Interview: HIV-1 Provirus-DNA Excision Mit einem Evolved Rekombinase

Biology

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Summary

Aktuelle HIV-1-Strategien handeln, um den viralen Lebenszyklus zu unterdrücken, aber nicht effektiv beseitigen Infektion. Hier zeigen wir, dass ein technisch Rekombinase effizient Verbrauchsteuern integrierte HIV-1 Provirus-DNA aus dem Genom der infizierten Zellen.

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Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

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Abstract

HIV-1 integriert sich in das Host-Chromosom von infizierten Zellen und weiterhin als Provirus durch long terminal repeats flankiert. Aktuelle Behandlungsstrategien in erster Linie Ziel-Virus-Enzyme oder Virus-Zell-Fusion, die Unterdrückung der viralen Lebenszyklus ohne Beseitigung der Infektion. Da die integrierte Provirus wird durch diese Ansätze, neue resistente Stämme von HIV-1 gezielten entstehen kann. Hier berichten wir, dass die gentechnisch Rekombinase Tre (siehe Molekulare Evolution der Tre-Rekombinase, Buchholz, F., Max-Planck-Institut für Molekulare Zellbiologie und Genetik, Dresden) effizient Verbrauchsteuern integrierte HIV-1 Provirus-DNA aus dem Genom der infizierten Zellen. Wir produzierten loxLTR mit viralen Pseudotypen und infizierten HeLa-Zellen zu untersuchen, ob Tre-Rekombinase kann Verbrauchsteuern das Provirus aus dem Genom des HIV-1 infizierten menschlichen Zellen. Ein Virus-Partikel-Releasing-Zelllinie wurde kloniert und transfiziert mit einem Plasmid, das Tre oder mit einer Kindersicherung Vektor. Rekombinase-Aktivität und Virus-Produktion überwacht wurden. Alle Assays demonstriert die effiziente Löschung der Provirus aus infizierten Zellen ohne sichtbare zytotoxische Wirkung. Diese Ergebnisse dienen als proof of principle, dass es möglich ist, eine Rekombinase entwickeln, um gezielt eine HIV-1 LTR und dass diese Rekombinase ist in der Lage Auslösen der HIV-1-Provirus aus dem Genom des HIV-1-infizierten menschlichen Zellen.

Bevor ein technisch-Rekombinase die therapeutische Arena betreten konnten, müssen jedoch erhebliche Hindernisse zu überwinden. Zu den wichtigsten Themen, mit denen wir konfrontiert sind eine effiziente und sichere Lieferung an Zielzellen und das Fehlen von Nebenwirkungen.

Protocol

Bitte lesen Sie related videos mit dem Titel Principles of ortsspezifische Rekombinase (SSR)-Technologie und Molekulare Evolution der Tre-Rekombinase für weitere Informationen über ortsspezifische Rekombination und Technik der Website-Spezifität der Rekombinase Enzyme.

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Comments

10 Comments

  1. Please this must be in clinical trials asap..  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 24, 2008 - 7:26 PM
  2. Moving faster with recombinase. To tell the truth i don' t trust completely in the results of the research, any kind of research, humans trial included. Kp-1461 has been halted almost at the end of phase ² humans trial.. and now seems that kp-1461 can not work in vitro too.. The koronispharma managers have to pay for this.. A LOT OF MONEY.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2008 - 8:56 AM
  3. how can I download a video protocol in my flash disc?  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 20, 2008 - 4:36 PM
  4. Dear Anonymous, please feel free to contact us at support@jove.com and we could discuss your problem.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2008 - 6:34 PM
  5. How can I get in touch with doctor Joachim Hauber? I am HIV positive, there isn´t a single day ever since I was diagnosed this disease that I don´t feel like my life just ended. I would do anything to get cured.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 20, 2008 - 1:37 PM
  6. Reply
    Posted by: Anonymous
    November 3, 2008 - 8:41 AM
  7. Interesting presentation on remarkable research. Worthy of further discussion

    Reply
    Posted by: Anonymous
    February 23, 2009 - 1:48 PM
  8. Have you sequenced the host cell genome in the wild type control vs. the HIV-1 infected vs Tre recombinase cells to
    definitively show where the HIV-1 genome is inserting, and that it is removed?

    Reply
    Posted by: Douglas C.
    October 21, 2009 - 9:41 AM
  9. why can't i get an update on this work?? i have looked everywhere. it has gotten so little publicity..i dont get it

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2010 - 1:04 AM
  10. hi
    i need full text this article
    plz
    tanx

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2010 - 4:23 PM

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