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 JoVE Immunology and Infection

Microscopia intravital del bazo: Análisis cuantitativo de la movilidad del parásito y el flujo sanguíneo


JoVE 3609 1/14/2012

1Department of poverty related diseases, Barcelona Centre for International Health Research, 2Confocal Microscopy Unit, University of Barcelona- Scientific and Technological Centers, 3Institució Catalana de Recerca i Estudis Avançats (ICREA)

Se muestra el método para realizar microscopía intravital del bazo con las buenas prácticas agrarias parásitos de la malaria transgénicos y la cuantificación de la movilidad del parásito y el flujo de sangre dentro de este órgano.

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Plasmodium Falciparum: Vector De Nuevo Con La Actividad Del Promotor Bidireccional De Forma Estable Express De Transgenes

Encuesta Piloto De Etiquetas De Secuencia Expresada (EST) a Partir De Los Estadios Sanguíneos Asexuados De Plasmodium Vivax En Pacientes Humanos

Plasmodium vivax es la malaria de más amplia distribución humano, responsable de 70-80 millones de casos clínicos cada año y las grandes cargas socio-económicas de países como Brasil, donde es la especie más prevalente. Lamentablemente, debido a la imposibilidad de crecimiento continuo de este parásito en el cultivo in vitro, la investigación sobre el P. vivax sigue siendo en gran medida olvidado.

Careciendo De Parásitos De La Malaria EEF1A Tienen Un Periodo Normal S / M Fase Sin Embargo, Crecen Más Lentamente Debido a Una Fase G1 a Más Largo

Eucariótica factor de elongación 1A (eEF1A) juega un papel central en la síntesis de proteínas, el crecimiento celular y la morfología. Parásitos de la malaria tienen dos genes idénticos que codifican eEF1A (eef1aa y eef1ab). Usando pbeef1a-Plasmodium berghei mutantes que carecen de un gen eEF1A, nos demuestran que el nivel de producción eEF1A afecta la proliferación de las etapas de la sangre y la aptitud del parásito. Pbeef1a-parásitos pueden completar el vertebrado y fases de mosquitos del ciclo de vida, pero la fase de crecimiento de las etapas asexuales de sangre se extiende hasta en un 20%. Análisis del ciclo celular por citometría de flujo, así como análisis de la transcripción reveló que la duración de las fases S y M y el número de células hijas producido no fueron afectadas de forma detectable, pero que la fase G1 alargado está. Así, como en ciernes levadura, un umbral de crecimiento debe ser alcanzado por parásitos estadio en sangre Plasmodium para permitir la transición de G1 a S / M fase. Los análisis iniciales indican que los eventos de transcripción asociados con el desarrollo de gametocitos no eran muy retrasados. La comprensión de la síntesis de proteínas y su influencia sobre la proliferación celular puede ser usado para generar crecimiento lento (atenuada) parásitos.

El Camino Metil Eritritol Fosfato Es Funcionalmente Activo En Todas Las Etapas Intraeritrocitario De Plasmodium Falciparum

Dos genes que codifican las enzimas 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato sintasa y reductoisomerase 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato se han identificado recientemente, lo que sugiere que la biosíntesis de isoprenoides en Plasmodium falciparum depende del metil eritritol fosfato (MEP) vía, y fosmidomycin que podría inhibir la actividad de reductoisomerase 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato. El metabolito 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato no sólo es un intermedio de la vía MEP para la biosíntesis de difosfato isopentenil pero también está implicada en la biosíntesis de tiamina (vitamina B1) y piridoxal (vitamina B6) en las plantas y muchos microorganismos. Aquí nos presenta el primer aislamiento y caracterización de la mayoría de los productos intermedios aguas abajo de la vía de diputado al Parlamento Europeo en las tres etapas intraeritrocíticos de P. falciparum. Estos incluyen, 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato, 2-C-metil-D-eritritol-4-fosfato, 4 - (citidina-5-difosfo)-2-C-metil-D-eritritol, 4 - (citidina-5-difosfo)-2-C-metil-D-eritritol-2-fosfato, y 2-C-metil-D-eritritol-2 ,4-cyclodiphosphate. Estos intermedios se purificaron por HPLC y estructuralmente caracterizado mediante análisis bioquímicos y electrospray espectrometría de masas. También hemos investigado el efecto de fosmidomycin en la biosíntesis de cada intermedio de esta vía y la biosíntesis de isoprenoides (dolicoles y ubiquinonas). Por primera vez, por lo tanto, se demuestra que la vía MEP es funcionalmente activa en todas las formas intraeritrocitaria de P. falciparum, y de la biosíntesis de novo de piridoxal en un protozoo se informó. Su ausencia en el huésped humano hace que las dos vías muy atractivo como posibles nuevos objetivos para el desarrollo de medicamentos contra la malaria.

