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DNA二重鎖破断時の転写活性の生細胞イメージング

JoVE Journal
Biology

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JoVE Journal Biology

Live-Cell Imaging of Transcriptional Activity at DNA Double-Strand Breaks

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DNA二重鎖破断時の転写活性の生細胞イメージング

DOI:

10.3791/62968-v

•

09:07 min

•

September 20, 2021

•

Madalena R. de Almeida, Eduardo Gameiro, Sérgio F. de Almeida, Robert M. Martin

¹Instituto de Medicina Molecular João Lobo Antunes,Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa

Chapters

00:04Introduction
00:53Preparation and Transfection of Cells for Live-Cell Microscopy
02:09Experimental Setup
04:05Image Acquisition
06:04Microscopy Calibration Measurements and Analysis
06:51Results: Analysis of Transcription Detection at Sites of DNA Double-Strand Breaks
08:12Conclusion

Summary

Automatic Translation

このプロトコルは、新しいレポーター遺伝子システムと、一分子感受性を有するDNA二本鎖破断時の転写を検出するための実験的セットアップを提示する。

Tags

Keywords: Live-cell Imaging Transcriptional Activity DNA Double-strand Breaks Transcription Detection Single-cell Analysis DNA Damage Response Transcription-replication Crosstalk Doxycycline Induction Calibration Measurements Microcentrifuge Tube Preparation Transfection Glass Bottom Dish Microscopy Observation

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