Infarctus aigu du myocarde chez le rat

L’objectif général de cette procédure est de modéliser l’infarctus aigu du myocarde chez le rat pour l’étude des mécanismes de signalisation cardiaque associés à la réponse immédiate du myocarde à l’ischémie cardiaque, suivie d’une lésion de reperfusion. Ces réponses comprennent la taille de l’infarctus, la zone à risque et la mort cellulaire. La première étape consiste à exposer le ventricule gauche en faisant une petite incision au quatrième espace intercostal du côté gauche du thorax et en écartant les côtes une fois isolées.

L’artère descendante antérieure gauche, ou DAL, est ligaturée transitoirement pendant 30 minutes après la période ischémique. La ligature du DAL est libérée, ce qui permet une reperfusion cardiaque après une période de reperfusion de quatre heures. Le DAL est ligaturé une fois de plus avant l’excision du cœur et examiné pour déterminer la taille de la zone du myocarde infarctus à risque et non à risque.

En fin de compte, les résultats de l’évaluation histologique de l’infarctus. Le myocarde peut être utilisé pour explorer des stratégies thérapeutiques pour le traitement de l’insuffisance cardiaque. Cette technique peut donner un aperçu des mécanismes de signalisation associés aux réponses immédiates à l’ischémie, suivies de lésions efficaces telles que la taille de l’infarctus, la zone à risque et la mort cellulaire.

Ce modèle peut être utilisé pour évaluer de nouvelles stratégies thérapeutiques pour le traitement de la cardiopathie ischémique. La démonstration de la procédure sera assurée par un associé de recherche principal et X, un boursier postdoctoral senior du laboratoire du Dr Bradley McConnell du Département des sciences pharmacologiques et pharmaceutiques de l’Université de Houston, membre institutionnel du Texas Medical Center. Avant que l’intervention chirurgicale puisse commencer, la surface opératoire doit être désinfectée avec de l’éthanol à 70 %.

Stérilisez tous les instruments chirurgicaux avec un stérilisateur à billes chaudes avant chaque intervention chirurgicale. Les instruments nécessaires comprennent deux ciseaux chirurgicaux, une pince, une pince incurvée, deux porte-aiguilles et un écarteur de poitrine. Ajustez la température du système de couverture homéothème de manière à ce qu’il maintienne la température corporelle de l’animal à 37 plus ou moins un degré Celsius.

La taille d’un infarctus dépend de la durée de l’occlusion ainsi que de la température corporelle. Ayez de la gaze de coton et des applicateurs à portée de main pour gérer les saignements. Seuls les animaux qui réussissent un examen physique par inspection visuelle, mesure de la fréquence cardiaque, de la fréquence respiratoire, de la température corporelle et du poids corporel sont utilisés dans ces études.

Consigner le poids et les caractéristiques d’identification des animaux en bonne santé qui subiront une intervention chirurgicale la veille de l’opération. Administrez une dose de masques à la buprénorphine. Des blouses et des gants doivent être portés tout au long de la procédure, et les gants doivent être changés entre les chirurgies individuelles.

Pour commencer, anesthésie un rat et prépare le site chirurgical en rasant soigneusement la fourrure du cou et de la poitrine. Désinfectez les zones rasées avec une solution de bétadine, suivie de 70 % d’éthanol. Répétez cette procédure trois fois.

Placez l’animal sur un système de couverture homéothème pour un bon maintien de la température corporelle. Allongé sur son côté droit. Le biseautage des bords d’un tube en polyéthylène facilite l’insertion dans le larynx.

Insérez le tube endotrachéal à l’aide d’un stéréomicroscope chirurgical. Manipulez doucement la langue au besoin et gardez la trachée en vue. Connectez le tube endotrachéal à un ventilateur fonctionnant à 80 respirations par minute et à un volume courant de 1,2 millilitre pour 100 grammes de poids corporel.