Los Genes Y Variantes Del Bazo En Malaria Por Plasmodium Vivax

En general se acepta que el Plasmodium vivax, la malaria humana más ampliamente distribuido, no cytoadhere en la profundidad capilares de los órganos internos y por lo tanto este parásito de la malaria debe haber evolucionado mecanismo evasión esplénico en adición a la retención. El bazo es un órgano linfoide singularmente adaptado cuya función central es la separación selectiva de las células y otras partículas de la sangre, y los microbios como la malaria. La esplenomegalia es un sello distintivo de la malaria y otras enfermedades no se parece a exacerbar este órgano ya que esta enfermedad hace. Además de esta función depuración selectiva importante sin embargo, el bazo es un órgano eritropoyética que, bajo condiciones de estrés, puede ser responsable de cerca del 40% de la población de glóbulos rojos. Los datos obtenidos en las infecciones experimentales de pacientes humanos con P. vivax mostró que la anemia se asocia con infecciones agudas y crónicas y se ha postulado que la parasitemia continuado podría haber sido suficiente para infectar y destruir la mayoría de los reticulocitos circulantes. Aquí revisamos la base de nuestro conocimiento actual de los genes variantes de P. vivax y la estructura y la función del bazo en el paludismo. Basándose en estos datos, se propone que el P. vivax en concreto se adhieren a células de la barrera en el bazo humana que permite al parásito para escapar del bazo de minas al tiempo que favorece la liberación de merozoitos en un ambiente donde los reticulocitos, la predominante, si no exclusiva, de la célula huésped P. vivax, se almacenan antes de su puesta en circulación para compensar la anemia asociada a la malaria por P. vivax.

Plasmodium Vivax: Las Variantes Alélicas Del Gen MDR1 No Te Asocies Con Resistencia a La Cloroquina, Entre Aislados De Brasil, Papua, Y Monkey Cepas Adaptadas

Se describe aquí la secuencia del gen Plasmodium vivax mdr1 de 10 cepas diferentes que difieren en la sensibilidad cloroquina. La secuencia de aminoácidos deducida de PvMDR1 acciones más del 70% de similitud con otras proteínas MDR malaria y muestra motivos de consenso de un transportador de familia ABC incluyendo dos dominios transmembrana y dos cassettes de unión a ATP. Análisis de similitud y dendrograma reveló que las secuencias pueden ser agrupados de acuerdo a su origen geográfico. Dentro de cada grupo geográfico sin embargo, no se encontró correlación entre la resistencia a la cloroquina y mutaciones específicas.

Minería Del Transcriptoma La Malaria

La malaria sigue siendo en todo el mundo más devastadoras enfermedades parasitarias, y es responsable cada año de más de 500 millones de infecciones y de entre un millón y dos millones de muertes de niños menores de cinco años de edad. Plasmodium falciparum es el parásito de la malaria más común y mortal de los humanos, y una enorme cantidad de datos acerca de que es ahora después de la finalización a disposición del público de la secuencia de su genoma, el transcriptoma completo de sus estadios sanguíneos asexuados y los análisis proteómicos de sus diferentes etapas de vida. De este modo, los nuevos métodos de cálculo son necesarios para analizar estos datos para obtener resultados biológicamente significativos que pueden ser validados experimentalmente y, con suerte, dar lugar a estrategias de control alternativas. En este artículo, se destaca la importancia de nuevos métodos computacionales en la minería del transcriptoma del ciclo de la malaria intraeritrocitario desarrollo de P. falciparum.

