Name: Mikro Yerçekiminde Diş ve Solunum Hücre ve Organlarının Yayılımı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 29 s
Description: Öğrenin, mikro yerçekiminde ameloblast benzeri hücrelerin 3D kültürü ve mine protein ekspresyonu için biyoreaktör modelini. Bu yöntem, diş biyolojisi ve doku mühendisliği araştırmalarında çığır açar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Çalışmalar, Ulusal Diş ve Kraniofasiyal Araştırma Enstitüsü'nden (UG3-DE028869 ve R01-DE027930) gelen hibelerle cömertçe desteklenmiştir.

Çalışmanın TAMU kurumsal hayvan bakım kılavuzlarına uygun olmasını sağlamak için gerekli tüm kurumsal onay alınmıştır.
1. Biyoreaktör montajı ve sterilizasyonu
<ol><li>Plastik alet çevrimindeki bir otoklavda biyoreaktör için dört yüksek en-boy oranlı kabı (HARV), üretici tarafından önerildiği şekilde 121 ° C'de 20 dakika boyunca sterilize edin.</li>
	<li>Sterilizasyondan sonra, biyoreaktörle birlikte verilen vidaları sıkarak kapları bir hücre kültürü davlumbazına monte edin ve ardından kaplar kullanıma hazır hale gelir.</li>
</ol>2. Biyoreaktör ko-kültür deneyi için kullanılan iskeleler
<ol><li>Daha fazla büyüme için gerekli hücre bağlanmasına destek sağlamak için iskeleleri hücrelerle birlikte inkübe edin.</li>
	<li>Ortak kültür çalışmaları için PGA bazlı iskeleler, hidroksiapatit iskeleleri, grafen levhalar, jelatin diskler ve kollajen bazlı iskeleler arasından seçim yapın.</li>
</ol>3. Servikal Döngü (CL) diseksiyonu ve tek hücre hazırlığı
<ol><li>CO2 doz aşımı ile solunum durmasını takiben dekapitasyon ile fareleri kurban edin. NOT: Tüm hayvan çalışmaları TAMU kurumsal hayvan bakım kılavuzlarına uygundur.</li>
	<li>Servikal döngüleri, daha önce yayınlanmış bir protokol23'ün değiştirilmiş bir versiyonunu takiben 6 günlük doğum sonrası (DPN) farelerden disseke edin. NOT: Çalışmamızda servikal döngünün daha önce yayınlanmış protokolde gösterilmeyen distal kısmı dahil edilmiştir (Şekil 3).<ol><li>Disseke edilmiş dokuyu sindirimden önce soğuk steril PBS ile yıkayın, kollajenaz 37 ° C'de 30 dakika boyunca dispase ile yıkayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Çözeltiyi 70 μm steril hücre süzgecinden geçirin ve 10 dakika boyunca 800 x g'de daha fazla santrifüj yapın.</li>
	<li>Süper natantı atın. Pelet santrifüjleyin ve 800 x g'da soğuk PBS ile iki kez yıkayın. Süper natantı atın.</li>
	<li>Bir hemositometre kullanarak hücreleri sayın ve damar başına 1 X 105 hücre ekleyin.</li>
</ol>4. Diş pulpası hücre kültürü ve hücre hattı genişlemesi
<ol><li>Plaka diş pulpası hücreleri, 100 mm'lik bir doku kültürü plakasında, 4. geçitte 1 x 105 konsantrasyonunda.</li>
	<li>%10 fetal sığır serumu (FBS) ve %1 antibiyotik/antimikotik (P/S) ile desteklenmiş DMEM yüksek glukoz ortamından oluşan kültür için ortam hazırlayın.</li>
	<li>Hücreler% 85-90 birleşime ulaştığında, ortamı aspire edin ve plakaları önceden ısıtılmış PBS ile iki kez yıkayın.</li>
	<li>PBS yıkamasından sonra, plakaya önceden ısıtılmış% 0.25 Tripsin-EDTA çözeltisi ekleyin ve diş pulpası hücresi içeren plakaları 37 ° C'de 3 dakika boyunca inkübe edin.</li>
	<li>Mikroskop kullanarak görsel inceleme ile hücre ayrılmasını onaylayın.</li>
	<li>Ortamları kültür plakasındaki hücrelerle birlikte toplayın ve 25 mL'lik bir pipetle 50 mL'lik steril konik tüpe aktarın.</li>
	<li>Hücreleri 8 dakika boyunca 800 x g'de santrifüj edin ve süpernatanı atın. Hücreleri taze ortamda yeniden askıya alın ve bir hemositometre kullanarak sayın.</li>
	<li>Servikal döngü hücreleri ile ko-kültür için, biyoreaktördeki diş pulpası hücrelerini damar başına 1 x 104 konsantrasyonda tohumlayın.</li>
</ol>5. RCCS biyoreaktörü içindeki bir iskele üzerinde servikal döngü / diş pulpası hücrelerinin ortak kültürü
<ol><li>Hem hücre tiplerini, servikal döngüyü hem de diş pulpasını keratinosit SFM ortamını içeren kültür ortamına, takviyeli büyüme faktörleri, hücre dışı matriks proteinleri ve iskeleler ile ekleyin. NOT: Büyüme faktörleri 0.03 μg / mL kemik morfogenetik protein 2 (BMP 2), 0.03 μg / mL kemik morfogenetik protein 4 (BMP-4), 10 ng / mL insan rekombinant fibroblast büyüme faktörü (hFGF) ve 15 ng / mL epidermal büyüme faktörü (hEGF) konsantrasyonunda eklenirken, ECM bileşenleri 200 μg / mL Matrigel, 5 μg / mL laminin ve 5 μg / mL fibronektin içerir.</li>
