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Articles by Yonggang Zhu in JoVE

 JoVE Bioengineering

L'augmentation des rendements d'ADNc de cellule unique quantités d'ARNm dans les réactions de laboratoire standard de la transcriptase inverse en utilisant Microstreaming acoustique


JoVE 3144 7/11/2011

1Florey Neuroscience Institutes and Centre for Neuroscience, University of Melbourne, 2Fluid Dynamics Group, CSIRO Materials Science and Engineering, 3Swinburne University of Technology, Faculty of Engineering and Industrial Sciences

Nous décrivons une nouvelle méthode pour augmenter le rendement d'ADNc de cellule unique quantités d'ARNm dans les réactions de laboratoire standard de transcription inverse contraire. La nouveauté réside dans l'utilisation d'un micromélangeur, qui utilise le phénomène de la microstreaming acoustique, de mélanger les liquides à l'échelle du microlitre plus efficacement que secouer, vortex ou trituration.

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Potentiel De Dépôt Effectif Induite Par La Croissance D'orientation Selon La Taille Des Tableaux De Nanofils Alliage Bi-Sb

L'influence du potentiel de dépôt efficace sur l'orientation et le diamètre des baies nanofil de Bi (1-x) Sbx alliage, par technique d'électrodéposition pulsé a été signalé. Diffraction des rayons x, microscopie électronique à balayage-émission de champ et transmission electron microscopy analyses montrent que l'orientation des Bi (1-x) Sbx nanofils peut être activée de la [110] à la direction [202] en augmentant le potentiel efficace de dépôts, et les nanofils de remplir complètement les pores de l'AAM dans la région du bas potentielle, tandis que dans la région de potentiel plus élevée, les nanofils combler partiellement les pores de l'AAM. L'origine de ces phénomènes et le mécanisme de croissance de la NANOFIL sont discutés avec l'analyse de la composition.

Propriétés Thermiques Des Tableaux De Nanofils Bi Avec Différentes Orientations Et Diamètres

On a étudié les propriétés thermiques des baies de NANOFIL monocristallin Bi avec des orientations différentes et des diamètres calorimètre différentiel à balayage et à hautes températures in situ par diffraction des rayons x. Nanofils bi ont été fabriquées par une technique d'électrodéposition pulsé dans la membrane poreuse alumine anodique. Les relations entre l'orientation et le diamètre des nanofils de Bi et les propriétés thermiques correspondantes sont déduites uniquement à partir de résultats expérimentaux. Il est démontré que le point de fusion diminue avec une diminution de diamètre de nanofils et il existe une propriété d'une dilatation thermique anisotrope de nanofils Bi avec des orientations différentes et diamètres. La transition de la coefficient de dilatation thermique du positif à basse température à la borne négative à haute température pour les tableaux de nanofils Bi a été analysée et discutée.

Détection De 100 AM Fluorophores L'aide D'un Haute Sensibilité Du Système Sur Puce CE Et Isotachophorèse Transitoire

Nous présentons une électrophorèse capillaire très sensible (CE) test qui combine transitoire, seule l'interface sur puce isotachophorèse (ITP) et une configuration induite par laser confocal détection par fluorescence. Nous avons effectué des études expérimentales paramétriques pour montrer les effets de spécifications objectif de microscope et de l'intensité du laser d'excitation sur l'optimisation d'une grande sensibilité sur puce système de détection CE. En utilisant le système de détection optimisé, une seule molécule de détection d'Alexa Fluor 488 a été démontrée, et les données de signal ont été validés avec l'analyse d'autocorrélation. Nous avons également fait preuve d'une séparation et de détection de 100 fluorophores aM (Alexa Fluor 488 et bodipy) dans un test rapide en utilisant une sensibilité élevée sur puce système de détection CE et d'un protocole ITP / CE sans étapes manuelles de change tampons. C'est, à la connaissance des auteurs, la sensibilité la plus élevée jamais enregistrée séparation électrophorétique.

