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- Journal of Huazhong University of Science and Technology. Medical Sciences = Hua Zhong Ke Ji Da Xue Xue Bao. Yi Xue Ying De Wen Ban = Huazhong Keji Daxue Xuebao. Yixue Yingdewen Ban
- Journal of Applied Physiology (Bethesda, Md. : 1985)
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- Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950)
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- Wound Repair and Regeneration : Official Publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society
- Archives of Surgery (Chicago, Ill. : 1960)
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- Wound Repair and Regeneration : Official Publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society
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- Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950)
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Articles by Lixin Liu in JoVE
JoVE Immunology and Infection
Seguimiento de Rastreo de neutrófilos intraluminal, la migración transendotelial y la quimiotaxis de los tejidos por microscopía de vídeo intravital
Department of Pharmacology, University of Saskatchewan
Se describe un protocolo de la microscopía de campo claro intravital para medir la dinámica de los neutrófilos interacciones célula endotelial durante el reclutamiento de neutrófilos en respuesta a la fuente de un quimioatrayente de neutrófilos en vivo. Rastreo de neutrófilos intraluminal, la migración y la quimiotaxis transendotelial en tejido de ratón músculo cremáster se visualizan con la fotografía de vídeo de tiempo transcurrido y el seguimiento con ImageJ.
Other articles by Lixin Liu on PubMed
Efecto Regulador De Bcl-2 Proteínas De La Familia En El CEC Inducido Por Apoptosis De Los Cardiomiocitos En Corazones De Perro
Ya sea que la CEC convencional con hipotermia induce la apoptosis de los miocitos en el corazón del perro y la modulación de Bcl-2, Bcl-XL, bax, malo, y la caspasa-3 vías en este contexto se investigó. Diez perros adultos sanos fueron divididos aleatoriamente en los grupos de la farsa que funciona y CPB. Las muestras de ventrículo izquierdo se obtuvieron antes, durante y 3 horas después de la CEC. En TUNEL in situ para la detección de los miocitos apoptóticos. La inmunohistoquímica y citometría de flujo se emplea para la detección de expresiones de Bcl-2, Bcl-XL, Bax y proteínas malas. Z-DEVD-AMC escisión del sustrato y los métodos de TBARS se utilizaron para medir la actividad de la caspasa-3 y el contenido de peróxido de lípido en LV miocardio, respectivamente. Después de la CEC, el número de miocitos apoptóticos en la CEC grupo se incrementó de manera significativa. Los resultados de inmunohistoquímica demostró que la Bcl-2, Bcl-XL, Bax y proteínas malos eran constitucionalmente presentes en el sarcolema de los miocitos LV. FACS resultados mostraron que, después de la CEC, las expresiones de bax y lo malo en la CEC grupo fueron significativamente upregulated, mientras que las expresiones de Bcl-2 y Bcl-XL no se modificaron significativamente en ambos grupos. La actividad de la caspasa-3 y el contenido de peróxido de los lípidos en la LV miocardio en el grupo de la CEC también se aumentó significativamente después de la CEC. El presente estudio muestra que existe en el corazón de la apoptosis de los miocardiocitos perros sometidos a la CEC convencional con hipotermia y la apoptosis de los miocitos se inicia por la isquemia y realizó durante la reperfusión. Por otra parte, la apoptosis inducida por los miocitos CEC se asoció con una regulación al alza de las expresiones de las proteínas Bax y malos, la activación de la caspasa-3 y el aumento del estrés oxidativo.
El Trasplante De Células Madre Embrionarias Mejora La Función Cardíaca En Ratas Postinfarcted
La pérdida masiva de los miocitos cardíacos después de un infarto de miocardio (IM) es una causa común de insuficiencia cardíaca. El presente estudio fue diseñado para investigar la mejora de la función cardíaca en ratas MI después de un trasplante con células madre embrionarias (ES). Infarto de miocardio en ratas fue inducida por la ligadura de la arteria descendente anterior coronaria. Las células cultivadas ES utilizados para el trasplante de células fueron transfectadas con la proteína marcadora fluorescente verde (GFP). Animales en el grupo tratado recibió la inyección intramiocárdica de células madre embrionarias en el miocardio lesionado. En comparación con el grupo de control MI inyectado con un volumen equivalente de medio libre de células, la función cardíaca en células ES MI-implantado animales mejoró significativamente las 6 semanas después del trasplante de células. El fenotipo característico de células madre embrionarias arraigado fue identificado en el miocardio implantado por la fuerte tinción positiva para alfa-actina sarcomérica, cardiaca alfa-cadena pesada de miosina y troponina I. buenas prácticas agrarias de células positivas en seccionada del corazón de MI miocardio confirmado la supervivencia y la diferenciación de los implantada células. Además, las células individuales aisladas de células trasplantadas corazones MI mostró en forma de varilla positivas GFP-miocitos con estrías típicas. Los datos actuales demuestran que el trasplante de células ES es un enfoque viable y novedosa para mejorar la función ventricular en corazones infartados en quiebra.
Mecanismos Moleculares De Reclutamiento De Leucocitos: Órganos Específicos De Mecanismos De Acción
El reclutamiento de leucocitos en la microcirculación es un proceso crítico que subyace a la respuesta inflamatoria en los tejidos. El mecanismo de contratación se resume en la aceptación general de paradigma: selectina mediada por leucocitos de rodadura, después de la activación de la integrina, seguido por la firme adherencia mediada por la integrina. Este paradigma simple no puede ser capaz de explicar los mecanismos de reclutamiento de leucocitos en algunos órganos como el hígado y el cerebro. Estudios recientes sugieren que estos órganos tienen sus propios paradigmas de reclutamiento de leucocitos en la inflamación aguda y crónica, incluso. La combinación de patrones únicos hemodinámicos y específicas características estructurales y funcionales de los vasos y el endotelio en el hígado puede dictar y seleccionar los patrones específicos de reclutamiento de leucocitos en este órgano. En la microvasculatura cerebro, donde son tijeras de alta y baja molécula de adhesión de expresión, las plaquetas pueden desempeñar un papel importante como un puente entre los leucocitos y el endotelio.
Cebado De La Migración De Eosinófilos Través De Monocapas De Células Epiteliales De Pulmón Y La Sobrerregulación De CD11b/CD18 Son Provocados Por El Ca2 +
En los pacientes con asma, los eosinófilos están preparados y masivamente infiltrarse en los tejidos pulmonares y migrar a través de epitelios en las vías respiratorias. Usando anticuerpos monoclonales bloqueadores, se encontró que la transmigración de eosinófilos a través de una monocapa de células epiteliales de pulmón depende de las funciones de la integrina alphaMbeta2 CD11b/CD18. Para estudiar el papel del Ca2 + en el cebado de eosinófilos y la migración transepitelial, se trataron los eosinófilos con eotaxina o thapsigargin (TG), frente al citoplasma de los reactivos que aumentan las concentraciones libres de Ca2 + por los mecanismos de los receptores-o nonreceptor mediada-, respectivamente. El tratamiento previo de los eosinófilos con TG transmigración mayor CD11b/CD18-dependent a través del epitelio pulmonar. En cuestión de minutos, TG tiempo y dosis-dependiente upregulated la expresión de CD11b/CD18 pero no aumentaba la expresión de antiproteasa (CD11a) o beta 1 (CD29) de la integrina. La regulación al alza de CD11b/CD18 expresión de eotaxina o TG se le impidió la entrada de Ca2 +, cuando se bloqueó. El cebado de la transmigración de eosinófilos por TG fue suprimida también por el bloqueo de la entrada de Ca2 +. Nuestros resultados indican que la inducción de la entrada de Ca2 + por el agotamiento de Ca2 + desde los depósitos intracelulares upregulates CD11b/CD18 expresión en los eosinófilos y los primos de transmigración de eosinófilos en el epitelio pulmonar. Ambas respuestas son por lo tanto, provocada por Ca2 + extracelular. Le sugerimos que, como una señal importante para el cebado de las respuestas de eosinófilos humanos funcionales, la tienda que funciona con entrada de Ca2 + puede ser uno de los mecanismos subyacentes de la inflamación eosinofílica en el asma.
Carvedilol Atenúa La Apoptosis Inducida Por La CEC En El Corazón De Perro: Regulationof Fas / FasL Y La Caspasa-3 Camino
Para evaluar los efectos de carvedilol en la circulación extracorpórea (CEC)-la apoptosis inducida por los miocardiocitos y sus efectos en la regulación de Fas, la expresión de FasL, la actividad de la caspasa-3 y el estrés oxidativo en el ventrículo izquierdo (VI) en este contexto.