	<li>1 mg LRAP (Lösin bakımından zengin amelogenin peptid) peptidi, domuz dişlerinden hazırlanan 1 mg liyofilize erken evre emaye matriksi24, 5 μg/mL laminin ve 5 μg/mL fibronektin ile zenginleştirilmiş 500 μL kollajen jeli karışımına sahip kaplama iskeleleri. NOT: Bu, deneylerimiz için en iyi sonucu verdi.</li>
	<li>İskele kaplamasını takiben, biyoreaktöre hem hücreleri hem de iskele ekleyin ve biyoreaktörü kap başına 10 mL ortam ile doldurun.</li>
	<li>Ortam, hücre ve iskelelerin eklenmesinden sonra biyoreaktör kabının doldurma portu kapağını kapatın.</li>
	<li>Steril valfleri deneyin başında şırınga portlarına takın ve deneyin sonuna kadar bir kapakla yerinde tutun.</li>
	<li>Kap% 90 dolduğunda ve dolum portu kapakları kapatılıp sıkıldıktan sonra, steril vanaları açın.</li>
	<li>Her medya değişikliği gerektiğinde iki steril şırınga (3 mL) kullanın. Bir şırıngayı taze ortamla doldurun, diğer şırınga boş bırakın.</li>
	<li>Her iki şırınga valfini de açın ve kabarcıkları boş şırınga portuna doğru yavaşça manevra yapın.</li>
	<li>Dolu şırıngadan taze ortam kaba dikkatlice enjekte edildikten sonra, kabarcıkları boş şırınga portundan çıkarın. NOT: Bu prosedür, tüm mikro kabarcıklar damarlardan çıkarılana kadar gerçekleştirilir.</li>
	<li>Şırınga portlarını kapaklarla kapatın ve şırıngaları keskin bir atık kabına atın.</li>
	<li>Her bir kabı rotatör tabanına takın ve rotatör tabanını %5 CO2 ve 37 °C sıcaklığa sahip bir inkübatöre yerleştirin.</li>
	<li>Gücü açın ve dönme hızını 10,1 rpm'ye ayarlayın. NOT: İskelelerin kap duvarına dokunmadan süspansiyonda olduğundan emin olmak için hızı ayarlayın.</li>
	<li>Medya değişimi için, hücrelerin dibe çöktüğünden emin olmak için damarları dik konuma getirin. Şırınga portlarını açın ve steril şırıngaları portlara bağlayın.</li>
	<li>Beslenme tükenmiş ortamın %75'ini aspire ederek ve diğer porttan taze ortam enjekte ederek aynı prosedürü uygulayın.</li>
</ol>6. Akciğer organı hazırlığı ve biyoreaktör bazlı kültür
NOT: Akciğer organlarının hazırlanmasında E15 vahşi tip fare yavruları kullanılmıştır.
<ol><li>CO2 boğulması ile hamile bir dişi fareyi ötenazi yaptıktan sonra akciğer dokusunu disseke edin.<ol><li>Servikal çıkık ile boğulmayı takiben ölüm doğrulandıktan sonra, göğüs boşluğunu açığa çıkarmak için bir neşter kullanın. Bundan sonra, yavruları uterustan çıkarın ve kafa kesme yoluyla ötenazi yapın.</li>
	</ol></li>
	<li>Ötanizasyondan sonra, akciğerleri bulmak için bir neşterle açarak göğüs boşluğunu hazırlayın. Akciğer dokusunun küçük bölümlerini steril PBS ile yıkayın ve% 5 CO 2 ve 37 °C sıcaklık içeren bir inkübatörde organ kültürü ortamı ile2 saat boyunca önceden sterilize edilmiş bir zar üzerine yerleştirin.</li>
	<li>Akciğer dokuları bir 2D organ kültürü plakasındaki zara bağlandığında, numuneleri biyoreaktör kabına aktarın.</li>
	<li>Medyayı kültüre hazırlayın. NOT: Kontrol DMEM yüksek glukoz ortamı% 10 fetal sığır serumu (FBS),% 1 antibiyotik çözeltisi (P / S) (penisilin, 100 U / mL, streptomisin, 50 μg / mL) ve 100 μg / mL askorbik asit (AA) içerir ve enflamatuar durumların indüksiyonu için kontrol ortamı 5 ng / mL IL-6 proteini ile desteklenir.</li>
	<li>Akciğer kültürü deneyini, yukarıda açıklandığı gibi biyoreaktörde her 48 saatte bir medya değişikliği ile 10 gün boyunca gerçekleştirin.</li>
</ol>7. İnsan periodontal ligament (hPDL) hücre kültürü ile kaplanmış iskele
<ol><li>Kültür insan periodontal ligament hücreleri. NOT: Hücreler, daha önce yayınlanan protokole göre laboratuvarımızda izole edilir ve kültürlenir25.</li>
	<li>Kollajen iskele disklerini kontrol grubu için 30 μL PBS ve nöropeptit galanin (GAL) ile gece boyunca 10-8 konsantrasyonda kaplayın.</li>
	<li>Tohum insan PDL hücreleri kontrol ve GAL kaplı iskele üzerinde 2 saat boyunca 37 °C'de bir kültür plakasında ve hücre tohumlu iskeleleri yukarıda belirtildiği gibi bir biyoreaktör kabına aktarır.</li>
	<li>Analiz için iskeleleri toplamadan önce biyoreaktörde 14 gün boyunca hücre tohumlu iskeleleri kültürleyin.</li>
</ol>8. Biyoreaktör temizliği ve bakımı
<ol><li>İskeleler/hücreler biyoreaktörden toplandıktan sonra, şırınga portlarını gemiden çıkarın. NOT: Kapların etrafındaki vidalar çıkarılır ve kap sabunlu su ile nazikçe yıkanır.</li>
	<li>Kapları temiz suyla durulayın ve vidaları bir kez daha sıkın.</li>
	<li>Otoklavlamadan sonra kapları bir sonraki kullanıma kadar saklayın.</li>
</ol>

