

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43In Vitro Auto-Ubiquitylation Assay
  • 01:31In vitro Substrate Ubiquitylation Assay
  • 02:13Lysine Discharge Assay
  • 03:37Results: Analysis of the Ubiquitylation Products
  • 05:28Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

De huidige studie biedt gedetailleerde in vitro ubiquitylatie assay protocollen voor de analyse van E3 ubiquitine ligase katalytische activiteit. Recombinante eiwitten werden tot expressie gebracht met behulp van prokaryote systemen zoals Escherichia coli-cultuur.

Tags

E3 Ubiquitin LigaseIn Vitro AnalysisE2 Enzyme SpecificitySubstrate SelectionUbiquitin TransferAuto-ubiquitylation AssaySubstrate Ubiquitylation AssayLysine Discharge AssayRecombinant ExpressionEukaryotic ProteinsSDS-PAGEThermal CyclerMaster MixEDTAApyrase

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Analyse van de Schwann-astrocyte Interacties gebruik In Vitro Testen

In vitro analyse van PDZ-afhankelijke CFTR Macromoleculaire signaalcomplexen

Analyse van gen-functie en visualisatie van Cilia-gegenereerde Fluid Flow in Blaasjes Kupffer's

siRNA Screening naar Ubiquitin en Ubiquitin-achtig systeem regulatoren van biologische pathways identificeren in gekweekte zoogdiercellen

Analyse van Nephron samenstelling en functie in de Adult zebravis Kidney

Functionele Het oplossen en Channel activiteit Metingen van gezuiverde wildtype en mutante CFTR eiwit

Uitgebreide Workflow voor de genoom-brede identificatie en expressie Meta-analyse van de ATL E3 Ubiquitin Ligase Gene familie in Grapevine

In Vitro SUMOylation Assay te studeren SUMO E3 Ligase activiteit

Analyse van bèta-cel functie met behulp van de resolutie van de eencellige Calcium Imaging in Zebrafish eilandjes

Organoïde-afgeleide epitheliale monolaag: een klinisch relevant in vitro model voor de darmbarrièrefunctie

Read Article