Las Hormonas Tiroideas Interactuar Con Glucocorticoides a Afectar a La Abundancia Somatotropos En Embriones De Pollo in Vitro En Células De La Hipófisis
Nuestro laboratorio ha informado de que la diferenciación de somatotrofina produce entre los días 14 y 16 d de desarrollo de embriones de pollo y que la corticosterona (CORT) puede inducir la diferenciación de somatotrofina en una edad más temprana in vitro e in vivo. El objetivo del presente estudio fue la prueba de la tiroides CORT hormonas interacciones sobre la diferenciación de somatotrofina in vitro. Células de la hipófisis a partir de embriones de pollo d 11 fueron tratados con hormonas de Cort y la tiroides, y productores de GH somatotrofos fueron detectados por la inversa ensayos de placa hemolítica y la inmunocitoquímica. Hemos encontrado que las hormonas tiroideas puede actuar sinérgicamente con CORT para aumentar aún más la abundancia de somatotropas in vitro, pero tienen poco o ningún efecto por sí mismos. Tanto T (4) y T (3) puede actuar sinérgicamente con CORT para aumentar la abundancia somatotrofina, pero los efectos de la T (3) fueron las acciones bifásicas, Cort inhibidores en concentraciones más altas. El inhibidor monodeyodinación iopanoico ácido inhibe el efecto sinérgico de T (4) en la inducción de las células GH CORT in vitro, pero no el efecto sinérgico de CORT y T (3) o el efecto de CORT solo. Por otra parte, T (3) el tratamiento superó el iopanoico ácido inducido por la reducción en la T (4)-CORT efecto. Nuestros hallazgos indican que las hormonas tiroideas actúan de forma sinérgica con Cort para aumentar aún más la abundancia de somatotropas in vitro y que la conversión de T (4) a T (3) en la glándula pituitaria está involucrado en T (4) modulación de la abundancia de somatotrofina. Diferenciación de somatotrofina durante el desarrollo normal puede ser regulado por complejas interacciones entre las hormonas producidas por la tiroides y las glándulas suprarrenales embrionaria.
[Construcción De Caspasas-3 Recombinante De Genes Y La Prueba De Su Actividad Apoptótica En La Cepa De Células De Carcinoma De Páncreas]
Para explorar el método nuevo gen terapéutico para el carcinoma de páncreas, las caspasas-3 recombinante de genes (R-caspasas-3) se construyó por el método de la biología molecular. El plásmido de expresión eucariota pcDNA 3,1 (+) / R-caspasa 3-fue construido por reordenación de la subunidad grande y pequeña subunidad de caspasas-3 y, a continuación se transfectaron en células carcinoma pancreático cepa (PC-II). Después de ser transfectadas, la expresión de r-caspasa-3 mRNA en células de carcinoma de páncreas fue detectado por RT-PCR y su actividad de apoptosis se detectó por la FCM. La secuenciación de las moléculas recombinantes (r-caspasas-3) confirmó que su subunidad pequeña precedió a su subunidad mayor. Después de que las células de carcinoma de páncreas se transfectaron con la pcDNA3.1 (+) / R-3-caspasas por liposomas, una correa de 894 pb se observó por medio de RT-PCR. No se encontró en la correa de los grupos de control. Un pico hipodiploide cariotipo transparente, fue revelado por la FCM. Los datos anteriores indican que el gen de la r-caspasa-3 se ha construido con éxito, la r-caspasa-3 tiene actividad apoptótica y se puede utilizar como gen diana en terapia génica para el carcinoma de páncreas.
A Down-regulable E-selectina Ligando Es Funcionalmente Importante Para PSGL-1-independientes Leucocitos Del Endotelio Interacciones Celulares
P-selectina glucoproteína-1 (PSGL-1) es compatible con la P-selectina dependiente de rodadura in vivo e in vitro. Sin embargo, existe controversia sobre la importancia de PSGL-1-dependientes e independientes de E-selectina de rodadura. El uso de anticuerpos contra el PSGL-1 y PSGL 1-(- / -) ratones, hemos demostrado la abolición de la P-selectina dependiente de rodadura, pero sólo la inhibición parcial de la E-selectina mediada por rodadura en la microcirculación cremáster después de la administración local de factor de necrosis tumoral (TNF-alfa). Los estudios in vitro demostraron que la unión de ratón recombinante E-selectina quimera PSGL-1 (- / -) los neutrófilos se redujo dramáticamente en los ratones tratados sistémicamente, pero localmente no con el TNF-alfa. Además, PSGL-1 bloqueo abolió la E-selectina dependiente de la laminación en ratones de tipo salvaje tras sistémica de TNF-alfa, pero la administración de la administración de TNF-alfa no es local. En conjunto, estos datos apoyan la presencia de un ligando E-selectina en PSGL-1 (- / -) los neutrófilos que es regulable hacia abajo a la activación del sistema, pero no locales. Para determinar si el PSGL-1-independiente de la E-selectina ligando era fisiológicamente importante, se utilizó una P-y E-selectina dependiente del modelo de hipersensibilidad cutánea de contacto. Los estudios de unión no mostró ligando E-selectina regulación a la baja en este modelo. Las pocas células que rodaban sobre la E-selectina ligando después PSGL-1 anticuerpo administración o en la deficiencia de PSGL-1 fueron suficientes para inducir la hipersensibilidad de contacto profundo. En conclusión, la E-selectina media PSGL-1-dependientes e independientes de rodadura y los segundos pueden ser reguladas por la activación sistémica y puede sustituir a PSGL-1 para apoyar el desarrollo de la inflamación.
ZAP Es Un CRM1 Dependiente De La Proteína Nucleocytoplasmic Shuttling
La proteína antiviral dedo de zinc (ZAP) es un factor de host aislado recientemente antiviral. En concreto, inhibe la replicación del virus de la leucemia murina de Moloney (MMLV) y virus Sindbis (SIN) mediante la prevención de la acumulación de RNA viral en el citoplasma. En este informe, hemos demostrado que ZAP es predominantemente localizados en el citoplasma en el estado estacionario pero las lanzaderas entre el núcleo y el citoplasma de una manera CRM1 dependientes. Dos secuencias de localización nuclear (NLS) y una secuencia de exportación nuclear (NES) fueron identificados. Una NLS fue asignada a los aminoácidos 68-RARVCRRK-75 y el otro asignado a una región que incluye aminoácidos K405 y K406. La NES fue asignada a los aminoácidos 284-LEDVSVDV-291. Estos resultados ayudan a entender por qué ZAP específicamente previene la acumulación de ARN viral en el citoplasma. Estos resultados también sugieren posibles funciones de ZAP en el núcleo.
El Papel De CD44 Y ácido Hialurónico En El Reclutamiento De Neutrófilos
Linfocitos CD44 interacciones con hialuronano localizados en el endotelio se ha demostrado para mediar la rodadura y regular la entrada de linfocitos en los sitios de inflamación crónica. Debido a que los neutrófilos también expresan CD44, se investigó el papel de CD44 y ácido hialurónico en el proceso de múltiples pasos para el reclutamiento de neutrófilos. CD44 (- / -) y ratones de tipo salvaje de control fueron inyectados con la intrascrotally quimioquinas activación de neutrófilos-, MIP-2, y la cinética de leucocitos en la microcirculación cremastérico fueron investigados 4 h posteriormente mediante microscopía intravital. Ni el flujo de rodadura, ni las velocidades de laminación se redujeron en CD44 (- / -) con respecto a los ratones de tipo salvaje ratones. In vitro, los neutrófilos no rodar por el ligando CD44 hialuronano, de acuerdo con los datos in vivo que CD44/hyaluronan no median la rodadura. Sin embargo, el número de leucocitos adherentes en la vénula se redujo en un 65% en CD44 (- / -) ratones en comparación con ratones de tipo salvaje. La emigración de leucocitos también disminuyó considerablemente en el CD44 (- / -) ratones. La misma disminución en la adherencia y la emigración se observó en los ratones de tipo salvaje dadas hialuronidasa. La histología reveló neutrófilos como ser la población dominante infiltrante. Hemos generado ratones quiméricos que expresan CD44, ya sea en sus leucocitos o en su endotelio CD44 y hallaron que tanto en el endotelio y los neutrófilos era importante para el reclutamiento de leucocitos en los tejidos óptima. De los neutrófilos que emigraron de tipo salvaje y CD44 (- / -) ratones, no hubo alteración en la migración a través del intersticio. Este estudio sugiere que CD44 puede mediar alguna adhesión de los neutrófilos y la emigración, pero no parece afectar la posterior migración dentro de los tejidos.