<ol><li>Horneck, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Life+sciences%3A+microorganisms+in+the+space+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Life sciences: microorganisms in the space environment.</a> Science. 225 (4658), 226-228 (1984).</li>
<li>Helmstetter, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gravity+and+the+orientation+of+cell+division%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Gravity and the orientation of cell division.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 94 (19), 10195-10198 (1997).</li>
<li>Bizzarri, M., Monici, M., van Loon, J. J. W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+microgravity+affects+the+biology+of+living+systems%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">How microgravity affects the biology of living systems.</a> BioMed Research International. 2015, 863075(2015).</li>
<li>Freed, L. E., Vunjak-Novakovic, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spaceflight+bioreactor+studies+of+cells+and+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Space+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Spaceflight bioreactor studies of cells and tissues.</a> Advances in Space Biology and Medicine. 8, 177-195 (2002).</li>
<li>Walther, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Space+bioreactors+and+their+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Space+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Space bioreactors and their applications.</a> Advances in Space Biology and Medicine. 8, 197-213 (2002).</li>
<li>Morabito, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RCCS+bioreactor-based+modelled+microgravity+induces+significant+changes+on+in+vitro+3D+neuroglial+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">RCCS bioreactor-based modelled microgravity induces significant changes on in vitro 3D neuroglial cell cultures.</a> BioMed Research International. 2015, 754283(2015).</li>
<li>Schwarz, R. P., Goodwin, T. J., Wolf, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+culture+for+three-dimensional+modeling+in+rotating-wall+vessels%3A+An+application+of+simulated+microgravity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Tissue+Culture+Methods%22%5BJournal%5D)">Cell culture for three-dimensional modeling in rotating-wall vessels: An application of simulated microgravity.</a> Journal of Tissue Culture Methods. 14 (2), 51-57 (1992).</li>
<li>Nokhbatolfoghahaei, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computational+modeling+of+media+flow+through+perfusion-based+bioreactors+for+bone+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Institution+of+Mechanical+Engineers%2C+Part+H%22%5BJournal%5D)">Computational modeling of media flow through perfusion-based bioreactors for bone tissue engineering.</a> Proceedings of the Institution of Mechanical Engineers, Part H. 234 (12), 1397-1408 (2020).</li>
<li>Sun, F. -y, Wang, X. -m, Li, X. -y <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+innovative+membrane+bioreactor+%28MBR%29+system+for+simultaneous+nitrogen+and+phosphorus+removal%5BTitle%5D)+AND+%22Process+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">An innovative membrane bioreactor (MBR) system for simultaneous nitrogen and phosphorus removal.</a> Process Biochemistry. 48 (11), 1749-1756 (2013).</li>
<li>Steimberg, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+3D+Models+Cultured+to+Investigate+Mesenchymal+Stromal+Cells+of+the+Human+Dental+Follicle%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Methods+%28Part+C%29%22%5BJournal%5D)">Advanced 3D Models Cultured to Investigate Mesenchymal Stromal Cells of the Human Dental Follicle.</a> Tissue Engineering Methods (Part C). 24 (3), 187-196 (2018).</li>
<li>Li, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RCCS+enhances+EOE+cell+proliferation+and+their+differentiation+into+ameloblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Biology+Reports%22%5BJournal%5D)">RCCS enhances EOE cell proliferation and their differentiation into ameloblasts.</a> Molecular Biology Reports. 39 (1), 309-317 (2012).</li>
<li>Grimm, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+engineering+under+microgravity+conditions-use+of+stem+cells+and+specialized+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+and+Development%22%5BJournal%5D)">Tissue engineering under microgravity conditions-use of stem cells and specialized cells.</a> Stem Cells and Development. 27 (12), 787-804 (2018).</li>
<li>Tasoglu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+Levitational+Assembly+for+Living+Material+Fabrication%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Healthcare+Materials%22%5BJournal%5D)">Magnetic Levitational Assembly for Living Material Fabrication.</a> Advanced Healthcare Materials. 4 (10), 1469-1476 (2015).</li>
<li>Sarigil, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffold-free+biofabrication+of+adipocyte+structures+with+magnetic+levitation%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Scaffold-free biofabrication of adipocyte structures with magnetic levitation.</a> Biotechnology and Bioengineering. 118 (3), 1127-1140 (2021).</li>
<li>Anil-Inevi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofabrication+of+in+situ+Self+Assembled+3D+Cell+Cultures+in+a+Weightlessness+Environment+Generated+using+Magnetic+Levitation%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Biofabrication of in situ Self Assembled 3D Cell Cultures in a Weightlessness Environment Generated using Magnetic Levitation.</a> Scientific Reports. 8 (1), 7239(2018).</li>
<li>Nishikawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+simulated+microgravity+by+three-dimensional+clinostat+on+bone+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">The effect of simulated microgravity by three-dimensional clinostat on bone tissue engineering.</a> Cell Transplant. 14 (10), 829-835 (2005).</li>
<li>Pandya, M., Diekwisch, T. G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enamel+biomimetics-fiction+or+future+of+dentistry%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Oral+Science%22%5BJournal%5D)">Enamel biomimetics-fiction or future of dentistry.</a> International Journal of Oral Science. 11 (1), 8(2019).</li>
<li>Klein, O. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meeting+report%3A+a+hard+look+at+the+state+of+enamel+research%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Oral+Science%22%5BJournal%5D)">Meeting report: a hard look at the state of enamel research.</a> International Journal of Oral Science. 9 (11), 3(2017).</li>
<li>Liu, H., Yan, X., Pandya, M., Luan, X., Diekwisch, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Daughters+of+the+Enamel+Organ%3A+Development%2C+Fate%2C+and+Function+of+the+Stratum+Intermedium%2C+Stellate+Reticulum%2C+and+Outer+Enamel+Epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+and+Development%22%5BJournal%5D)">Daughters of the Enamel Organ: Development, Fate, and Function of the Stratum Intermedium, Stellate Reticulum, and Outer Enamel Epithelium.</a> Stem Cells and Development. 25 (20), 1580-1590 (2016).</li>
<li>Chen, L. S., Couwenhoven, R. I., Hsu, D., Luo, W., Snead, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+amelogenin+gene+expression+by+transformed+epithelial+cells+of+mouse+enamel+organ%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Maintenance of amelogenin gene expression by transformed epithelial cells of mouse enamel organ.</a> Archives of Oral Biology. 37 (10), 771-778 (1992).</li>
<li>DenBesten, P. K., Gao, C., Li, W., Mathews, C. H., Gruenert, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+an+SV40+immortalized+porcine+ameloblast-like+cell+line%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Oral+Sciences%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of an SV40 immortalized porcine ameloblast-like cell line.</a> European Journal of Oral Sciences. 107 (4), 276-281 (1999).</li>