Une fois la ventilation mécanique obtenue, placez un champ stérile sur le rat en ne laissant que la zone chirurgicale exposée. Une fois que la respiration régulière est établie, ouvrez la poitrine au quatrième espace intercostal gauche. Minimisez le degré de coupure dans le tissu pour réduire le risque de saignement.

Positionnez un écarteur thoracique dans le quatrième espace intercostal et écartez les côtes pour exposer le ventricule gauche ou VG. Ensuite, ouvrez le péricarde en le laissant en place. Si possible, identifiez l’artère descendante antérieure gauche proximale ou l’artère DAL à l’aide d’un stéréomicroscope chirurgical.

Transitoirement, ligatez, ou nouez avec un nœud coulant le DAL pour induire une ischémie. En prenant soin de ne pas extérioriser le cœur proprement dit. La ligature LAD est confirmée par l’observation du blanchiment du tissu myocardique distal à la suture, ainsi que par le dysfonctionnement de la paroi antérieure pendant la période ischémique.

Après une période ischémique de 30 minutes, commencez la reperfusion cardiaque en coupant ou en relâchant la ligature autour du DAL avec des ciseaux microchirurgicaux. La reperfusion est vérifiée par le retour de la couleur rouge dans le tissu myocardique et la mise en évidence d’une certaine récupération du mouvement de la paroi antérieure observée immédiatement après la libération de la ligature LAD. La procédure est identique pour les rats témoins fictifs, sauf que le DAL n’est pas ligaturé transitoirement.

Retirez l’écarteur de poitrine et rapprochez les côtes avec un motif de suture interrompu. Une fois les côtes fermées, créez une pression thoracique négative pour assurer une bonne respiration en aspirant de l’air de la cavité thoracique. Enfin, fermez la peau avec un motif de suture continu Après la chirurgie, placez le rat dans une cage avec un coussin chauffant et surveillez la température corporelle par un thermomètre rectal, la fréquence respiratoire par inspection visuelle, la fréquence cardiaque par palpitations et des signes anormaux de douleur jusqu’à ce que l’animal devienne ambulatoire.

Une solution saline stérile doit être administrée. Si des signes de déshydratation sont observés, administrer de la buprénorphine immédiatement après la chirurgie. Après une période de reperfusion de quatre heures, replacez le rat réanesthésié dans la zone chirurgicale.

Visualisez le ventricule gauche comme démontré précédemment et ligaturez le LADA une deuxième fois ou le nœud coulant peut être refait. Injectez un millilitre de bleu et de solution saline Evans à 5 % dans la chambre ventriculaire droite et laissez perfuser pendant deux minutes. Après cette période, injectez un millilitre de solution de chlorure de potassium saturé dans la chambre ventriculaire droite pour arrêter le cœur de battre rapidement, excisez le cœur et intégrez-le dans une solution saline tamponnée à 2 % d’agrophosphate réchauffée.

Une fois que l’agro se solidifie à température ambiante, coupez le cœur en sections d’un à deux millimètres. Colorez le myocarde viable avec du chlorure de tétra-oléum à 2 % de trien ou TTC pendant 20 minutes et capturez une image de chaque tranche vue. Voici une image représentative du cœur de rat.

Après quatre heures de reperfusion, la zone en bleu représente la zone non occluse ou non à risque perfusée. Les zones rouges indiquent la zone à risque d’infarctus et les zones jaunes blanches indiquent un infarctus du myocarde dans la zone à risque. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de se comporter en cas d’infarctus aigu du myocarde chez le rat et un modèle animal utilisé pour imiter la cardiopathie ischémique humaine.

Ce modèle peut être utilisé pour étudier les réponses immédiates à l’ischémie, suivie d’une lésion de reperfusion dans les premières heures, telles que la taille de l’infarctus, le risque de zone et la mort cellulaire. Comme vous l’observez dans cette vidéo, bonne chance dans vos expériences.