Insulina-como Las Proteínas Del Factor De Crecimiento De Enlace 3 Y 5 Se Sobreexpresa En La Fibrosis Pulmonar Idiopática Y Contribuir a La Deposición De Matriz Extracelular
La fibrosis pulmonar idiopática (FPI) es una enfermedad fibrótica de etiología desconocida que se traduce en una significativa morbilidad y mortalidad. La patogénesis de la FPI no se conoce completamente. Debido a que estudios recientes han implicado a la insulina-como factor de crecimiento I (IGF-I) en la patogénesis de la fibrosis, se analizó la expresión y función de la insulina-como las proteínas del factor de crecimiento de unión (IGFBP) -3 y -5 en la FPI. IGFBP-3 y -5 niveles se incrementaron en vivo en los tejidos pulmonares del IPF e in vitro en cultivos de fibroblastos de pulmón de la FPI. Las IGFBPs secretadas por los fibroblastos IPF son funcionalmente activo y se puede unir el IGF-I, y IGFBPs secretadas por los fibroblastos primarios se unen los componentes de la matriz extracelular. Nuestros resultados sugieren también que las IGFBPs pueden estar implicados en la iniciación y / o perpetuación de la fibrosis en virtud de su capacidad para inducir la producción de componentes de matriz extracelular tales como colágeno de tipo I y fibronectina en fibroblastos normales de pulmón primarios adultos. A pesar de factor de crecimiento transformante-beta aumentó la producción de IGFBP-3 por los fibroblastos primarios en una forma dependiente del tiempo, IGFBP-5 niveles que no se incrementaron en un factor de crecimiento transformante-beta. En conjunto, nuestros resultados sugieren que las IGFBPs juegan un papel importante en el desarrollo de la fibrosis en la FPI.
LSP1 Endotelial Es Un Portero De La Migración De Leucocitos Transendotelial
Leucocitos proteína específica de 1 (LSP1), una proteína de F-actina y un sustrato importante aguas abajo de la proteína quinasa p38 activada por mitógenos, así como la proteína quinasa C, se ha informado a ser importante en la quimiotaxis de los leucocitos. Aunque su distribución ha sido pensado para ser restringido a los leucocitos, en este documento nos informan de que LSP1 se expresa en el endotelio y que es esencial para permitir la emigración de neutrófilos. Utilizando microscopía intravital para visualizar directamente leucocitos de rodadura, la adherencia, y la emigración en vénulas post-capilares en LSP1-deficientes (LSP1-/ -) ratones, se encontró que la deficiencia de LSP1 inhibe la extravasación de neutrófilos en respuesta a diversas citocinas (factor de necrosis tumoral-alfa y la interleucina- 1beta) y de neutrófilos quimiocinas queratinocitos derivados de quimioquinas en vivo. LSP1 deficiencia no afectó leucocitos de rodadura o de adhesión. Generación de LSP1-/ - ratones quiméricos con trasplante de médula ósea reveló que en los ratones con LSP1-/ - las células endoteliales y los leucocitos de tipo salvaje, la migración de neutrófilos extravasación de vénulas post-capilares se reducen notablemente. Por el contrario, LSP1-/ - neutrófilos en ratones de tipo salvaje fueron capaces de extravasación con normalidad. De acuerdo con la función endotelial alterada se observó una reducción en la permeabilidad vascular a la histamina en LSP1-/ - de los animales. Western blot y microscopía de inmunofluorescencia confirmaron la presencia de LSP1 de tipo salvaje, pero no en LSP1-/ - ratones las células endoteliales microvasculares. Cultivadas células endoteliales humanas también teñidas positivo para LSP1. Nuestros resultados sugieren que LSP1 expresado en el endotelio regula la migración de neutrófilos extravasación.
Efectos De La Emodina De Ca2 + Transducción De Señales De Células Musculares Lisas En El Síndrome De Disfunción Orgánica Múltiple
Hemos hecho varios informes sobre el mecanismo de transducción de señales que emodina mejorar las concentraciones de calcio de las células musculares lisas (SMC) en la condición fisiológica por el inositol [1, 4, 5]-friphosphate (IP3). La observación de que las concentraciones de IP3 en las CML se redujo en el síndrome de disfunción multiorgánica (SDMO) nos llevó a preguntarnos si emodina puede activar SMC para contratar por medio de elevar la [Ca2 +] y por lo tanto la modulación de la crítica Ca2 la transducción de señales + vías involucradas en la contracción de la SMC en el contexto patológico de mods. Para probar esta hipótesis, se utilizó el modelo de rata de MODS para explorar las posibles funciones de emodina en Ca2 + en la transducción de señales de los SMC de colon en ratas. ML-7 [un inhibidor de la cadena ligera de la miosina quinasa (MLCK)] y calfostina C [un inhibidor de la proteína quinasa C (PKC)] fueron utilizados para observar la influencia de emodina en las tiras musculares y SMCs en ratas después de MODS. La nifedipina (un antagonista de la dependiente de voltaje de Ca2 + canal), EGTA (eliminación de Ca2 + extracelular), heparina (un antagonista de IP3 específico de los receptores), y rianodina fueron usados para investigar los posibles mecanismos que intervienen en emodina mediada por la elevación del Ca2 + citoplasmático global en SMC de colon en las ratas después de mods. Nuestros resultados muestran que la emodina es capaz de contraer los músculos lisos de colon en ratas después de MODS por MLCK aumento de [Ca2 +] de CML, y por la PKC mejorar la sensibilidad al calcio de las CML. El mecanismo por el cual desencadena emodina elevada [Ca2 +] de los músculos lisos de colon en ratas después de MODS es probable que operan a través de IP3 y los receptores de RyR en el sarcoplasma. Se espera que un conocimiento más profundo sobre la forma en emodina modula la señalización de calcio crítico en CML podría conducir al desarrollo potencial de emodina en el tratamiento de MODS.
Temporal Y Espectral De Imágenes De Muestreo Resuelve Con Una Cámara Especialmente Diseñada Streak
Se presenta un muestreo novedosa técnica de imagen capaz de realizar simultáneamente dos dimensiones mediciones de las características temporales y espectrales de los procesos de emisión de luz por el uso de una cámara raya especialmente diseñado. Un experimento de prueba de principio, se realizó con un microscopio de fabricación casera multifocal de fluorescencia multifotónica. El sistema fue calibrado con un etalón de Fabry-Perot y una solución estándar fluoróforo (rodamina 6G en etanol) y se demostró que tienen una resolución temporal y espectral de 6,5 nm ps y 3, respectivamente, así como una alta precisión y reproducibilidad en la vida y el espectro medición. Imágenes en tiempo y espectralmente resueltos de 4 x 4 focos en la muestra se puede obtener con una instantánea.
Locomoción Intraluminal De Los Neutrófilos a Los Sitios De Emigración: Un Proceso Molecularmente A Diferencia De Adherencia En La Cascada De Contratación
La opinión predominante es que la beta 2-integrinas Mac-1 (alphaMbeta2, CD11b/CD18) y LFA-1 (alphaLbeta2, CD11a/CD18) sirven similares funciones biológicas, es decir, de adhesión, en la cascada de reclutamiento de leucocitos. Uso de tiempo real y time-lapse intravital video-microscopía y microscopía confocal en microvasos inflamadas, sistemáticamente evaluado la función de Mac-1 y LFA-1 en el paradigma de la contratación. El macrófago quimiocina proteína inflamatoria-2 inducidos por cantidades equivalentes de una adhesión de tipo salvaje y Mac-1-/ - ratones, pero muy poca adhesión de LFA-1-/ - ratones. Time-lapse vídeo-microscopía en las vénulas post-capilares reveló que inmediatamente después de la adhesión, no es significativa intraluminal rastreo de todos los neutrófilos a los sitios distantes de emigración en ratones de tipo salvaje. En contraste dramático, muy pocos de Mac-1-/ - neutrófilos se arrastró con una disminución de 10 veces en el desplazamiento y una reducción del 95% en la velocidad. Por lo tanto, Mac-1-/ - neutrófilos inició la transmigración más cerca de la zona inicial de adhesión, que a su vez condujo a la transmigración retraso debido al movimiento a través de sitios de emigración no óptimos. Interesantemente, los pocos LFA-1-/ - células que se adhieren rastreado de manera similar a los de tipo salvaje neutrófilos. Molécula de adhesión intercelular-1, pero no la molécula de adhesión intercelular mediada por dos el rastreo de Mac-1-dependiente. Estos resultados in vivo claramente delinear dos mecanismos moleculares fundamentalmente diferentes para la LFA-1 y Mac 1-en vivo, es decir, LFA-1-adhesión dependiente seguido por Mac-1-dependiente rastreo, y ambos pasos, finalmente, contribuir a la emigración eficiente del vasculatura.