<li>Arakaki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+epithelial-stem+cell+interactions+during+dental+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Role of epithelial-stem cell interactions during dental cell differentiation.</a> Journal of Biological Chemistry. 287 (13), 10590-10601 (2012).</li>
<li>Au - Chavez, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+Culture+of+Dental+Epithelial+Stem+Cells+from+the+Adult+Mouse+Incisor%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Isolation and Culture of Dental Epithelial Stem Cells from the Adult Mouse Incisor.</a> Journal of Visualized Experiments. (87), e51266(2014).</li>
<li>Pandya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Posttranslational+Amelogenin+Processing+and+Changes+in+Matrix+Assembly+during+Enamel+Development%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Posttranslational Amelogenin Processing and Changes in Matrix Assembly during Enamel Development.</a> Frontiers in Physiology. 8, 790(2017).</li>
<li>Dangaria, S. J., Ito, Y., Luan, X., Diekwisch, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+neural-crest-derived+intermediate+pluripotent+progenitors+into+committed+periodontal+populations+involves+unique+molecular+signature+changes%2C+cohort+shifts%2C+and+epigenetic+modifications%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+and+Development%22%5BJournal%5D)">Differentiation of neural-crest-derived intermediate pluripotent progenitors into committed periodontal populations involves unique molecular signature changes, cohort shifts, and epigenetic modifications.</a> Stem Cells and Development. 20 (1), 39-52 (2011).</li>
<li>Ahadian, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrical+stimulation+as+a+biomimicry+tool+for+regulating+muscle+cell+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Organogenesis%22%5BJournal%5D)">Electrical stimulation as a biomimicry tool for regulating muscle cell behavior.</a> Organogenesis. 9 (2), 87-92 (2013).</li>
<li>Smith, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+and+chemical+events+during+enamel+maturation%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Oral+Biology+%26+Medicine%22%5BJournal%5D)">Cellular and chemical events during enamel maturation.</a> Critical Reviews in Oral Biology & Medicine. 9 (2), 128-161 (1998).</li>
<li>Pei, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioreactors+mediate+the+effectiveness+of+tissue+engineering+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Bioreactors mediate the effectiveness of tissue engineering scaffolds.</a> The FASEB Journal. 16 (12), 1691-1694 (2002).</li>
<li>Ahmed, S., Chauhan, V. M., Ghaemmaghami, A. M., Aylott, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+generation+of+bioreactors+that+advance+extracellular+matrix+modelling+and+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Letters%22%5BJournal%5D)">New generation of bioreactors that advance extracellular matrix modelling and tissue engineering.</a> Biotechnology Letters. 41 (1), 1-25 (2019).</li>
<li>Seidel, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolving+stem+and+progenitor+cells+in+the+adult+mouse+incisor+through+gene+co-expression+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Resolving stem and progenitor cells in the adult mouse incisor through gene co-expression analysis.</a> Elife. 6, (2017).</li>
<li>Green, H., Rheinwald, J. G., Sun, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Properties+of+an+epithelial+cell+type+in+culture%3A+the+epidermal+keratinocyte+and+its+dependence+on+products+of+the+fibroblast%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Clinical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Properties of an epithelial cell type in culture: the epidermal keratinocyte and its dependence on products of the fibroblast.</a> Progress in Clinical and Biological Research. 17, 493-500 (1977).</li>
<li>Green, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+birth+of+therapy+with+cultured+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">The birth of therapy with cultured cells.</a> Bioessays. 30 (9), 897-903 (2008).</li>
<li>Zeichner-David, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+ameloblast+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Control of ameloblast differentiation.</a> International Journal of Developmental Biology. 39 (1), 69-92 (1995).</li>
<li>Bei, M., Stowell, S., Maas, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Msx2+controls+ameloblast+terminal+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Dynamics%22%5BJournal%5D)">Msx2 controls ameloblast terminal differentiation.</a> Developmental Dynamics. 231 (4), 758-765 (2004).</li>
<li>Dangaria, S. J., Ito, Y., Luan, X., Diekwisch, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+periodontal+ligament+regeneration+by+periodontal+progenitor+preseeding+on+natural+tooth+root+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+and+Development%22%5BJournal%5D)">Successful periodontal ligament regeneration by periodontal progenitor preseeding on natural tooth root surfaces.</a> Stem Cells and Development. 20 (10), 1659-1668 (2011).</li>
<li>Del Moral, P. M., Warburton, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Explant+culture+of+mouse+embryonic+whole+lung%2C+isolated+epithelium%2C+or+mesenchyme+under+chemically+defined+conditions+as+a+system+to+evaluate+the+molecular+mechanism+of+branching+morphogenesis+and+cellular+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Explant culture of mouse embryonic whole lung, isolated epithelium, or mesenchyme under chemically defined conditions as a system to evaluate the molecular mechanism of branching morphogenesis and cellular differentiation.</a> Methods in Molecular Biology. 633, 71-79 (2010).</li>
<li>Hermanns, M. I., Unger, R. E., Kehe, K., Peters, K., Kirkpatrick, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+epithelial+cell+lines+in+coculture+with+human+pulmonary+microvascular+endothelial+cells%3A+development+of+an+alveolo-capillary+barrier+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Investigation%22%5BJournal%5D)">Lung epithelial cell lines in coculture with human pulmonary microvascular endothelial cells: development of an alveolo-capillary barrier in vitro.</a> Laboratory Investigation. 84 (6), 736-752 (2004).</li>
<li>Duell, B. L., Cripps, A. W., Schembri, M. A., Ulett, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+cell+coculture+models+for+studying+infectious+diseases%3A+benefits+and+limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnolog%22%5BJournal%5D)">Epithelial cell coculture models for studying infectious diseases: benefits and limitations.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnolog. 2011, 852419(2011).</li>
<li>Kuppan, P., Sethuraman, S., Krishnan, U. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+co-culture+of+epithelial+cells+and+smooth+muscle+cells+on+aligned+nanofibrous+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Materials+Science+and+Engineering%3A+C%22%5BJournal%5D)">In vitro co-culture of epithelial cells and smooth muscle cells on aligned nanofibrous scaffolds.</a> Materials Science and Engineering: C. 81, 191-205 (2017).</li>
<li>Navran, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+application+of+low+shear+modeled+microgravity+to+3-D+cell+biology+and+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Annual+Review%22%5BJournal%5D)">The application of low shear modeled microgravity to 3-D cell biology and tissue engineering.</a> Biotechnology Annual Review. 14, 275-296 (2008).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.

