JoVE General
Adam M. McCoy, Michelle L. Collins, Luis A. Ugozzoli
Gene Expression Division, Bio-Rad Laboratories, Inc.
Cette procédure montre comment utiliser le système d'électroporation Gene Pulser MXcell rapidement et facilement d'identifier les meilleures conditions d'électroporation pour les fibroblastes embryonnaires de souris (MEF) ou d'autres cellules primaires. Considérations pour le dépannage sont également abordés dans la vidéo associée.
JoVE General
Adam M. McCoy, Claudia Litterst, Michelle L. Collins, Luis A. Ugozzoli
Gene Expression Division, Bio-Rad Laboratories
Cette procédure décrit un workflow rapide et facile à introduire dans les siARN difficiles à transfecter des lignées cellulaires et de suivre l'expression génique par PCR en temps réel. L'utilisation d'un compteur de cellules automatisé, plaque électroporation multi-puits et la station d'électrophorèse automatisé de fournir des résultats rapides et fiables, sans la nécessité pour la manipulation robotisée cher.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Sep, 2010 | Pubmed ID: 20736348
Avec des parasites du paludisme (Plasmodium spp.), Toxoplasma et nombreuses autres espèces d'importance médicale et vétérinaire ses représentants emblématiques, protistes phylum Apicomplexa a longtemps été défini car un groupe composé uniquement de pathogènes et de parasites. Nous présentons ici un rapport d'un APICOMPLEXES bénéfiques : l'endosymbiote marine mutualiste Nephromyces. Pour plus d'un siècle, les particularités structurales et du développement de Nephromyces et son habitat inhabituel, ont déjoué characterization of les affinités phylogénétiques de ce microbe eucaryote. À l'aide de court-sous-unité ribosomiques (SSU ADNr) séquences comme principaux éléments de preuve, avec une identité de séquence confirmée par hybridation in situ fluorescence (FISH), nous montrons que Nephromyces, initialement classé comme un champignon chytride, est en fait un permis. Inférences de l'ADNr données sont étayées par plusieurs caractéristiques structurales APICOMPLEXES-comme dans Nephromyces, y compris en particulier la forte ressemblance des stades infectieux Nephromyces à APICOMPLEXES sporozoïtes. L'émergence frappante de la Nephromyces mutualistes d'un clade essentiellement parasitaire accentue la promesse de cet organisme et la symbiose de trois partenaires dont il fait partie, comme un modèle pour sonder les facteurs qui sous-tendent l'évolution du mutualisme, pathogénicité et maladies infectieuses.