Leucocitos Y PI3Kgamma PI3Kdelta Tienen Papeles Temporal Distintas Para El Reclutamiento De Leucocitos En Vivo
Phosphoinositide 3-quinasas (PI3Ks) ha sido considerada importante en la motilidad de los leucocitos. PI3Kgamma, la clase I (B) PI3K, expresó un lugar destacado en los leucocitos y también en las células endoteliales, media leucocitos respuestas funcionales inducidos por factores quimiotácticos. Para revelar su papel en el reclutamiento de leucocitos, se utilizó la microscopía intravital para visualizar directamente leucocitos de rodadura, la adherencia, y la emigración en vénulas post-capilares en PI3Kgamma-deficiente (PI3Kgamma (- / -)) ratones. Presentamos aquí que la deficiencia de PI3Kgamma no tuvo efectos significativos sobre la velocidad de flujo o leucocitos rodando rodando y efectos menores sobre la adhesión (30% a 35%) en respuesta a quimioquinas CXC MIP-2 (CXCL2) o KC (CXCL1). Sin embargo, la emigración de leucocitos se vio gravemente afectada en PI3Kgamma (- / -) ratones en una respuesta precoz (primeros 90 minutos) a MIP-2 o KC. Los ratones quiméricos que reciben transplantes de médula ósea reveló que esta respuesta temprana era completamente dependiente de los neutrófilos PI3Kgamma pero no las células del parénquima (endotelio y otros). Idénticas respuestas se observaron en la producción de quimioquinas endógena fue inducida por el TNF, la emigración de leucocitos se redujo en PI3Kgamma (- / -) ratones. Las respuestas más prolongadas a MIP-2 (de 4 a 5 horas) o TNF (6 a 8 horas) fueron casi en su totalidad PI3Kgamma independiente y depende en gran medida PI3Kdelta. Nuestros resultados revelan que la respuesta de la emigración de leucocitos al CXC quimiocinas es totalmente dependiente de PI3Kgamma o PI3Kdelta, pero estos son que no se solapan, eventos temporalmente distintas en los tejidos inflamados en vivo.
Acelera La PI3K, Pero No Es Necesario Para, Quimiotaxis De Neutrófilos Al FMLP
Actividad PI3K, resultando en la acumulación de PIP (3) a lo largo del borde de ataque de una célula chemotaxing, se ha propuesto para ser un evento indispensable de señalización que se requiere para que las células sufren la quimiotaxis de quimioatrayentes endógenos y exógenos. Algunos estudios han sugerido que esto podría ser el caso de quimioatrayentes como IL8, mientras que la quimiotaxis a otros estímulos, tales como el péptido bacteriana N-formil-metionil-leucil-fenilalanina (fMLP), podrían ocurrir normalmente en la ausencia de actividad PI3K. Aquí, sistemáticamente analizar el papel de PI3K en la mediación de la quimiotaxis de fMLP, tanto in vitro como in vivo. Usando a corto y largo plazo en ensayos in vitro, así como un ensayo in vivo de la quimiotaxis, se determinó la importancia de PI3K en respuesta a la fMLP quimioatrayente prototípico. La exposición de los neutrófilos a fMLP inducido una polarización inmediata, lo que resultó en la migración direccional hacia fMLP dentro de los 2-3 minutos. PI3K inhibe las células también polarizado y migró de una manera direccional hacia la fMLP, sin embargo, este proceso se retrasó por unos 15 minutos, lo que demuestra que la PI3K acelera la respuesta inicial a fMLP, sino una vía alternativa sustituye a la PI3K en el tiempo. Por el contrario, p38-MAPK inhibe las células, o células que carecen de MK2, fueron incapaces de polarizar en respuesta a fMLP. A largo plazo los ensayos de quimiotaxis utilizando un inhibidor pan-PI3K, un inhibidor específico de PI3Kdelta o neutrófilos PI3Kgamma knock-out, no demostró el papel de PI3K en la mediación de la quimiotaxis de fMLP, independientemente de la inclinación de la pendiente fMLP. Resultados similares se observaron en vivo, con PI3Kgamma (- / -) las células que muestran un retraso, pero por lo demás normal, la respuesta quimiotáctica de los gradientes de fMLP. En conjunto, estos datos demuestran que, a pesar de PI3K puede mejorar la respuesta temprana a la fMLP quimioatrayente bacteriana, no es necesario para la migración hacia este quimioatrayente.
KGF-1 Para La Curación De Heridas En Modelos Animales
Factor-1 de crecimiento de queratinocitos (KGF-1) es un miembro del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) FGF7 y se expresa en la piel normal y heridos. KGF-1 se produce masivamente en las primeras etapas del proceso de curación de heridas, así como durante el proceso de remodelación posterior (1, 2). Se han estudiado los efectos de la electroporación de un plásmido KGF-1 en las heridas escisionales de diferentes modelos de roedores que imitan las enfermedades se sabe que perjudican el proceso de cicatrización de heridas normal. Hemos utilizado un modelo de ratón genéticamente diabético y un modelo de rata séptica en nuestros experimentos, y nos han mostrado una mejora de la tasa de curación (92% de las heridas se curan en el día 12 frente a 40% del control), la calidad de la epitelización (Resultado histológico de 3,3 vs 1,5), y la densidad de nuevos vasos sanguíneos (85% más nuevos vasos sanguíneos en las capas superficiales que la del control) (3, 4). Teniendo en cuenta estos resultados, creemos que podemos explorar aún más las modalidades de tratamiento para el uso de la transfección electroporación asistida de los vectores de expresión de ADN plásmido de factores de crecimiento para mejorar la cicatrización de heridas cutáneas.
Exógeno Derivado De Células Estromales Factor-1 Induce El Reclutamiento De Leucocitos Modesto En Vivo
Derivado de células estromales factor-1 (SDF-1; CXCL12), una de quimioquinas CXC, se ha encontrado a participar en modelos de inflamación in vivo y en la adhesión celular, la migración y la quimiotaxis in vitro. Este estudio tuvo como objetivo determinar si exógeno SDF-1 induce el reclutamiento de leucocitos en los ratones. Después de la administración sistémica de la SDF-1 alfa, la expresión de las moléculas de adhesión P-selectina y VCAM-1 en ratones se midió utilizando un análisis cuantitativo de doble radiomarcado ensayo de Ab y el reclutamiento de leucocitos en diversos tejidos se evaluó mediante microscopía intravital. El efecto de local de SDF-1 alfa en el reclutamiento de leucocitos se determinó también en el músculo cremáster y se compara con el efecto del TNF de citoquinas y quimioquinas CXC del queratinocitos derivados de quimioquinas (KC; CXCL1). La administración sistémica de la SDF-1 alfa (10 microgramos, 05.04 h) indujo la regulación positiva de la P-selectina, pero no VCAM-1, en la mayoría de los tejidos en los ratones. Se dieron lugar a modestas respuestas reclutamiento de leucocitos en la microvasculatura del músculo cremáster, el intestino y el cerebro, es decir, un aumento en el flujo de los leucocitos de rodadura en el músculo cremáster y los intestinos, la adhesión de leucocitos en los tres tejidos, y la emigración en el músculo cremáster. El tratamiento local con SDF-1 alfa (1 mcg, 4-5 h) redujo la velocidad y el aumento de los leucocitos rodar la adhesión de leucocitos y la emigración en las vénulas cremastéricos, pero las respuestas fueron mucho menos profundo que los provocados por KC o TNF. SDF-1 alfa inducida por el reclutamiento depende de la P-selectina endotelial, pero no la P-selectina en las plaquetas. Llegamos a la conclusión de que el SDF-1 alfa exógena mejora la interacción leucocito-endotelio celular e induce la modesta y P-selectina endotelial dependiente del reclutamiento de leucocitos.
Edad Dependiente De Deterioro De La HIF-1 Alfa Expresión En Ratones Diabéticos: Corrección Con La Electroporación-facilitó La Terapia Génica Aumenta La Cicatrización De Heridas, La Angiogénesis Y Células Angiogénicas Circulantes
La cicatrización de heridas se ve afectada en pacientes de edad avanzada con diabetes mellitus. La hipótesis de que depende de la edad deterioro de la cicatrización de heridas cutáneas en ratones diabéticos db / db: (a) que se correlacionan con la reducción de la expresión del factor de transcripción 1 alfa factor inducible por hipoxia (HIF-1 alfa), así como de sus genes diana corriente abajo, y ( b) podría ser superado por la terapia de reemplazo de HIF-1 alfa. Cierre de las heridas, la angiogénesis y la expresión del ARNm de heridas en la piel de escisión se analizaron y distribución de células angiogénicas (CAC) se cuantificaron en ratones db / db que no fueron tratadas o recibido electroporación facilitada por HIF-1 alfa, la terapia génica. HIF-1 alfa niveles de mRNA en tejido de la herida se redujeron significativamente en los mayores (4-6 meses) en comparación con los más jóvenes (1,5-2 meses) ratones db / db. La expresión de ARNm que codifican las citocinas angiogénicas factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF), angiopoyetina 1 (ANGPT1), ANGPT2, derivado de las plaquetas del factor de crecimiento B (PDGF-B), y el factor de crecimiento placentario (PlGF) también estaba alterada en heridas de mayor db o ratones db. La inyección intradérmica de plásmido gWIZ-CA5, que codifica una forma constitutivamente activa de HIF-1 alfa, seguida de la electroporación, inducida por el aumento de los niveles de HIF-1 alfa mRNA en el sitio de la inyección en el día 3 y el aumento de los niveles de VEGF, PlGF, PDGF-B, y ANGPT2 ARNm en el día 7. Cláusulas de acción colectiva en la sangre periférica aumentó 10 veces en los ratones tratados con gWIZ-CA5. Cierre de la herida se aceleró significativamente en los ratones db / db tratados con gWIZ-CA5, en comparación con los ratones tratados con el vector vacío. Por lo tanto, HIF-1 alfa, la terapia génica corrige el deterioro dependiente de la edad de HIF-1 alfa expresión, la expresión de citoquinas angiogénicos, y cláusulas de acción colectiva que contribuyen al deterioro dependiente de la edad de la cicatrización de heridas en ratones db / db.