Mikrogravitedeki hücrelerin büyümesi için protokolün kritik adımları arasında biyoreaktör, iskele, 3D kültür için kullanılan hücreler ve hücre farklılaşmasını indüklemek için bir araç olarak iskele kaplaması bulunur. Çalışmalarımızda kullanılan biyoreaktör tipi, NASA tarafından simüle edilmiş mikro yerçekiminde hücreleri büyütmek için geliştirilen orijinal Döner Hücre Kültür Sistemi (RCCS) dönen silindirik doku kültürü cihazının yakın tarihli bir modifikasyonu olan RCCS-4 biyoreaktörünü içermektedir. Bu RCCS-4 ortamı, kü...

Yerçekimi, bireysel hücrelerin biyolojisi ve organizmalar içindeki işlevleri de dahil olmak üzere Dünya'daki yaşamın tüm yönlerini etkiler. Hücreler mekanoreseptörler aracılığıyla yerçekimini algılar ve sitoiskelet mimarilerini yeniden yapılandırarak ve hücre bölünmesi 1,2,3'ü değiştirerek yerçekimindeki değişikliklere yanıt verir. Mikro yerçekiminin diğer etkileri arasında sıvı dolu veziküllerdeki hidrostatik basınç, organellerin çökelmesi ve akış ve ısının yüzdürme güdümlü konveksiyonu4 bulunur. Yerçekimi kaybının insan hücreleri ve organları üzerindeki etkisi üzerine yapılan çalışmalar başlangıçta uzay uçuşu görevleri sırasında astronotlar üzerindeki ağırlıksız ortamı simüle etmek için yapılmıştır5. Bununla birlikte, son yıllarda, NASA tarafından mikroyerçekimini simüle etmek için geliştirilen bu 3D biyoreaktör teknolojileri, aksi takdirde 2D kültür sistemlerine uygun olmayan hücre popülasyonlarının kültürü için yeni yaklaşımlar olarak giderek daha alakalı hale gelmektedir.
3D Biyoreaktörler, süspansiyondaki hücreleri büyüterek mikro yerçekimini simüle eder ve böylece sürekli bir "serbest düşüş" etkisi yaratır. Dönen biyoreaktörlerin diğer avantajları arasında organ kültürü sistemlerinde karşılaşılan havaya maruz kalma eksikliği, kayma stresi ve türbülansta azalma ve değişen besin kaynaklarına sürekli maruz kalma sayılabilir. Bir Döner Hücre Kültür Sistemi (RCCS) biyoreaktörü tarafından sağlanan bu dinamik koşullar, uzamsal birlikte lokalizasyonu ve tek hücrelerin agregalara üç boyutlu montajınıdesteklemektedir 6,7.
Önceki çalışmalar, kemik rejenerasyonu8, diş mikrobu kültürü9 ve insan diş folikül hücrelerinin kültürü10 için döner bir biyoreaktörün avantajlarını göstermiştir. RCCS'nin EOE hücre proliferasyonunu ve ameloblastlara farklılaşmasını arttırdığını öne süren bir rapor da vardır11. Bununla birlikte, farklılaşmış hücreler, uzamış morfolojileri veya polarize hücre şekilleri dikkate alınmadan, ameloblastin immünofloresansına ve / veya amelogenin ekspresyonuna dayanan ameloblastlar olarak kabul edildi11 .
NASA tarafından geliştirilen döner duvar damarları (RWV) biyoreaktörüne ek olarak, hücrelerden 3D agregalar üretmek için diğer teknolojiler arasında manyetik levitasyon, rastgele konumlandırma makinesi (RPM) ve klinostat12 bulunmaktadır. Manyetik levitasyon elde etmek için, manyetik nanopartiküllerle etiketlenmiş hücreler harici bir manyetik kuvvet kullanılarak havaya kaldırılır, bu da adiposit yapılarının biyofabrikasyonu için kullanılan iskelesiz 3D yapıların oluşumuna neden olur13,14,15. Mikro yerçekimini simüle etmek için başka bir yaklaşım, klinostat16 adı verilen bir cihazın merkezindeki kümülatif yerçekimi vektörünün iptali ile sonuçlanan iki eksen hakkında eşzamanlı dönüşü kontrol ederek çok yönlü G kuvvetlerinin üretilmesidir. Kemik iliği kök hücreleri bir klinostatta kültürlendiğinde, osteoblast farklılaşmasının baskılanması yoluyla yeni kemik oluşumu inhibe edildi ve bu da mikrogravitenin farklılaştırıcı etkilerinden birini gösterdi16.
Ameloblastların sadık kültürünü kolaylaştırmak için in vitro sistemler, diş minesi doku mühendisliğine doğru büyük bir adım atacaktır17. Ne yazık ki, bu tarihe kadar, ameloblastların kültürü zorlu bir girişim olmuştur18,19. Şimdiye kadar, fare ameloblast soy hücre hattı (ALC), sıçan diş epitel hücre hattı (HAT-7), fare LS8 hücre hattı20, domuz PABSo-E hücre hattı 21 ve sıçan SF2-24 hücre hattı22 dahil olmak üzere beş farklı ameloblast benzerihücre hattı bildirilmiştir. Bununla birlikte, bu hücrelerin çoğunluğu 2D kültüründe ayırt edici polarize hücre şeklini kaybetmiştir.
Bu çalışmada, mezenkimal progenitörlerle birlikte kültürlenmiş servikal döngü epitelinden ameloblast benzeri hücrelerin büyümesini kolaylaştırmak ve yerçekimine bağlı besin akışının azalması ve sitoiskelet değişiklikleri de dahil olmak üzere 2D kültür sistemlerinin zorluklarının üstesinden gelmek için bir Döner Hücre Kültürü Biyoreaktör Sistemine (RCCS) döndük. Ek olarak, RCCS, periodontal doku mühendisliği ile ilgili hücre / iskele etkileşimlerinin incelenmesi ve inflamatuar mediatörlerin akciğer alveoler dokuları üzerindeki etkilerinin in vitro olarak incelenmesi için yeni yollar sağlamıştır. Birlikte, bu çalışmalardan elde edilen sonuçlar, mikrogravite tabanlı döner kültür sistemlerinin farklılaşmış epitelinin yayılması ve hücre / iskele etkileşimleri ve enflamatuar koşullara doku yanıtı da dahil olmak üzere in vitro olarak yetiştirilen hücreler üzerindeki çevresel etkilerin değerlendirilmesi için faydalarını vurgulamaktadır.