Aspectos Clínicos Y Moleculares De La Malaria Grave

El ciclo eritrocítico de Plasmodium falciparum presenta una particularidad en relación con otras especies de Plasmodium que infectan al hombre. Trofozoítos maduros y esquizontes son secuestradas de la circulación periférica debido a la adherencia de los eritrocitos infectados para alojar las células endoteliales. Las modificaciones en la superficie de los eritrocitos infectados, pomos denomina, parece facilitar la adhesión a los eritrocitos endotelio y otros. Adhesión proporciona una mejor maduración de la atmósfera venosa microaerófilos y permite que el parásito para escapar de su aprobación por el bazo, que reconoce la pérdida de eritrocitos de deformabilidad. Adhesión al endotelio, o cytoadherence, tiene un papel importante en la patogenicidad de la enfermedad, causando la oclusión de vasos pequeños y contribuir a la insuficiencia de muchos órganos. Cytoadherence también puede describir la adherencia de los eritrocitos infectados a los eritrocitos no infectados, un fenómeno conocido como rosetas. Aspectos clínicos de la malaria grave, así como de los receptores y ligandos de acogida de parásitos involucrados en cytoadherence y rosetas, aquí se revisan. La proteína de membrana de eritrocitos 1 de P. falciparum (PfEMP1) parece ser el ligando principal de adhesivo de eritrocitos infectados y se discutirá con más detalle. Comprender el papel de los receptores y ligandos de acogida de parásitos en el desarrollo de diferentes síndromes clínicos se necesita urgentemente para identificar los objetivos de vacunación a fin de disminuir las tasas de mortalidad de esta enfermedad.

Proteínas Variantes De Plasmodium Vivax No Están Clonal Expresada En Las Infecciones Naturales

Plasmodium vivax es el parásito más ampliamente distribuida la malaria humana y responsable de 70-80 millones de casos clínicos cada año y una gran carga socio-económica. La secuencia de un extremo del cromosoma de P. vivax reveló la existencia de una superfamilia multigénica, denominado Vir (P. vivax antígenos variantes), que se puede subdividir en diferentes subfamilias basado en el análisis de similitud de secuencias y que representa cerca del 10-20% de las secuencias codificantes del parásito. Aquí nos muestran que hay un vasto repertorio de los genes vir abundantemente expresado en los aislados obtenidos de pacientes humanos, que vir subfamilias diferentes genes se transcriben en mayores estadios sanguíneos asexuados por parásitos individuales, que las proteínas VIR no clonal expresada y que no hay una significativa diferencia en el reconocimiento de VIR-etiquetas por los sueros inmunes de los pacientes infectados por primera comparación con los sueros de pacientes infectados por el múltiple. Estos datos proporcionan a nuestro conocimiento el primer estudio exhaustivo de los genes vir y sus proteínas variantes de codificación en las infecciones naturales y por lo tanto constituyen un punto de referencia para futuros estudios de esta superfamilia multigénica. Por otra parte, mientras que nuestros datos son consistentes con un papel importante de los genes vir en la infección natural, son incompatibles con un papel predominante en el sentido estricto de la variación antigénica.

Un Menor Riesgo De Infección Con Plasmodium Vivax Y La Protección Clínica Contra La Malaria Se Asocia Con Anticuerpos Contra El N Terminal, Pero No El C Terminal De La Proteína De Superficie Merozoite 1