La Atenuación De Isoflurano Inducida Por Precondicionamiento Y Producción De Especies Reactivas Del Oxígeno En El Corazón De Rata Senescente
Aunque la atenuación de preacondicionamiento en modelos de edad ex vivo del corazón anestésico se ha estudiado extensamente, no hay comparable en estudios in vivo. Para extender el trabajo anterior y para hacer frente a un posible mecanismo subyacente a las diferencias relacionadas con la edad, se determinó isoflurano inducida preacondicionamiento y especies reactivas del oxígeno (ROS) en el corazón de rata de mediana edad en vivo.
Asociación Entre Los Genes Dopaminérgicos (SLC6A3 Y DRD2) Y Tartamudez, Entre Chinos Han
La función normal del sistema dopaminérgico es necesaria para la fluidez del habla. Había pruebas de que las actividades de transportador de dopamina (DAT) y receptor de dopamina D2 (DRD2) podrían estar alterados en las personas con falta de fluidez del habla. Este estudio tiene por objeto determinar la posible correlación entre dos genes dopaminérgicos (SLC6A3 y DRD2) y el trastorno de la fluidez del habla, y para determinar las frecuencias alélicas de los cinco polimorfismos de nucleótido único (SNP) (rs2617604, rs28364997, rs28364998 en SLC6A3 y rs6275, rs6277 en el DRD2) en los pacientes chinos de etnia han con este trastorno. Una muestra de 112 pacientes con falta de fluidez del habla y 112 controles emparejados en el género fueron incluidos en este estudio caso-control. Los resultados muestran que la presencia del alelo C en rs6277 en DRD2 gen está asociado con una mayor susceptibilidad a la enfermedad, mientras que el alelo T es protectora. 939T/957T haplotipo es también un factor de protección.
Asociadas Con La Edad Cambios En La Expresión Genética Cardíaca Tras El Preacondicionamiento
La protección cardíaca que ofrece el precondicionamiento isquémico (PCI) y el precondicionamiento anestésico (PCA) se redujo significativamente en el miocardio senescente. Los autores plantearon la hipótesis de que la edad de diversa manera a modular la expresión génica inducida por el PCI y el PCA en vivo.
La Sobreexpresión De Los Derechos Humanos CAP10-como La Proteína 46 KD En T-leucemia Linfoblástica Aguda Y Leucemia Mielógena Aguda
Hemos identificado anteriormente un nuevo gen humano CAP10-como la proteína de 46 KD (hCLP46) de la leucemia humana mielógena aguda (LMA) se transformará en el síndrome mielodisplásico CD34 (+) las células, pero la función de este gen no está claro. En este estudio, la cadena de una polimerasa en tiempo real de reacción basada en ensayo se desarrolló para cuantificar la expresión de hCLP46 en la sangre periférica de AML y T-leucemia linfoblástica aguda (LLA-T) muestras primarias y en seis líneas de células leucémicas. Además, se investigó la expresión de gen CDKN2A / B y la apoptosis en las células U937, cuando hCLP46 es downregulated in vitro.
Deterioro De La Angiogénesis Y La Movilización De Células Circulantes Angiogénicos En HIF-1 Alfa Heterocigota Nulo Ratones Después De La Herida Quemadura
HIF-1 (HIF-1) es un factor de transcripción que controla las respuestas vasculares a la hipoxia y la isquemia. En este estudio, los ratones que eran heterocigotos (HET) para un alelo nulo en el locus que codifica la subunidad HIF-1 alfa (ratones HET) y sus compañeros de camada de tipo salvaje (WT) fueron sometidos a una lesión térmica que implica 10% de la superficie del cuerpo área. HIF-1 alfa, los niveles de proteína se incrementaron en las quemaduras de WT, pero no de los ratones HET el día 2. Los niveles séricos del factor 1 alfa-estromal derivada, que se une a CXCR4, se incrementaron en el día 2 en WT, pero no en ratones HET. Circulantes células angiogénicas también se incrementaron en el día 2 en WT, pero no en ratones HET e incluyó CXCR4 (+) Sca1 (+) las células. Laser imágenes de perfusión Doppler demostró un aumento del flujo de sangre en las heridas por quemaduras de WT, pero no los ratones HET en el día 7. Inmunohistoquímica en el día 7 reveló un número reducido de CD31 (+) buques en el margen de curación de las heridas de quemadura en HET en comparación con los ratones WT. Maduración de los vasos se veía afectada también en las heridas de ratones HET como se determina por el número de alfa-actina de músculo liso positivos-vasos en el día 21. El área de la herida que queda en los 14 días fue significativamente mayor en los ratones en comparación con sus compañeros de camada HET WT. El porcentaje de heridas curadas en el día 14 fue significativamente menor en los ratones HET. Estos datos delimitar una vía de señalización por el que HIF-1 promueve la angiogénesis durante la cicatrización de la quemadura.
Asociación De Aumento De La Severidad De Quemado En Ratones Con La Movilización Tardía De La Circulación De Células Angiogénicas
Para llevar a cabo una exploración sistemática del fenómeno de la movilización de las células circulantes angiogénicos (CAC) en un modelo animal. Este fenómeno se ha observado en los pacientes con heridas de quemaduras cutáneas y puede ser un mecanismo importante para la vasculogénesis en la cicatrización de la quemadura.
Copolímeros Anfifílicos Toothbrushlike a Base De Poli (etileno Glicol) Y Poli (epsilon-caprolactona) Como Portadores De Fármacos Con Propiedades Mejoradas
Anfifílico poli (etileno glicol)-b-poli (2-hidroxietil metacrilato-g-poli (epsilon-caprolactona)) (PEG-BP (HEMA-g-PCL)) copolímeros toothbrushlike se sintetizaron y se evaluaron como portadores de suministro de fármacos. Dos polímeros toothbrushlike se sintetizaron mediante polimerización por apertura de anillo de epsilon-caprolactona (CL) iniciado por poli (etileno glicol)-b-poli (2-hidroxietil metacrilato) (PEG-b-PHEMA) iniciadores macromoleculares, y sus estructuras moleculares y físicas propiedades se caracterizaron utilizando (1) H RMN, cromatografía de permeación en gel (GPC), y análisis calorimétrico de barrido diferencial (DSC). Los puntos de fusión y la temperatura cristalizable han disminuido obviamente, lo que implica que los núcleos de PCL de PEG-BP (HEMA-g-PCL) micelas toothbrushlike copolímero con segmentos más cortos PCL era poco probable que cristalizar a temperatura ambiente durante la aplicación de administración de fármacos. También las propiedades micelización de copolímeros toothbrushlike en solución acuosa fueron investigados por espectroscopia de fluorescencia, dispersión de luz dinámica (DLS), y microscopía electrónica de transmisión (TEM). En comparación con las micelas de copolímeros de bloque lineales de PEG-b-PCL, las micelas de PEG-BP (HEMA-g-PCL) s exhibió una mayor capacidad de carga para el fármaco contra el cáncer, la doxorubicina (DOX), y las micelas cargadas con medicamento fueron altamente estable en solución acuosa. Los datos in vitro de liberación de Dox y láser confocal estudios de microscopía de barrido (CLSM) mostraron que DOX micelas cargadas de copolímero toothbrushlike puede ser efectivamente internalizados por las células del carcinoma de vejiga de Justicia Ambiental, y el DOX podría ser liberado en compartimentos endocítica y, finalmente, transporta al núcleo. Estas micelas de copolímero toothbrushlike pueden ser análogos de copolímeros de dos bloques lineales de PEG-b-PCL, pero demostraron mejores propiedades de la carga y la liberación, debido a sus núcleos hidrofóbicos PCL no se cristalizan en las condiciones de entrega.
