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Articles by Alyssa Wiener in JoVE

 JoVE General

ToxRアッセイによって決定される膜貫通ドメインのオリゴマー化の傾向


JoVE 2721 5/26/2011

Department of Chemistry and Biochemistry, University of Colorado at Boulder

一回膜貫通ドメイン(TMDS)のオリゴマー化の傾向を評価するための効率的な手順が説明されています。 ToxRに融合されたTMDからなるキメラタンパク質は、大腸菌のレポーター株に発現されています。 TMD誘発性オリゴマーはToxR、転写およびレポータータンパク質の生産、-ガラクトシダーゼの活性化の二量体化を引き起こす。

Other articles by Alyssa Wiener on PubMed

マルチToxの:マルチパスタンパク質の膜貫通ドメインのオリゴマー化の研究にToxR転写レポーターアッセイへの応用

ToxRベースの転写レポーターアッセイは、生体膜の膜貫通ヘリックス間相互作用の強度を測定することができます。以前は、これらのアッセイは、1回膜貫通型システムを研究するために使用されています。多面体の膜貫通ドメイン(TMD)オリゴマーの調査を容易にするために、我々は "マルチToxの"与えるために、マルチパスTMDオリゴマー化の研究にToxR手法を適用した。ウイルス腫瘍性タンパク質の結合性向、潜在的な膜タンパク質-1(LMP-1)、大腸菌膜積分ジアシルグリセロールキナーゼ(DAGK)は、特定の機序に重要な残基を強調し、マルチToxのことで検討した。ホモ - およびヘテロoligomerizations両方を検討した。

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