<table><tbody><tr><td>Antibiyotik-antimikotik</td><td>ThermoFisher Scientfic</td><td>15240096</td><td></td></tr><tr><td>Askorbik Asit</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A4544</td><td></td></tr><tr><td>BGJb Fitton-Jackson Modifikasyon ortamı</td><td>ThermoFisher Scientfic</td><td>12591</td><td></td></tr><tr><td>BIOST PGA iskelesi</td><td>Synthecon</td><td>Custom</td><td>Şirketten özel bir sipariş yoluyla temin edilebilir</td></tr><tr><td>BMP-2</td><td>R& D Sistemleri</td><td>355-BM</td><td></td></tr><tr><td>BMP-4</td><td>Ar-Ge D Systems</td><td>314-BP</td><td></td></tr><tr><td>DMEM Media</td><td>Sigma</td><td>Aldrich D6429-500mL</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>ThermoFisher Scientfic</td><td>16140071</td><td></td></tr><tr><td>Fibricol</td><td>Advanced Biomatrix</td><td>5133-20mL</td><td></td></tr><tr><td>Fibronektin</td><td>Corning</td><td>354008</td><td></td></tr><tr><td>Galanin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G-0278</td><td></td></tr><tr><td>Jelatin disk</td><td>Gelişmiş Biomatrix</td><td>CytoForm 500</td><td></td></tr><tr><td>Grafen levhalar</td><td>Gelişmiş Biomatrix</td><td>CytoForm 300</td><td></td></tr><tr><td>hEGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15</td><td></td></tr><tr><td>hFGF</td><td>ThermoFisher Scientfic</td><td>AA1-155</td><td></td></tr><tr><td>Hidroksiapatit disk</td><td>Gelişmiş Biomatrix</td><td>CytoForm 200</td><td></td></tr><tr><td>Il-6 proteini</td><td>PeproTech</td><td>200-06</td><td></td></tr><tr><td>Keratinosit SFM ortamı (1X)</td><td>ThermoFisher Scientfic</td><td>17005042</td><td></td></tr><tr><td>Laminin</td><td>Corning</td><td>354259</td><td></td></tr><tr><td>LRAP peptit</td><td>Peptit 2.0</td><td>Özel yapım dizi: MPLPPHPGSPGYINLSYEVLT PLKWYQSMIRQPPLSPILPEL PLEAWPATDKTKREEVD</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>Corning</td><td>354234</td><td></td></tr><tr><td>Kırlangıç Nitroselüloz membran</td><td>Merck Millipore</td><td></td><td></td>AABP04700</tr><tr><td>RCCS Biyoreaktör</td><td>Synthecon</td><td>RCCS 4HD</td><td></td></tr><tr><td>SpongeCol</td><td>Gelişmiş Biomatrix</td><td>5135-25EA</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga valfi tek yönlü musluk w / döner erkek luer kilidi</td><td>Smiths Medical</td><td>MX5-61L</td><td></td></tr><tr><td>İğneli Şırıngalar 3cc</td><td>McKESSON</td><td>16-SN3C211</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin EDTA (% 0.25)</td> <td>ThermoFisher Scientfic</td><td></td><td></td>25200056</tr></tbody></table>