Asociados Con La Edad Las Diferencias En La Activación De Vías De Señalización Y Akt/GSK-3beta La Inhibición De La Apertura Del Poro De Transición De Permeabilidad Mitocondrial En El Corazón De Rata
El pretratamiento con isoflurano disminución del tamaño del infarto de miocardio en ratas jóvenes (3-5 meses), pero no en ratas viejas (20-24 meses). Para comprender los mecanismos que subyacen a la falta de protección a la antigua miocardio, las diferencias en la fosforilación de Akt/GSK-3beta y asociadas con la edad las diferencias en la transición de permeabilidad mitocondrial de los poros (mPTP) la apertura en el corazón de envejecimiento in vivo se midieron. El isoflurano aumentó significativamente la fosforilación de Akt y GSK-3beta en los grupos de jóvenes. En contraste, los niveles de p-Akt y p-GSK-3beta fueron sumamente elevada en los grupos de control de edad falsos. El isoflurano preacondicionamiento redujo significativamente la caída de NAD (+) niveles inducidos por lesión por isquemia / reperfusión en los animales jóvenes, lo que refleja la inhibición de la apertura MPTP. En los animales viejos, sin embargo, isoflurano fallado para evitar la caída de NAD (+) niveles inducidos por isquemia / reperfusión. La falta de isoflurano inducidas efectos cardioprotectores, vistos en los animales viejos, puede ser explicada por diferencias relacionadas con la edad en la vía Akt/GSK-3beta señalización y la incapacidad para reducir la apertura mPTP después de la isquemia / reperfusión.
Síntesis Y De Luz Blanca De Emisión De ZnO / HfO (2): Nanocables Eu
ZnO / HfO (2): Eu nanocables se prepararon por radio frecuencia pulverización con electrospun nanofibras ZnO como núcleos. El bien cristalizado ZnO / HfO (2): nanocables UE mostraron un uniforme intacto núcleo-corteza estructura, que consistía en un núcleo hexagonal ZnO y un HfO monoclínico (2) cáscara. Las propiedades de fotoluminiscencia de las muestras fueron caracterizados. Una banda de emisión de luz blanca consistía en azul, verde, rojo y las emisiones se observó en los nanocables. Las emisiones de azul y verde pueden ser atribuidos a la vacante zinc y defectos de oxígeno vacantes en ZnO / HfO (2): nanocables UE, y las emisiones de color amarillo-rojo se derivan de los interiores de concha 4f-transiciones de correspondiente Eu (3 +) iones en HFO (2): cáscaras de Eu. Aumento de emisión de luz blanca se observó en los nanocables. El aumento de la emisión se atribuye a los cambios estructurales después de la síntesis coaxial.
Los Hidrogeles Supramoleculares De Cisplatino Nanopartículas Cargadas De Copolímeros De Bloque Y Alfa Ciclodextrinas Con Una Propiedad De Entrega Paso a Paso
Un paso a paso del sistema de administración de fármacos contra el cáncer basado en un hidrogel inyectable supramolecular se presentó. En este sistema, poli (etileno glicol)-b-poli (ácido acrílico) (PEG-b-PAA) copolímero bloque que contiene nanopartículas de cisplatino fueron liberados por la erosión de los hidrogeles y luego el cisplatino fue liberado de las nanopartículas mediante el intercambio con iones de cloruro . Mediante la mezcla de α-ciclodextrinas (alfa-CD) y la micelas de PEG-b-PAA con sus núcleos PAA cargadas con el cisplatino en agua, los hidrogeles supramoleculares nuevos fueron generados por roscado alfa-CD a los segmentos de PEG y formando enlaces cruzados físicas de collares moleculares. Las propiedades de gelificación puede ser sintonizado por cambios en las concentraciones de los polímeros y cisplatino, su alimenta, y mediante la adición de PEG homopolímeros o copolímeros Pluronic como aditivos. Estructuras y propiedades de los hidrogeles supramoleculares que contienen cisplatino fueron estudiados por amplio ángulo de difracción de rayos X (DRX) y las mediciones de reología, respectivamente. El efecto tixotrópico de los hidrogeles y su transición reversible sol-gel fueron confirmados. En experimentos in vitro se llevaron a cabo de hidrogel de la erosión y la liberación de cisplatino en solución salina y agua pura se cuantificó. La erosión del hidrogel produjo nanopartículas discretas de la que el cisplatino fue puesto en libertad por completo en solución salina. En contraste, los hidrogeles fueron erosionadas en nanopartículas en agua pura, pero no cisplatino podría ser liberado. Los estudios in vitro de citotoxicidad mostró que los hidrogeles cisplatino-cargados inhibió el crecimiento de células humanas de carcinoma de vejiga EJ con una potencia similar a la de la cisplatino libre, mientras que los hidrogeles sin cisplatino no mostró citotoxicidad. Estos resultados sugieren que los cisplatino coordinados hidrogeles supramoleculares PEG-b-PAA/α-CD tienen un gran potencial como un sistema inyectable de liberación sostenida de cisplatino en la terapia del cáncer.
Biamphiphilic Micelas Tribloque Copolímero Como Una Plataforma Multifuncional Para La Entrega De Medicamento Contra El Cáncer
Micelas Novel de biamphiphilic tribloque copolímero de poli (etileno glicol)-b-poli (ε-caprolactona)-b-poli (ácido acrílico) (PEG-b-PCL-b-PAA) como nuevos nanotransportadores multifuncionales a los fármacos anticancerosos de entrega se evaluaron. Los bien definidos copolímeros de tres bloques preparados por polimerizaciones controladas auto-ensamblan en micelas en solución acuosa con un radio hidrodinámico de 13 nm como el obtenido por dispersión de luz dinámica (DLS) y una baja concentración micelización crítico de 2,9 x 10 (-4) g / L. Los núcleos hidrofóbicos PCL de micelas se aplicaron para cargar doxorrubicina, un medicamento hidrófobo y el funcional subcoronas PAA se aferró a el núcleo micelar se utilizaron para llevar a cisplatino mediante la interacción covalente. Los resultados indicaron que dos fármacos anticancerosos había sido cargado por mecanismo diferente ya sea por separado o simultáneamente. Contenido de fármaco de carga y eficiencia, así como perfiles de liberación se evaluaron. Por otra parte, la internalización y la citotoxicidad de las nanopartículas contra el cáncer contra las células del carcinoma de vejiga EJ fueron estudiados. Las micelas de copolímero de tres bloques biamphiphilic proporcionado no sólo biocompatibilidad y biodegradabilidad, sino también la capacidad de carga de medicamentos contra el cáncer de uno y dos, lo que indica que se trata de una plataforma útil multifuncional para la administración de fármacos contra el cáncer. © 2010 periódicos, Wiley, Inc. J Biomed Mater Res Parte A:, 2010.
Biamphiphilic Micelas Tribloque Copolímero Como Una Plataforma Multifuncional Para La Entrega De Medicamento Contra El Cáncer
Micelas Novel de biamphiphilic tribloque copolímero de poli (etileno glicol)-b-poli (ε-caprolactona)-b-poli (ácido acrílico) (PEG-b-PCL-b-PAA) como nuevos nanotransportadores multifuncionales a los fármacos anticancerosos de entrega se evaluaron. Los bien definidos copolímeros de tres bloques preparados por polimerizaciones controladas auto-ensamblan en micelas en solución acuosa con un radio hidrodinámico de 13 nm como el obtenido por dispersión de luz dinámica (DLS) y una baja concentración micelización crítico de 2,9 x 10 (-4) g / L. Los núcleos hidrofóbicos PCL de micelas se aplicaron para cargar doxorrubicina, un medicamento hidrófobo y el funcional subcoronas PAA se aferró a el núcleo micelar se utilizaron para llevar a cisplatino mediante la interacción covalente. Los resultados indicaron que dos fármacos anticancerosos había sido cargado por mecanismo diferente ya sea por separado o simultáneamente. Contenido de fármaco de carga y eficiencia, así como perfiles de liberación se evaluaron. Por otra parte, la internalización y la citotoxicidad de las nanopartículas contra el cáncer contra las células del carcinoma de vejiga EJ fueron estudiados. Las micelas de copolímero de tres bloques biamphiphilic proporcionado no sólo biocompatibilidad y biodegradabilidad, sino también la capacidad de carga de medicamentos contra el cáncer de uno y dos, lo que indica que se trata de una plataforma útil multifuncional para la administración de fármacos contra el cáncer.
