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- Transfección de células madre neurales humanas con el Nucleofector Amaxa
- Conteo de células madre neurales humanas
- Pases células madre neurales humanas
- Inmunocitoquímica: células madre neurales humanas
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Articles by Steven Marchenko in JoVE
JoVE General
Transfección de células madre neurales humanas con el Nucleofector Amaxa
Department of Pathology, University of California, Irvine (UCI)
La introducción de un gen de interés en una célula es un poderoso método para dilucidar su función en vivo. Este protocolo describe un método eficaz para la transfección de una cultura de derechos humanos madre neurales / células precursoras (hNSPCs) utilizando el aparato de electroporación Nucleofector hecha por Amaxa.
JoVE General
Conteo de células madre neurales humanas
Department of Pathology, University of California, Irvine (UCI)
El conocimiento del número exacto de células viables se requiere para muchos manipulaciones de cultivo de tejidos. Este protocolo describe cómo diferenciar entre células vivas y muertas y cuantificar las células usando un hemocitómetro. A pesar de que describe contar humana madre neurales / células precursoras (hNSPCs), que puede ser utilizado para otros tipos celulares.
JoVE General
Pases células madre neurales humanas
Department of Pathology, University of California, Irvine (UCI)
La capacidad de manipular humana madre neurales / células precursoras (hNSPCs) in vitro permite investigar su utilidad como los trasplantes de células con fines terapéuticos y para explorar el desarrollo neuronal humano. Este protocolo presenta un método de cultivo y hNSPCs pases con la esperanza de la reproducibilidad de cada vez mayor de la investigación con células madre humanas.
JoVE General
Inmunocitoquímica: células madre neurales humanas
Department of Pathology, University of California, Irvine (UCI)
Inmunocitoquímica es un poderoso método para determinar la presencia, localización subcelular, y la abundancia relativa de un antígeno de interés en células cultivadas. Este protocolo presenta una forma fácil de seguir una serie de medidas que permitan una para conservar los anticuerpos y sacar el máximo provecho de su coloración.
Other articles by Steven Marchenko on PubMed
Dielectroforesis De Doble Frecuencia Con Electrodos Interdigitados Paredes Laterales De Microfluidos De Flujo a Través De Separación De Cuentas Y Las Células
Este trabajo presenta un novedoso diseño y la estrategia de separación lateral para el flujo a través de la separación de las células y partículas en la microfluídica por dielectroforesis de doble acoplado frecuencia (DEP) habilitado por las fuerzas verticales electrodos interdigitados incrustados en las paredes laterales del canal. A diferencia de las separaciones campo de flujo-DEP de fraccionamiento en la microfluídica, que utilizan electrodos planos en el suelo de microcanal para generar una fuerza de DEP para equilibrar la fuerza gravitatoria y objetos separados en lugares diferentes de altura, la separación lateral está habilitado por la pared lateral electrodos interdigitados que se utilizan para generar no uniformes campos eléctricos y fuerzas equilibradas DEP a lo largo de la anchura de la microcanal. En el diseño actual, dos diferentes campos eléctricos de corriente alterna se aplica a dos tipos de conjuntos de electrodos interdigitados independientes fabricados en las paredes laterales del microcanal para generar las fuerzas diferenciales DEP que actúan sobre las células y partículas que fluyen a través. Las partículas individuales (células o perlas) experimentará fuerzas DEP diferente debido a la diferencia en sus propiedades dieléctricas. El equilibrio de las fuerzas DEP diferenciales de las matrices de electrodos se posicionará partículas disímiles en planos distintos de equilibrio en toda la anchura del canal. Cuando se combina con el flujo de fluido, esto resulta en la separación lateral a lo largo de la anchura de la microcanal y las partículas separadas por lo tanto se pueden dirigir automáticamente en las salidas de los canales ramificados que conducen a depósitos diferentes para el procesamiento aguas abajo. En este artículo se presenta el diseño y análisis de la separación lateral habilitada por doble frecuencia junto DEP, y la célula / talón y separaciones móviles / celular se ha demostrado con esta estrategia de separación lateral. Con verticales electrodos interdigitados sobre la pared lateral, la altura de la microcanal se puede aumentar sin perder la fuerza del campo eléctrico en contraste con otros varios dispositivos de frecuencia DEP con electrodos planos. Como resultado, las poblaciones de células se pueden separar simultáneamente en lugar de una por una para permitir que los dispositivos de alto rendimiento de clasificación de microfluidos.
