Presentamos un protocolo para el aislamiento y la fracturación por congelación de vesículas extracelulares (EV) originadas a partir de células uroteliales cancerosas. La técnica de congelación-fractura reveló el diámetro y la forma de los EV y, como característica única, la organización interna de las membranas EV. Estos son de inmensa importancia para comprender cómo los EV interactúan con las membranas receptoras.