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Articles by Austin L. Brown in JoVE
JoVE General
膜片吸液管和夏普电极与一个可编程的拖轮
1Department of Molecular and Cellular Physiology, Stanford University, 2Department of Molecular and Cellular Physiology, Stanford University School of Medicine
该视频演示了如何使用一个可编程的车夫电补丁的移液器和锋利的电极。可以使用同样的程序，作出各种玻璃工具，包括注射针头。
Other articles by Austin L. Brown on PubMed
MEC 4 DEG/因感官力学传递通道增益的函数突变改变浇注和药物封锁。
MEC 4 和 MEC 10 是亚成孔基复杂的感官力学传递进行调停触摸感觉中杆线虫 （哈根，R.，M.Chalfie 和 m.b.曾嘉民。2005.Neurosci nat。。8:43-50).他们是离子通道蛋白，统称为 DEG/ENaCs，在上皮细胞和神经元中表达的一个大家庭的成员。非洲爪蟾卵母细胞，MEC 4 可以装配到 homomeric 渠道和进缝隙渠道 (古德曼、 比利时导报、 G.G.Ernstrom、 D.S.Chelur、 R.哈根、 C.A.姚和 M.Chalfie 与 MEC-10 coassemble。2002.性质。415:1039-1042年).要深入指导浇注的结构与功能原则和药物阻滞，我们分析了增益的函数使用的两个电极电压钳、 单通道录音和外面出 macropatches 组合的突变的影响。我们发现突变 A713，d 或变性的位置、 残留量较大的比半胱氨酸增加宏观电流、 开放概率和开放时间 homomeric 渠道，暗示那笨重的残留在此位置稳定开放的国家。野生型 MEC 10 部分抑制对宏观电流，这种突变的影响表明亚基-亚基的相互作用调节开放概率。其他支持这一想法来自宏观电流单突变和双突变体缝隙渠道所进行的分析。我们亦研究利尿药阿米洛利封锁和两个相关的化合物。我们发现 A713 苏氨酸、 甘氨酸、 或天冬氨酸突变下降为阿米洛利 homomeric 频道的亲和。与开放概率的增加，不同的是这种效果被无关大小的氨基酸侧链，该值指示在此站点上的突变改变拮抗剂具有约束力的一个独立的机制。最后，我们提出阿米洛利该块是扩散 DEG/因渠道，在有限的证据表明阿米洛利亲和的变化导致从绑定能源而不是辅助功能的变化。我们得出结论 d 的职位是通道中一个关键区域的一部分，功能上和结构上，可能代表孔域的开始。
MEC 2 和力学秀丽隐杆线虫感官传递复杂 MEC-6： 启用通道活动的辅助亚基。
离子通道通过同源蛋白质 MEC 4 和 MEC 10 形式形成的感官力学传递通道的秀丽隐杆线虫的核心。虽然产品的其他 mec 基因转导的生物物理学中的关键角色，其中他们贡献属性的机制是信道的未知的。在这里，我们调查的两个辅助通道亚基，MEC-2 （stomatin-像） 作用和 MEC-6 (对氧磷酶样），由 coexpressing 他们一积极 MEC-4/MEC-10 缝隙与渠道在非洲爪蟾卵母细胞。这项工作延伸事先说明 MEC 2 和 MEC 6 协同增加宏观当前的工作。我们使用单通道录音和生化显示这些辅助亚基改变功能，通过增加通道的活动状态的数目而不是大大影响单通道属性或表面表达。我们还使用两个电极电压钳和外面出 macropatch 记录，审查的二价阳离子和蛋白酶，已知监管通道家庭成员的影响。最后，我们通过测量全细胞和单通道电流的 MEC 2 突变体缺乏胆固醇绑定检查胆固醇绑定在 MEC 2 行动机制中的作用。我们建议 MEC 2 和 MEC 6 发挥调节 MEC-4/MEC-10 频道的地方膜环境和这种渠道，被控以武力体内的可用性的重要作用。