El progreso hacia el desarrollo de una vacuna contra la malaria contra el Plasmodium vivax, el parásito más ampliamente distribuida la malaria humana, se requiere una mejor comprensión de las respuestas inmunes que confieren protección clínica a los pacientes en las regiones donde la malaria es endémica. La aparición de la protección clínica de la malaria por P. vivax en Brasil se registró por primera vez entre los residentes de la comunidad ribereña de Portuchuelo, en Rondônia, en el oeste del Amazonas. Por lo tanto analizar los sueros inmunes de esta misma población humana para determinar si adquirida de forma natural la respuesta inmune humoral contra la proteína de la superficie de merozoito 1 de P. vivax, PvMSP1, podría estar asociada con un menor riesgo de infección y / o la protección clínica. Nuestros resultados demostraron que esta asociación podría establecerse con anti-anticuerpos PvMSP1 predominantemente de la subclase de inmunoglobulina G3 dirigido contra el extremo N terminal, pero no contra el extremo C terminal, a pesar de este último es más inmunogénica y capaz de impulsar natural. Este es el primer informe de un estudio prospectivo de malaria por P. vivax que demuestra una asociación de reducción del riesgo de infección y la protección clínica con anticuerpos contra un antígeno del parásito.

Orígenes De La Diversidad De La Secuencia En La Superficie De Vacuna Contra La Malaria Merozoite Candidato Proteínas-2 (MSP-2) En Aislados De Plasmodium Falciparum Amazónicos

La evolución reciente de Plasmodium falciparum está en desacuerdo con el polimorfismo extensas que se encuentran en la mayoría de los genes que codifican para los antígenos. En este sentido, se examinaron los patrones y mecanismos putativos de la diversificación de la secuencia en la superficie de merozoito proteínas-2 (MSP-2), uno de los principales antígenos de superficie repetitiva malaria. Se compararon las secuencias de genes MSP-2 a partir de clones estrechamente relacionadas con derivados de cepas de parásitos simpátricas de la Amazonia brasileña y se utiliza microsatélite escribiendo a estudiar, en estos mismos clones, el fondo del haplotipo del cromosoma 2, donde MSP-2 se encuentra. Hemos encontrado ejemplos de MSP-2 reordenamientos secuencia putativamente creadas por acontecimientos de recombinación no recíprocos, tales como el deslizamiento de replicación y conversión génica, mientras se mantiene el haplotipo del cromosoma. Llegamos a la conclusión de que estos eventos de recombinación no recíprocas pueden representar una fuente importante de diversidad antigénica en el MSP-2 en las poblaciones de P. falciparum con bajas tasas de recombinación meiótica clásica.

Multi-carácter De Estudio De Población De La Superfamilia Multigene Vir Subtelomérico De Plasmodium Vivax, Un Parásito Mayor Malaria Humana

Plasmodium vivax, el parásito más ampliamente distribuida la malaria humana, contiene la superfamilia multigénica vir subtelomeric que corresponde a cerca del 10% de su genoma que codifica. En este trabajo se utilizó una estrategia de carácter multi-para estudiar el repertorio de genes vir que circula en las poblaciones de parásitos naturales que se obtienen directamente de los 32 pacientes humanos procedentes de regiones endémicas de Brasil y Sri Lanka. El análisis cladístico confirmó la existencia de subfamilias vir, que variaban en tamaño y polimorfismos de los alelos. Por otra parte, diferentes motivos, el dominio de la proteína y estructuras secundarias se prevé para cada subfamilia. De importancia, no todas las secuencias vir poseen un motivo PEXEL reconocible recientemente demostrado ser importante, aunque no esencial, la señal para el transporte a la membrana celular de los glóbulos rojos infectados. Por otra parte, subfamilias A y D, muestran características estructurales comunes con el recientemente descrito SURFIN P. falciparum y PFMC-2TM subtelomeric multigene familias. Estos resultados sugieren que las proteínas VIR puede tener diferentes localizaciones subcelulares y funciones. Este es el primer estudio a nivel poblacional de la superfamilia de P. vivax multigénica vir subtelomeric.