mikro yerçekiminde diş ve solunum hücre ve organlarının yayılımı

Propagation of Dental and Respiratory Cells and Organs in Microgravity

Yerçekimi, insan hücresi fonksiyonunun, proliferasyonun, sitoiskelet mimarisinin ve oryantasyonunun temel belirleyicilerinden biridir. Döner biyoreaktör sistemleri (RCCS'ler), uzayda meydana gelen yerçekimi kaybını taklit eder ve bunun yerine kültürlenmiş hücrelerin veya dokuların sürekli rotasyonu yoluyla bir mikro yerçekimi ortamı sağlar. Bu RCCS'ler, kesintisiz bir besin kaynağı, büyüme ve transkripsiyon faktörleri ve oksijen sağlar ve hareketsiz 2D (iki boyutlu) hücre veya organ kültürü kaplarındaki yerçekimi kuvvetlerinin bazı eksikliklerini giderir. Bu çalışmada RCCS'leri servikal loop hücreleri ve dental pulpa hücrelerini ameloblast haline getirmek, periodontal progenitör/iskele etkileşimlerini karakterize etmek ve inflamasyonun akciğer alveolleri üzerindeki etkisini belirlemek için birlikte kültürlemek için kullandık. RCCS ortamları, ameloblast benzeri hücrelerin büyümesini kolaylaştırdı, iskele kaplamalarına yanıt olarak periodontal progenitör proliferasyonunu teşvik etti ve enflamatuar değişikliklerin kültürlü akciğer alveolleri üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesine izin verdi. Bu makale, çevresel koşulları, materyalleri ve yol boyunca adımları özetlemekte ve kritik yönleri ve deneysel ayrıntıları vurgulamaktadır. Sonuç olarak, RCCS'ler, in vitro hücrelerin kültürüne ve 3D (üç boyutlu) büyümesine hakim olmak ve klasik 2D kültür ortamlarına uygun olmayan hücresel sistemlerin veya etkileşimlerin incelenmesine izin vermek için yenilikçi araçlardır.

Biyoreaktörün iç odası, hücrelerin çoğalması ve farklılaşması, bir iskeleye bağlanması veya doku benzeri montajlar oluşturmak için toplanması için bir ortam sağlar. Her HARV damarı 10 mL'ye kadar ortam tutar ve her hücrenin hayatta kalmak için mükemmel bir şansa sahip olması için sürekli bir besin dolaşımını kolaylaştırır. Şekil 1A , şırınga portlarının, steril tek elden valflerin takılı olduğu kabın ön plakasına tutturulmasını göstermektedir. Bu vanalar kültür odasına kapıcı görevi görür. O...

Bu protokol, mikrogravitedeki ameloblast benzeri hücrelerin kültürü ve 3D büyümesi için, uzun ve polarize şekillerini ve emayeye özgü protein ekspresyonunu korumak için bir yöntem sunar. Periodontal mühendislik yapıları kültürü ve mikro yerçekiminde akciğer organları için kültür koşulları da tanımlanmıştır.

Mikro Yerçekiminde Diş ve Solunum Hücre ve Organlarının Yayılımı

Gravity is one of the key determinants of human cell function, proliferation, cytoskeletal architecture and orientation. Rotary bioreactor systems (RCCSs) ...

Kültürde amelogenin salgılayan ameloblastı uzamış ve polarize etmiştir. Bu aynı zamanda mikro yerçekiminde ameloblast hücrelerinin büyümesi için ilk protokoldür. Kültürdeki ameloblastların büyümesi, emaye alanındaki en büyük zorluklardan biri olmuştur.Ve bizim için, bu biyoreaktör modelini kullanıyor, emaye araştırmalarında bu ayırt edici özelliği ilk kez başardık. Bu model, ameloblast hücrelerinin biyolojisini anlamak için kullanılabilir. Bu model Dr.Mirali Pandya tarafından gösterilecektir.Toplanan dokuyu altı günlük doğum sonrası farelerden diseksiyon mikroskobu ve disseke servikal döngüler altına yerleştirerek başlayın. Steril vanaları şırınga portlarına takarak bir biyoreaktör kurun. Her iki hücreyi, servikal döngüyü ve diş pulpasını biyoreaktöre kaplanmış iskele ile birlikte ekleyin ve biyoreaktör kabını, büyüme faktörleri ve hücre dışı matriks proteinleri ile desteklenmiş 10 mililitre keratinosit SFM ortamı ile doldurun.Biyoreaktör kabının dolum portu kapağını kapatın ve sıkın, ardından steril valfleri açın. Medya değişimi için iki steril üç mililitrelik şırınga kullanın. Bunu yapmak için, bir şırıngayı taze ortamla doldurun ve diğer şırıngayı boş bırakın.Her iki şırınga val

propagation-of-dental-and-respiratory-cells-and-organs-in-microgravity

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Erken embriyonik akciğer organ kültürü epitelyal-mezenkimal etkileşimleri çalışmak için çok yararlı bir sistem. , Bu sistem içinde kolaylıkla manipüle edilebilir belirli koşullar altında epitelyal ve mezenkimal morfolojilerinden ilerler.