Cardioprotección Del Corazón De Rata Envejecida Por GSK-3beta Inhibidor Es Atenuada: Relacionados Con La Edad Cambios En La Modulación Del Poro De Transición De Permeabilidad Mitocondrial
Es bien sabido que la inhibición de la glucógeno sintasa quinasa (GSK)-3β en el adulto joven miocardio protege contra la isquemia-reperfusión (I / R) lesiones través de la inhibición de la transición de permeabilidad mitocondrial de los poros (mPTP) de apertura. En este caso, se determinó la edad asociada a diferencias en la capacidad de GSK-3β inhibidor [SB-216763 (SB)] para proteger el corazón y para modular la apertura mPTP durante la lesión I / R. Fischer 344 ratas macho fueron asignados a sus respectivos grupos de edad joven o viejo. Los animales fueron sometidos a una isquemia de 30 minutos tras la reperfusión 120 minutos para determinar el infarto de miocardio (MI) de tamaño en vivo. Tejidos isquémicos se recogieron 10 min después de la reperfusión de dinucleótido de nicotinamida adenina (NAD (+)) y las mediciones de inmunotransferencia. En experimentos paralelos, los miocitos ventriculares aislados de ratas jóvenes o de edad fueron expuestos a estrés oxidativo mediante la generación de especies reactivas del oxígeno (ROS), y los tiempos de apertura de MPTP se midieron mediante el uso de microscopía confocal. Nuestros resultados muestran que la SB disminución de infarto de miocardio en jóvenes SB-ratas tratadas en comparación con los jóvenes no tratados de E / R animales, mientras que SB no afectó significativamente MI en los animales viejos. SB también aumentó significativamente la GSK-3β fosforilación en ratas jóvenes, pero los niveles de fosforilación ya estaban muy elevados en los grupos de control de edad. No hubo diferencias significativas entre los animales viejos SB-tratadas y no tratadas. NAD (+) se mantuvieran los niveles mejor en jóvenes SB-animales tratados en comparación con el grupo sin tratar joven durante I / R, pero esta mejora relativa no se observó en los animales viejos. SB también prolongó significativamente el tiempo de apertura a la MPTP inducida por ROS en cardiomiocitos jóvenes, pero no en los cardiomiocitos de edad. Estos resultados demuestran que este inhibidor de GSK-3β no protege a las personas de edad miocardio en respuesta a la lesión I / R o impedir la apertura mPTP después de un aumento de ROS y sugieren que el envejecimiento saludable altera mPTP regulación por parte de GSK-3β.
La Hipoxia Y Factor Inducible Por Hipoxia En La Herida Por Quemadura
La importancia del factor inducible por hipoxia (HIF) en la promoción de la angiogénesis y la vasculogénesis durante la cicatrización de la herida ha sido demostrada. Es ampliamente aceptado que la actividad de HIF puede ser promovida por muchos factores, incluyendo la hipoxia en la herida o citoquinas de las células inflamatorias que infiltran la herida. Sin embargo, no ha habido una exploración sistemática de la relación entre la actividad de HIF y la hipoxia en la herida de la quemadura. La ubicación del tejido hipóxico no ha sido claramente definida. El curso temporal de la aparición de la hipoxia y el aumento de la actividad de HIF y apariencia de los productos intermedios de transcripción HIF no se ha descrito. El objetivo de este estudio era utilizar pimonidazole, un marcador específico del tejido hipoxia, para caracterizar el curso espacial y temporal de la hipoxia en un modelo murino quemadura y correlacionar esto con la aparición de HIF-1α y sus productos de transcripción importantes angiogénicos y vasculogénica endoteliales vasculares del factor de crecimiento y SDF-1. La hipoxia se encuentra en el margen de curación de las heridas de quemaduras que comienzan a las 48 horas después de la quemadura y alcanzando un máximo de 3 días después de la quemadura. En los tramos de secuencia del bloque de tejido de la misma, tinción positiva de HIF-1α, SDF-1, y el factor de crecimiento endotelial vascular ocurrieron en el margen principal de la zona de la curación y alcanzó su punto máximo en el día 3, al igual que la hipoxia. El análisis inmunohistoquímico se utilizó para explorar las características de la región hipóxica de la herida. La localización de la hipoxia se encontró que se relaciona con el crecimiento celular y la migración, pero no a la proliferación o infiltración inflamatoria.
HCLP46 Regula U937 Proliferación Celular a Través De La Vía De Señalización Notch
Humanos CAP10-como la proteína 46 kDa (hCLP46) es el homólogo de Rumi, que es la primera proteína identificada O-glucosiltransferasa que modifica receptor Notch en Drosophila. La desregulación de la hCLP46 ocurre en muchas enfermedades hematológicas, pero el papel de hCLP46 sigue sin estar claro. Derribo de hCLP46 por la interferencia de ARN resultó en una disminución de los niveles de proteína Notch1 endógena, el dominio intracelular de Notch (INET) y Notch objetivo de genes Hes-1, lo que sugiere el deterioro de la señalización de Notch. Sin embargo, ni la superficie celular expresión muesca ni ligando actividades de unión se vieron afectadas. Además, las reguladas expresión de hCLP46 inhibe la proliferación de las células U937, que se correlacionaron con mayor inhibidor de la quinasa dependiente de ciclina (CDKI) CDKN1B (p27) y la disminución de la fosforilación del retinoblastoma (RB) de proteínas. Hemos demostrado que la falta de hCLP46 resultados en la activación de muesca deteriorada ligando inducida en células de mamíferos, y hCLP46 regula la proliferación de células U937 a través CDKI-RB vía de señalización, que puede ser importante para la patogénesis de la leucemia.
LAMP-2 La Expresión Génica En Linfocitos Circulantes Es Mayor En Pacientes Con Enfermedad Coronaria
La enfermedad arterial coronaria (EAC) es una enfermedad compleja común que es causada por la interacción entre factores genéticos y ambientales. La acumulación de pruebas indica que las células de la espuma en las placas ateroscleróticas presentan las características de las enfermedades de depósito lisosomal, es decir, la acumulación lisosomal de materiales indigesta. En los pacientes con enfermedades de depósito lisosomal, la acumulación lisosomal de lípidos y colesterol en las células de la placa aterosclerótica se ha observado. Sin embargo, los papeles de hidrolasas lisosomales y proteínas en la patogénesis de la aterosclerosis y CAD siguen sin estar claros.
Top-gated Deposición De Vapor Químico Grown Transistores De Grafeno Con La Saturación Actual
Los transistores de grafeno son de considerable interés para la frecuencia de radio (RF) de aplicaciones. En general, los transistores con transconductancia grande y drenar corriente de saturación son deseables para el rendimiento de RF, que es sin embargo no trivial de lograr en transistores de grafeno. Aquí nos informe de alto rendimiento de primera cerradas transistores de grafeno sobre la base de deposición de vapor químico (CVD) de grafeno crecido con gran transconductancia y drenar corriente de saturación. Los transistores de grafeno fueron fabricados con material evaporado alta constante dieléctrica (HFO (2)), como los dieléctricos de puerta de arriba. Estudios de longitud de escala de los transistores con longitud del canal de 5,6 micras a 100 nm muestran que la corriente de saturación completa se puede lograr en 5,6 micras dispositivos y las características de saturación degradar como la longitud del canal se encoge al régimen nm 100-300. La saturación de la corriente de drenaje se atribuyó principalmente a drenar el cambio de sesgo inducido de los puntos de Dirac. Con el depósito selectivo de HfO (2) dieléctricos de compuerta, se ha demostrado además un esquema simple para realizar un canal de unos 300 nm de longitud de los transistores de grafeno con la auto-alineados de drenaje-fuente de electrodos para lograr la más alta transconductancia de 250 uS / micras reportados en las enfermedades cardiovasculares grafeno hasta la fecha.
Alteraciones De La Autofagia-lisosomal Del Sistema En Los Linfocitos De Los Pacientes Con Infarto De Miocardio
El infarto de miocardio (IM) es una enfermedad común y multifactorial. Hasta la fecha, los genes causales y los mecanismos subyacentes permanecen en gran parte desconocido. Autophagic-lisosomal sistema, un proceso altamente conservadas degradativa en las células, ha sido implicado en el metabolismo lipídico. En este estudio, hemos explorado las alteraciones del sistema de autofagia-lisosomal en pacientes con infarto agudo de miocardio.