Extensas Variante Del Gen Superposición Repertorio De Familia En La Amazonía Occidental Plasmodium Falciparum Aislados

Con el fin de encontrar una base molecular para el desarrollo de las observaciones de la inmunidad relativamente rápido de las infecciones de malaria en la región occidental del Amazonas, los repertorios parciales var, stevor y RIF de genes de nueve diferentes aislamientos de Plasmodium falciparum en 1985 y 2000-2004 fueron evaluados. En contraste con los resultados previos del sudeste asiático, el repertorio de genes aislados de variante en Brasil es bastante pequeño y redundante. Mientras que los tamaños de cada var repertorio de las cepas brasileñas no difieren de los del sudeste de Asia aislados / África, hemos encontrado una coincidencia más de tres veces más altos de los repertorios de secuencias var en las cepas de la Amazonía que se conservan también en el tiempo, lo que sugiere la circulación continua de un gen var similares repertorio. Coincidentemente, casi el 40% de las secuencias identificadas en este documento que mostraron el mayor grado de similitud de los genes var a partir de aislados ya sea en Brasil o Venezuela, lo que indica un repertorio limitado var de P. falciparum en la cuenca del Amazonas como un todo. Las similitudes de los genes var intrastrain fueron ligeramente, pero significativamente menor que en el Sudeste de Asia / África muestras que sugieren una mayor presión selectiva para la diversificación en los aislados del Amazonas. A pesar del número de copias superior al del genoma, los genes RIF también mostraron una superposición significativa repertorio. stevor genes, que comparten la misma localización predominante subtelomeric como var y los genes rif, mostraron una coincidencia repertorio aún más altos y son muy similares a los genes stevor 3D7, lo que indica mayor conservación funcional de los genes var y RIF. Este es el primer estudio que revela que el P. falciparum repertorios de genes variantes de ciertas áreas pueden ser limitados. Esto tiene implicaciones importantes para la inmunidad contra la cepa específica de antígenos variantes que ocurren en estas áreas.

Expresión Y Función De Pvcrt-o, Un Plasmodium Vivax Ortholog De Pfcrt, En El Plasmodium Falciparum Y Dictyostelium Discoideum

Resistencia a la cloroquina en Plasmodium vivax amenaza del uso de este fármaco como tratamiento de primera línea para millones de personas infectadas cada año en todo el mundo. A diferencia de Plasmodium falciparum, en el que se asocia resistencia a la cloroquina con mutaciones en el gen pfcrt que codifica una proteína de transmembrana vacuola digestivo, no hay mutaciones puntuales se han asociado con resistencia a la cloroquina en el P. vivax ortholog gen, pvcrt-O (también llamado pvcg10). Sin embargo, la pregunta sigue siendo si pvcrt-o puede afectar la respuesta de la cloroquina independiente de las mutaciones. Desde que el P. vivax no se pueden cultivar in vitro, se utilizaron dos sistemas de expresión heterólogos para abordar esta cuestión. Los resultados del primer sistema, en el que la cloroquina sensibles parásitos P. falciparum se transformaron con pvcrt-o, mostraron un aumento de 2,2 veces en la tolerancia a la cloroquina con pvcrt-o expresión bajo un promotor fuerte, este efecto fue revertido por el verapamilo. En el segundo sistema, de tipo salvaje pvcrt-O o una forma mutada del gen se expresa en Dictyostelium discoideum. Formas de PvCRT-o ingeniería genética para expresar ya sea lisina o treonina en la posición 76 produce una reducción de verapamilo-reversible de acumulación de cloroquina en este sistema a aproximadamente 60% de que en las células control. Nuestros datos apoyan un efecto de PvCRT-o en el transporte de la cloroquina y / o acumulación por P. vivax, independiente de la sustitución de un aminoácido K76T.

Evaluación De Las Respuestas De Inmunodeficiencia Adquirida Al Plasmodium Vivax VIR Antígenos Variantes En Personas Que Viven En áreas Endémicas De Malaria En Brasil

La respuesta natural inmune adquirida a los antígenos del Plasmodium vivax variantes (VIR) se evaluó en los individuos expuestos a la malaria y la vida en diferentes zonas endémicas de malaria en el norte de Brasil.

Regiones Promotoras De Plasmodium Vivax Están Mal O No Reconocidos Por El Plasmodium Falciparum

Análisis de promotor heterólogo en Plasmodium ha puesto de manifiesto la existencia de elementos cis conservados reguladores como promotores de diferentes especies puede conducir la expresión de genes reporteros en ensayos de transfección heteróloga. En este caso, la caracterización funcional de los diferentes Plasmodium vivax en los promotores de Plasmodium falciparum utilizando luciferasa como gen reportero se presenta.