Fare Embriyonik Akciğer Kültür, Dallanma Moleküler Mekanizmalar değerlendirin Bir Sistem

Gökbilim kan teşhis yenilik gerekiyor. Birkaç gösteriler, uçakta azaltılmış-yerçekimi sağlık tanı teknolojisi gösteren yayınlanmıştır. Burada bileşenleri ve diğer kurulumları uyarlanabilir hazırlık stratejileri ile bir prototip nokta-bakım akış sitometri tasarımı için bir parabolik uçuş test takımının inşası ve işletilmesi için bir yöntem mevcut.

Prototip Minyatür Akış Sitometresi ve Companion mikroakışkan Karıştırma Teknoloji İndirimli-gravite Çevre Donanım Gösterileri

Bir üç boyutlu (3-D) bir ortamda büyüyen hücreler 2-B ortamları (örneğin, şişeler ya da bulaşıklar için) hücre ekimi üzerinde belirgin bir iyileşme göstermektedir. Burada dönen duvar-damar (RWV) Biyoreaktörlerde tarafından sağlanan mikrogravite altında kültüre insan bağırsak mukozasının bir çok hücreli 3-D Organotipik modelinin gelişimini betimler.

İnsan bağırsak mukozasının bir Multisellüler Üç boyutlu Organotipik Modelinin Geliştirilmesi yerçekimi Yetiştirilen

Matrisi kullanarak simüle mikrogravite koşuldaki kültür hücrelere olmadan doku oluşturmak için son derece gelecek vaat eden bir teknik oluşturur. Döner kültür sistemiyle, yumurtalık folikülü büyüme ve oosit olgunlaşma folikül hayatta kalma, morfolojisi, büyüme ve oosit işlevini simüle mikrogravite koşul altında açısından incelenmiştir.

Vitro Simüle mikrogravite altında fare Preantral follikül gelişimi

NASA GeneLab platformu biyolojik uzay uçuşu deneylerden değerli omics veri sınırsız erişim sağlar. Biz nasıl uzayda bir tipik fare deney ve ne tür deneyler verileri erişilebilir analiz ve açıklanmaktadır.

Fare açık erişim NASA GeneLab platformu kullanarak fizyolojisi üzerinde uzay uçuşu etkileri keşfetmek

Makalede, indüklenen pluripotent kök hücrelerin mezenkim ile birlikte hem proksimal hem de distal epitel akciğer hücrelerini içeren üç boyutlu tüm akciğer organoidlerine yönlendirilmiş adım bilgeliği açıklanmaktadır.

Akciğer Gelişim Biyolojisi ve Hastalığının Modellenerek İndüklenen Pluripotent Kök Hücrelerden 3D Bütün Akciğer Organoidlerinin Üretimi

Bu, özel tek kullanımlık kültür kapları kullanarak simüle edilmiş mikro yerçekiminde lenfositleri kültürlemek için ticari olarak temin edilebilen bir döner hücre kültürü sistemi kullanmak için adım adım bir kılavuzdur. Bu kültürleme yöntemi herhangi bir süspansiyon tipi hücre kültürüne uygulanabilir.

Bir Döner Hücre Kültür Sistemi Kullanarak Simüle Edilmiş Mikrogravitede Lenfositlerin Kültürlenmesi

Protokol, endojen epitelin sıçan trakeasından seçici olarak çıkarılmasına ve lümen yüzeyindeki eksojen hücrelerin homojen dağılımına izin veren, ardından hücre dokusu yapısının uzun süreli in vitro kültürüne izin veren görüntüleme özellikli bir biyoreaktörü tanımlar.

Biyomühendislik hava yolu dokusu üretmek için görüntüleme kılavuzlu biyoreaktör

Bu protokol, A549 alveolar epitel hücreleri ve MRC-5 akciğer fibroblastlarından organoid üretimini, hücre dışı matris hidrojel iskelesi üzerinde üretmeni, ardından 3D kolajen jellerine gömülüp hücre germe biyoreaktör kullanılarak mekanik gerilmeye maruz kalmayı ve alveolar mekanobiyoloji araştırmasını sunmaktadır.

Mekanik Hücre Esneme Biyoreaktörü kullanarak 3D Kolajen Gömülü A549/MRC-5 Alveolar Organoidlerin Üretimi

Bu protokol, bitki deneyleri için aşırı karbondioksit (exCO2) seviyelerini koruyabilen küçük, düşük maliyetli bir büyüme odasının nasıl inşa edileceğini ve işletileceğini açıklar. Oda, tek kartlı bilgisayar tabanlı izleme ve kontrol sistemi ile pasif hidroponik emici sistem kullanarak uzay uçuşu ile ilgili atmosfer koşullarında mikroyeşil fizyolojisinin tekrarlanabilir çalışmalarını mümkün kılar.

Mikroyeşil Fizyolojisi'nin Uzay Uçuşu Ile İlgiliCO2 Seviyeleri altında Değerlendirilmesi Amacıyla Düşük Maliyetli Yüksek Karbondioksit Büyüme Odası İnşası ve Işletilmesi

Öğrenin, mikro yerçekiminde ameloblast benzeri hücrelerin 3D kültürü ve mine protein ekspresyonu için biyoreaktör modelini. Bu yöntem, diş biyolojisi ve doku mühendisliği araştırmalarında çığır açar.

Mikro Yerçekiminde Diş ve Solunum Hücre ve Organlarının Yayılımı

Daha fazla video keşfet