Fabricación Escalable De La Auto-Alineados Transistores De Grafeno Y Circuitos De Vidrio
Los transistores de grafeno son de considerable interés para la frecuencia de radio (RF) de aplicaciones. Alta frecuencia de transistores de grafeno con la frecuencia de corte intrínseca de hasta 300 GHz han sido demostrados. Sin embargo, los transistores de grafeno reportado hasta la fecha sólo se presentan una escasa frecuencia de corte extrínseca a unos 10 GHz, y los circuitos de grafeno funcionales demostrado hasta el momento sólo pueden operar en las decenas de megahercios régimen, lejos de la posibilidad de los transistores de grafeno podría ofrecer. Aquí se presenta un enfoque escalable para la fabricación de auto-alineados los transistores de grafeno con la frecuencia de corte superior a 50 circuitos extrínseca GHz y el grafeno que pueden operar en el régimen de 1-10 GHz. Los dispositivos se fabrican en un sustrato de vidrio a través de un proceso de auto-alineada con deposición de vapor químico (CVD) de grafeno crecido y se ha reunido una serie de dielectroforesis puerta de nanocables. El proceso de auto-alineado permite el logro de un rendimiento sin precedentes en la ECV transistores de grafeno con una alta transconductancia de 0,36 mS / m. El uso de un substrato aislante minimiza la capacitancia parásita y por lo tanto, ha permitido a los transistores de grafeno con una frecuencia de corte récord extrínseca (> 50 GHz) logrado hasta la fecha. La frecuencia de corte excelente extrínseca permite fácilmente la configuración de los transistores de grafeno en la duplicación de la frecuencia o la mezcla de circuitos que funcionan en el régimen de 1.10 GHz, un avance significativo en los informes anteriores (~ 20 MHz). Los estudios de abrir una vía a la fabricación escalable de alta velocidad y circuitos de transistores de grafeno funcionales y representan un importante paso adelante para los dispositivos basados en grafeno de radio frecuencia.
Efecto De La Temperatura En El Electrospinning De Nanocintas: El Caso Del óxido De Hafnio
Electrospinning es un método conveniente y versátil para la fabricación de diferentes tipos de nanoestructuras unidimensionales como nanofibras, nanotubos y nanocintas. Los parámetros ambientales tienen una gran influencia en la nanoestructura electrospinning. Aquí se presenta un nuevo método para la fabricación de óxido de hafnio (HFO (2)) nanocintas. HfO (2) nanocintas fueron preparados por electrospinning una solución de sol-gel con la aplicación de calefacción y el tratamiento posterior calcinación. Se investiga la dependencia de la temperatura de los productos por microscopía electrónica de barrido (SEM), microscopía electrónica de transmisión (TEM), difracción de electrones seleccionados área (SAED), y de energía dispersiva de rayos X (EDX) espectroscopia. La temperatura de calentamiento de hilatura ambiente se encuentra que es crucial para la formación de HfO (2) nanocintas. Por sintonización de la temperatura, la transformación morfológica de HfO (2) desde nanocables a nanocintas se logró. Se encontró que la rápida evaporación del disolvente juega un papel importante en el proceso de formación de HfO (2) nanocintas. Se muestra que nanocintas sólo puede obtenerse con la temperatura superior a 50 ° C y se encuentran en la fase monoclínica calidad alta. Un mecanismo posible crecimiento de las nanocintas basado en la separación de fases se propone. La fotoluminiscencia mejorado (PL) de HfO (2): Eu (3 +) nanocintas también se ilustra.
Disminución De La Expresión Genética De Las LC3 En Los Leucocitos Periféricos De Pacientes Con Enfermedad Arterial Coronaria
La enfermedad arterial coronaria (CAD) es una enfermedad arterial común y multifactorial, que es causada principalmente por la aterosclerosis. Macrófagos, linfocitos y neutrófilos han sido implicados en el desarrollo de la placa aterosclerótica. La autofagia, un proceso altamente conservadas celular para la eliminación de proteínas de larga vida y orgánulos, desempeña una variedad de papeles fisiopatológicos. Sin embargo, el papel de la autofagia en los leucocitos periféricos de la aterosclerosis y la CAD no han sido exploradas.
La Optimización De Las Interacciones De Alcanos Lineales Y Ramificados Con Agua Para Simular La Hidratación Hidrofóbica
Los estudios previos de la hidratación de gas simple han demostrado que la precisión de las simulaciones moleculares en la captura de las firmas termodinámicas de la hidratación hidrofóbica está relacionada tanto con la fidelidad del modelo de agua a replicar la densidad del líquido experimental en la presión ambiental y un informe de las interacciones de polarización entre el soluto y agua. Extendemos los estudios para examinar la hidratación alcano usando los potenciales transferibles para el equilibrio de fases unidos átomo de modelo para alcanos lineales y ramificados, desarrolladas para reproducir el comportamiento de fase de alcano, y el modelo TIP4P/2005 de agua, lo que proporciona una de las mejores descripciones de líquido agua para los modelos de carga disponibles de punto fijo. Alcanos sitio / oxígeno en el agua de Lennard-Jones interacciones transversales se han optimizado para reproducir las energías alcano experimentales hidratación libres en un rango de temperaturas. El modelo optimizado reproduce las energías libres de hidratación de los alcanos equipadas, con una raíz cuadrada diferencia media entre la simulación y la experimentación de 0,06 kcal / mol en un amplio rango de temperaturas, en comparación con 0,44 kcal / mol para el modelo de los padres. El modelo optimizado reproduce con precisión la dependencia de la temperatura de hidratación hidrofóbica, como se caracteriza por las entalpías de hidratación, entropías y capacidades de calor, así como la respuesta de la presión, como se caracteriza por parciales volúmenes molares.
Plasmon Resonance Fotodetección Multicolor Mejorada Por El Grafeno
El grafeno tiene el potencial para la alta velocidad, de banda ancha fotodetección, pero sólo con una eficiencia cuántica externa muy baja y no selectividad espectral. Aquí mostramos una mejora dramática de la general de la eficiencia cuántica y la selectividad espectral que permite fotodetección multicolor, mediante el acoplamiento de grafeno con nanoestructuras plasmónica. Se demuestra que metálicos nanoestructuras plasmónica se puede integrar con fotodetectores grafeno para mejorar grandemente la fotocorriente y eficiencia cuántica externa de hasta 1.500%. Nanoestructuras de las frecuencias de resonancia plasmónica variables selectivamente ampliar la foto-de grafeno a la luz de diferentes longitudes de onda, permitiendo la detección muy específica de múltiples colores. Ser atómicamente delgada, fotodetectores de grafeno efectivamente aprovechar el efecto local de la mejora plasmónica para lograr un factor de mejora significativa que normalmente no es posible con materiales semiconductores tradicionales planas.
Tie2 Dependiente De La Eliminatoria De HIF-1 Altera La Vascularización De Heridas Y Quemaduras De La Toma De Referencia Derivados De Médula ósea Células Angiogénicas
HIF-1 (HIF-1) es un heterodímero compuesto de subunidades de HIF-1a y HIF-1β. HIF-1 es conocido por promover la vascularización del tejido mediante la activación de la transcripción de genes que codifican los factores angiogénicos, que se unen a los receptores en las células endoteliales (ECS) y derivados de médula ósea (células angiogénicas BMDACs). En este estudio, hemos analizado si la actividad de HIF-1 en la EC y la respuesta BMDACs también es necesario para la vascularización cutánea durante la cicatrización de la quemadura.
La Subunidad Calcineurina B (CNB) Es Un Nuevo Ligando De La Integrina Que Media αM CNB-inducida Apo2L/TRAIL Expresión En Los Macrófagos
Hemos demostrado anteriormente que la subunidad B de calcineurina (CNB) juega un papel importante en la activación de los macrófagos peritoneales, pero el mecanismo subyacente sigue siendo desconocido. Para examinar si existe un receptor CnB en los macrófagos peritoneales, se realizó el ensayo de unión de radioligando de los receptores. La curva de saturación de unión al receptor de alta afinidad demostrada y unión específica; la unión máxima era 1090 fmol/10 (5) las células, y la K (d) pM era 70,59. Luego, se utilizó una resina de afinidad CnB para atrapar a los posibles receptores de la membrana peritoneal altamente purificada de macrófagos. Masa análisis de espectrometría mostró que la proteína de unión era ratón integrina αM. A continuación realizó un experimento de la competencia obligatoria para confirmar la unión de la CNB para la integrina αM. Esto demostró que FITC-CNB ligado específicamente a los macrófagos peritoneales y que la unión fue bloqueado por la adición de la integrina αM Ab. Hemos observado que CnB podría inducir la expresión de genes TRAIL en macrófagos peritoneales in vitro e in vivo. Integrina αM Ab bloqueo, interferencia de ARN, y los experimentos demostraron que los ligandos de la competencia inducida por la expresión CNB-TRAIL es dependiente de la integrina αM. Por otra parte, la actividad tumoricida de CNB-macrófagos peritoneales activados depende en parte de TRAIL. Además, el tratamiento CnB prolonga significativamente la supervivencia de ratones portadores de tumores ascitis H22, que tiene una correlación positiva con el nivel de inducción de TRAIL. Estos resultados revelan una nueva función de la CNB en la inmunidad innata y la vigilancia del cáncer. También apuntan a una nueva vía de señalización que conduce a la inducción de TRAIL y sugerir una posible aplicación de CNB en la terapia del cáncer.