Métodos Computacionales En ARN No Codificador De Investigación

No codifican proteínas-ARN (ncRNAs) son un punto de investigación en bioinformática. Los descubrimientos recientes han puesto de manifiesto nuevas familias ncRNA realizar una variedad de papeles, desde la regulación de la expresión génica a las actividades catalíticas. También se cree que otras familias todavía no se han desvelado. Los métodos computacionales desarrollados para los genes codificantes de proteínas a menudo fracasan en la búsqueda de ncRNAs. No codificante funcionalidad de ARN es a menudo depende en gran medida su estructura secundaria, lo que hace el descubrimiento de genes muy diferentes de genes que codifican proteínas de ARN. Esto motivó el desarrollo de métodos específicos para ncRNA investigación. Este artículo revisa los principales enfoques utilizados para identificar y predecir ncRNAs estructura secundaria.

Genómica Comparativa De Los Desamparados Parásito Del Paludismo Humano Plasmodium Vivax

El parásito del paludismo humano Plasmodium vivax es responsable de un 25-40% de los aproximadamente 515 millones de casos anuales de malaria en todo el mundo. Aunque rara vez es mortal, el parásito provoca síntomas clínicos severos e incapacitantes y con frecuencia causa mes recaídas después de una infección primaria haya desaparecido. A pesar de su importancia como patógeno humano importante, el P. vivax es poco estudiado debido a que no se puede propagar de forma continua en el laboratorio, excepto en los primates no humanos. Hemos secuenciado el genoma de P. vivax a arrojar luz sobre sus características biológicas distintivas, y como un medio para impulsar el desarrollo de nuevos fármacos y vacunas. Aquí se describe la synteny y la estructura de los cromosomas isochore de P. vivax, y muestran que el parásito se asemeja a otros parásitos de la malaria en el contenido de genes y el potencial metabólico, pero posee nuevas familias de genes y la invasión de los posibles caminos de alternativa no reconocida con anterioridad. Finalización del genoma de P. vivax ofrece a la comunidad científica con un valioso recurso que puede ser utilizado para avanzar en investigación sobre esta especie olvidadas.

Plasmodium Vivax Y La Importancia De La Superfamilia Multigene Vir Subtelomérico

Plasmodium vivax es responsable de más de 100 millones de casos anuales clínicos. A diferencia de P. falciparum, en la que los glóbulos rojos infectados cytoadhere a través de proteínas variantes, evitando el paso por el bazo, el P. vivax-infectados reticulocitos no parecen cytoadhere. Sin embargo, una variante subtelomérica multigénica vir familia se ha identificado en P. vivax. Por lo tanto, sigue habiendo dudas acerca de cómo el P. vivax circula a través del bazo y el papel de las proteínas Vir. En esta revisión, la importancia de la superfamilia multigénica vir es revisado a la luz de la finalización de la secuencia del genoma de P. vivax y de los datos obtenidos de infecciones experimentales en reticulocitos propensas a parásitos de la malaria no letales y las infecciones naturales por P. vivax .

El Aumento De Los Niveles De Expresión De La Pvcrt-o Y Pvmdr1 Genes En Un Paciente Con Una Grave Malaria Por Plasmodium Vivax

Hay cada vez más informes de casos clínicos graves exclusivamente asociados con las infecciones por Plasmodium vivax. En particular, esta gravedad se ha sugerido recientemente que se asocia con resistencia a la cloroquina.

El Análisis De Polimorfismos De Nucleótido único En El CRT-o Y MDR1 Los Genes De Plasmodium Vivax Resistentes a Cloroquina Entre Los Aislados De La Amazonia Brasileña

Los parásitos Plasmodium vivax, con resistencia a la cloroquina (CQR) ya están circulando en la Amazonia brasileña. Completo de un solo polimorfismos de nucleótido (SNP) el análisis de la codificación y secuencias no codificantes de los genes y pvmdr1 pvcrt o-no revelaron asociaciones con CQR, aunque algunas mutaciones no habían sido seleccionados al azar. Además, las diferencias notables en las topologías y el número de SNPs en estos genes transportadores entre P. vivax y P. falciparum reforzar la idea de que otros mecanismos que las mutaciones pueden explicar este fenotipo virulento en P. vivax.

