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CCT1, Ein Phosphatidylcholin-Biosynthese-Enzym Wird Für Drosophila Oogenese Und Eierstockkrebs Morphogenese Erforderlich

Tbx2b Ist Für Ultraviolette Photorezeptor Zelle Spezifikation Während Der Zebrafisch Retinalen Entwicklung Erforderlich

Die Wirbeltieren Stab und Kegel Photorezeptoren sind hoch spezialisierte sensorische Neuronen, die Licht in der chemischen und elektrischen Signale des Nervensystems zurückwirken. Obwohl die physiologischen Eigenschaften von Kegeln und Stangen gut bekannt sind, nur eine Handvoll Genen wurden identifiziert, die die Spezifikation der Photorezeptoren Subtypen zu regulieren. Unter Ausnutzung der Mosaik-Organisation von Lichtrezeptoren im Zebrafisch, teilen wir Ihnen die Isolation einer Mutation, die eine einzigartige Veränderung in Photorezeptoren Zelle Schicksal. Mutation des Orts viele der Stäbe (Lor) führt eine nahe eins-zu-eins-Umwandlung von UV-Kegel-Vorstufen in Stangen. Die transformierten Zellen aufweisen, morphologische Merkmale und ein-Gen-Expression-Muster typisch für Stangen, aber in einem zeitlichen und räumlichen Muster mit UV-Kegel-Entwicklung in Einklang zu unterscheiden. Mutant Larven und Erwachsene, das sehr geordnete Photorezeptor-Mosaik ist gepflegt und Entartung nicht eingehalten wird, was darauf hindeutet, dass Lor Funktionen nach der Spezifikation der andere Photorezeptoren Subtypen. In genetischer Chimären, Lor Funktionen Zelle-autonom in der Spezifikation der Photorezeptoren Zelle Schicksal. Linkage-Analyse und Prüfung von genetischen Komplementation hindeuten, dass Lor ein Allel des tbx2b/Fby (aus dem Jenseits). Fby wurde durch einen Zirbeldrüse komplexe Phänotyp identifiziert und trägt eine Mutation der Unsinn in die T-Box-Domäne des Transkriptionsfaktors tbx2b. Homozygote Fby mutant Larven und Lor/Fby Transheterozygotes zeigen auch viele der Stäbe-Phänotyp. Basierend auf diesen Daten, schlagen wir eine bisher unbeschriebene Funktion für tbx2b in Photorezeptoren Zelle Vorläufer, das UV-Kegel-Schicksal Förderung durch die Unterdrückung des Stab Differenzierung Weges.

Bucky Ball Organisiert Keim Plasm Assembly Im Zebrafisch

In vielen Tieren wird Gamet Bildung während der Embryogenese durch mütterliche zytoplasmatischen Determinanten genannt Keim Plasm angegeben. Während der Oogenese bildet Keim Plasm eine unterschiedliche Zellstruktur wie Pol Plasm in Drosophila oder Balbiani Körper, ein Aggregat von Organellen, die auch bei Säugetieren. Bei Wirbeltieren sind die wichtigsten Regulatoren der Keim Plasm Assembly jedoch weitgehend unbekannt. Hier zeigen wir, dass zu Beginn des Zebrafish Oogenese, der Keim Plasm Mangel bucky Ball (Buc) Mutanten vorangestellt den Verlust der Polarität, die darauf hinweist, dass Buc hauptsächlich Balbiani Körper Bildung steuert. Darüber hinaus identifizieren wir molekular das Buc-gen, das ausschließlich im Eierstock mit einem neuartigen, dynamische mRNA Lokalisierung Muster zuerst nachweisbar im Körper Balbiani ausgedrückt wird. Wir finden, dass eine Buc-GFP-Fusion der Balbiani Stelle während der Oogenese und mit der Germ Plasm während der frühen Embryogenese, mit einer Rolle in der Bildung der Keim Plasm lokalisiert. Interessanterweise scheint eine Überexpression von Buc ektopische Keimzellen im Zebrafish Embryos zu generieren. Da wir Buc UCP1 in vielen Wirbeltieren Genome entdeckten, einschließlich Säugetiere, identifizieren diese Ergebnisse Buc, als das erste Gen notwendig und ausreichend für Keim Plasm Organisation bei Wirbeltieren.