Lagunas Clave En El Conocimiento De Plasmodium Vivax, Un Parásito Olvidadas La Malaria Humana

Plasmodium vivax es geográficamente la causa de más amplia distribución de la malaria en las personas, con un máximo de 2,5 millones de personas en situación de riesgo y un estimado de 80 millones a 300 millones de casos clínicos cada año - incluyendo la enfermedad grave y muerte. A pesar de esta gran carga de enfermedad, P. vivax se pasa por alto y se deja en la sombra de la enorme problema causado por Plasmodium falciparum en el África subsahariana. Los avances tecnológicos que permiten la secuenciación del genoma de P. vivax y un reciente llamamiento a la erradicación de la malaria en todo el mundo juntos han vuelto a hacer hincapié en la importancia de hacer frente a P. vivax como un problema de salud pública. Sin embargo, a causa de la biología de este parásito, es especialmente difícil de interrumpir la transmisión de P. vivax, y los expertos de acuerdo en que los métodos disponibles para la prevención y el tratamiento de infecciones con P. vivax son inadecuados. Por tanto, es imperativo que el desarrollo de nuevos métodos y estrategias a ser una prioridad. Avanzar en el desarrollo de estos métodos tiene un renovado énfasis en la comprensión de la biología, la patogénesis y la epidemiología de P. vivax. Esta revisión examina críticamente lo que se conoce acerca de P vivax, centrándose en la identificación de las lagunas fundamentales que crean obstáculos a la eliminación de este parásito en las poblaciones humanas.

Naturalmente, Adquirida En La Respuesta Inmune Humoral Contra La N-y C-terminal De La Proteína De Plasmodium Vivax MSP1 En Regiones Endémicas De Brasil Y Papua Nueva Guinea El Uso De Un Ensayo Múltiple

El progreso hacia el desarrollo de una vacuna contra la malaria contra el Plasmodium vivax, el parásito más ampliamente distribuida la malaria humana, se requiere una mejor comprensión de las respuestas inmunes que confieren protección clínica a los pacientes en las regiones donde la malaria es endémica.

En El Cytoadhesion De Plasmodium Vivax Eritrocitos Infectados

Plasmodium falciparum y Plasmodium vivax es responsable de la mayor parte de la carga mundial de paludismo. Aunque la patogenicidad acentuada de P. falciparum se produce debido a secuestro de las formas maduras eritrocíticas en la microvasculatura, este fenómeno todavía no se ha observado en P. vivax. El creciente número de manifestaciones severas de infecciones por P. vivax, similares a los observados para la malaria severa por Plasmodium falciparum, sugiere que los mecanismos patogénicos clave (por ejemplo, cytoadherence) podría ser compartido por los 2 parásitos.

Comparación De Los Métodos De Diagnóstico Para La Detección Y Cuantificación De Las Cuatro Especies Simpátricas De Plasmodium En Muestras De Campo De Papúa Nueva Guinea

El diagnóstico preciso de las infecciones por Plasmodium es esencial para la morbilidad por malaria y la reducción de la mortalidad en las zonas tropicales. A pesar de las grandes ventajas de la microscopía de luz (ML) para el diagnóstico de la malaria, su limitada sensibilidad es un déficit fundamental para los estudios epidemiológicos. Sólidas herramientas de diagnóstico molecular tanto, son necesarias.

Plasmodium Vivax: Comparación De La Inmunogenicidad Entre Las Proteínas Expresadas En Los Sistemas Libres De Células De E. Coli Y Germen De Trigo Por Ensayos De Matriz De Suspensión

En in vitro sistemas libres de células para la expresión de proteínas con los extractos de las procariotas (Escherichia coli) o eucariotas (germen de trigo) células acoplados a matrices sólidas han ofrecido un enfoque válido para el descubrimiento de antígeno en investigación de la malaria. Sin embargo, ningún análisis comparativo de ambos sistemas es actualmente disponible ni el uso de las tecnologías de la matriz de suspensión, que ofrecen casi cinética fase de solución.