Microtubule-Aktin-Vernetzung-Faktor 1 Regelt Die Balbiani Körper Und Tier-pflanzliche Polarität Der Zebrafisch-Eizelle

Obwohl von grundlegender Bedeutung in der Entwicklungsbiologie, die genetische Grundlage für die Symmetrie brechen Ereignissen, die die vertebrate Eizelle und Ei polarisieren sind weitgehend unbekannt. Bei Wirbeltieren die erste morphologische Asymmetrie in der Eizelle ist Balbiani Körper, eine stark konservierte, vorübergehende Struktur gefunden in Wirbeltiere und Wirbellose einschließlich Drosophila, Xenopus, Mensch und Maus. Wir berichten über die Identifizierung von der Zebrafisch Magellan (Mgn) Mutant, der Roman zwar vergrößerte Balbiani Körper Phänotyp und eine Unterbrechung der Eizelle Polarität. Um zu bestimmen, die molekulare Identität des Gens Mgn, geklont wir positionsbezogen gen, beschäftigt eine neuartige DNA-Capture-Methode regionsspezifische genomischen DNA von 600 kb für massiv parallele Sequenzierung als Ziel. Mit diesem Verfahren konnten wir dann die Mutation in Mgn mit massiv parallelen Sequenzierung zu identifizieren und für die genomische Region verknüpft zu unseren Mutation innerhalb einer Woche bereichern. Dies ist einer der ersten erfolgreichen Verwendungen der genomischen DNA-Anreicherung kombiniert mit massiv parallelen Sequenzierung die molekulare Identität ein Gen mit einem mutierten Phänotyp bestimmen. Wir erwarten, dass die Kombination dieser Technologien breite Anwendbarkeit für eine effiziente Ermittlung der mutierten Gene in allen Organismen haben wird. Wir haben die Mutation in Mgn identifiziert, wie Löschung in der kodierende Sequenz die Zebrafish Microtubule Aktin Vernetzung Faktor 1 (macf1)-Gen. macf1 ist ein Mitglied der Familie stark konservierten Spectraplakin Zytoskelett Linker Proteine, die unterschiedliche Rollen in polarisierten Zellen wie Neuronen, Muskelzellen und Epithelzellen zu spielen. In Mgn Mutanten ist der Kern der Eizelle mislocalized; und Körper Balbiani, lokalisierte mRNAs und Organellen Fehlen von der Peripherie der Eizelle, konsistent mit einer Funktion für macf1 in nuklearen verankern und kortikale Lokalisierung. Diese Daten liefern die erste Beweise für eine Rolle für Spectraplakins in der Polarisation des vertebrate Eizelle und Ei.

'ZP Domäne' Des Menschlichen Zona Pellucida Glykoprotein-1 Bindet an Menschliche Samenzellen Und Acrosomal Exozytose Induziert

Das Fell der menschlichen Eizelle, Zona Pellucida (ZP), besteht aus vier Glykoproteinen bzw. als Zona Pellucida Glykoprotein-1 (ZP1),-2 (ZP2), (ZP3)-3 und-4 (ZP4) bezeichnet. Die Zona Proteine besitzen die archetypische 'ZP Domain', eine Signatur-Domäne umfasst rund 260 Aminosäurereste (aa) um. Im vorliegenden Manuskript wurden Versuche unternommen, um die funktionelle Bedeutung des Moduls 'ZP Domäne' der menschlichen ZP1, 273-551 aa Fragment des menschlichen ZP1 entspricht voneinander abzugrenzen.

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