Los Exosomas De Plasmodium Yoelii Infectados Reticulocitos Proteger a Los Ratones De Infecciones Letales

Los exosomas son 30 a 100 nm de vesículas de membrana de origen endocítica que se liberan después de la fusión de los cuerpos multivesiculares (MVBs) con la membrana plasmática. Si bien los estudios iniciales sugirieron que el papel de exosomas se limitó a la eliminación de las proteínas durante la maduración de reticulocitos a los eritrocitos, estudios recientes indican que son producidos por diferentes tipos de células y participan en la promoción de la comunicación intercelular y la presentación de antígenos. Aquí, se describe el aislamiento y caracterización de exosomas de sangre periférica de ratones BALB / c infectados con el reticulocitos propenso a no letal cepa Plasmodium yoelii 17X. Es importante destacar que el análisis proteómico reveló la presencia de proteínas del parásito en estas vesículas. Además, la inmunización de ratones con exosomas purificados suscitó anticuerpos IgG capaces de reconocer P. yoelii infectado células de sangre rojas. Por otra parte, el desafío letal de los ratones inmunizados con el normocyte propenso letal cepa P. yoelii 17XL causó una atenuación significativa en el curso de la parasitemia, el aumento de tiempo de supervivencia, y alteró el tropismo celular de reticulocitos. Estos resultados se obtuvieron también cuando los exosomas se aisló de un cultivo de P. yoelii infectados reticulocitos indica que reticulocitos exosomas derivados de llevar a los antígenos y están involucrados en la modulación inmune. Por otra parte, la inclusión de CpG ODN 1826, en las vacunas exosoma provocó anticuerpos IgG2a y IgG2b y promover la supervivencia, la eliminación de parásitos y posterior protección estéril de 83% de los animales inoculados con P. yoelli 17XL. Hasta donde sabemos, este es el primer informe de la respuesta inmune inducida por exosomas derivados de reticulocitos abriendo nuevos caminos para la modulación de las respuestas contra la malaria.

El Papel Del Bazo En La Malaria

El bazo es un órgano complejo que se adapta perfectamente a filtrar de forma selectiva y la destrucción de los glóbulos rojos senescentes (glóbulos rojos), los microorganismos infecciosos y glóbulos rojos parasitados por Plasmodium. La infección por malaria es la causa más común de rotura esplénica y esplenomegalia, aunque variable, un hito de la infección por malaria. Aquí, el papel del bazo en el paludismo es revisado con especial énfasis en las lecciones aprendidas de las infecciones en humanos y modelos de ratón.

Remodelación De La Cepa Específica Del Bazo En Las Infecciones Por Plasmodium Yoelii En Ratones Balb / C Facilita La Adherencia Y El Escape De Los Macrófagos Del Bazo De Minas

El conocimiento de las características dinámicas de los procesos impulsados ​​por los parásitos del paludismo en el bazo es insuficiente. Para conocer la función y estructura del bazo en el paludismo, hemos implementado microscopía intravital y la resonancia magnética del bazo de ratón en las infecciones experimentales con no letal (17X) y letales (17XL) cepas de Plasmodium yoelii. Notablemente, se produjo una mayor acumulación parásito, la motilidad reducida, la pérdida de direccionalidad, aumentado el tiempo de residencia y de resonancia magnética alterada sólo en los bazos de los ratones infectados con 17X. Por otra parte, estas diferencias se asociaron con la formación de una cepa específica de la barrera inducida tejido esplénico de origen fibroblástico, con pulpa roja macrófagos de remoción de la evasión y con la adhesión de los glóbulos rojos infectados con esta barrera. Nuestros datos sugieren que en este reticulocitos propenso a no letal modelo de malaria en roedores, el paso por el bazo es diferente de lo que se conoce en otras especies de Plasmodium y abrir nuevos caminos para estudios funcionales / estructurales de este órgano linfoide de la malaria.

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