Technologies De Lab-on-a-chip Compartimentation in Vitro Pour Des études De Protéine

Compartimentation in vitro (IVC) est un outil puissant pour l'étude des réactions de protéine-protéine, en raison de sa grande capacité et la polyvalence des technologies de la gouttelette. IVC comble le fossé entre la chimie et la biologie car elle permet l'incorporation des acides aminés non naturels avec des modifications dans les systèmes biologiques, par le biais de réactions de transcription et la traduction protéique, dans un environnement de microdrop alvéolaire. La quête de la puce ultime pour les études de la protéine à l'aide de IVC est le lecteur pour le développement de diverses technologies de gouttelettes microfluidiques pour permettre ces inhabituelle des réactions biochimiques se produisent. Ces techniques ont démontré que générer des microgouttes précis avec un volume contrôlé. Divers phénomènes physiques et chimiques ont été utilisés pour la manipulation sur puce permettre les gouttelettes à être générée, fusionnés et diviser. Couplé avec les techniques de détection, les gouttelettes pouvant être triées et sélectionnés. Ces fonctionnalités permettent évolution dirigée de protéine à effectuer sur une micropuce. Outre l'évolution technologique du module de détection, facteurs tels que stockage adressable, transport ainsi que leur interfaçage technologies, pourrait être intégrée et ainsi fournir plates-formes pour des études de protéine haute efficacité et de précision que les laboratoires classiques ne peuvent pas atteindre.

Une Ondelette Continue De Transformer Algorithme Pour La Détection De Pics

Technologie de détecteur de conductivité sans contact présente des avantages uniques pour les applications de la microfluidique. Toutefois, la faible base S/N et divers rend difficile l'analyse de signal. Dans cet article, un algorithme de détection de pointe axée sur la transformation par ondelettes continues a été développé pour les signaux de CE de puces microfluidiques. L'algorithme de détection de pointe de charrue à billon est basé sur l'algorithme de MassSpecWavelet par Du et al., [bioinformatique 2006, 22, 2059-2065] et effectue une transformée en ondelettes continue des données, en utilisant une ondelette proportionnelle à la dérivée première d'une fonction gaussienne. Il forme des séquences de locaux maxima et minima dans la transformée en ondelettes continue, avant d'appairer les séquences des maxima à minima pour définir des pics. L'algorithme de détection de pointe a été testé contre le Cromwell, MassSpecWavelet et laser assistée par matrice linéaire algorithmes de signal de crête et la Classification de desorption ionisation-temps-de-vol-spectromètre de masse à l'aide de données expérimentales. Sa sensibilité à la courbe de taux de fausse découverte est supérieure aux autres techniques testées.

MICROMÉLANGE Chaotique Dans Les Puits Ouverts à L'aide De Micro-courants Acoustique Audiofréquences

Mélange de fluides pour des épreuves biochimiques est problématique lorsque les volumes sont très faibles (de l'ordre du microL 10 typique de gouttes unique), qui a inspiré le développement de nombreux dispositifs de MICROMÉLANGE. Dans cet article, nous montrons que MICROMÉLANGE est possible dans les puits ouverts simples de consommables de laboratoire standard en utilisant des fréquences acoustiques appropriées qui peuvent être appliquées à l'aide de composants audio conventionnelles, à peu de frais. Travaux antérieurs a montré que le phénomène des micro-courants acoustique peut mélanger des fluides, pourvu que les bulles sont introduits dans un microchamber spécialement conçu ou que les dispositifs de haute fréquence onde acoustique de surface sont construits. Nous démontrons une simplification clée : MICROMÉLANGE acoustique aux fréquences audio en s'assurant que le système a une interface air-liquide avec un petit rayon de courbure. Le ménisque d'une goutte dans un petit bien fourni un bien petit rayon, et une bulle introduite n'était donc pas nécessaire. Micro-courants a montré une amélioration plus diffusion-basé de mélange de 1-2 ordres de grandeur. En outre, des améliorations significatives sont réalisables grâce à l'utilisation des principes de mélange chaotiques, par lequel des modèles d'écoulement de fluide alternant sont créés par l'application, dans l'ordre, deux fréquences acoustiques différentes à une goutte de liquide dans un puits ouvert.

Cavitation Stress Et Micro-courants Champs Créés Par Microbulles

Cavitation micro-courants joue un rôle dans l'action thérapeutique des microbulles pilotée par ultrasons, tels que les phénomènes sonoporative et sonothrombolytic. Expériences de microscopiques particules-image velocimetry sont présentés. Les résultats montrent que beaucoup de modèles différents de micro-courants est possibles autour d'un microbulles lorsqu'il est sur une surface, quoique pour des microbulles beaucoup plus volumineux qu'utilisés en pratique clinique. Chaque modèle est associé à un mode particulier d'oscillation de la bulle, et alterner entre les modes est obtenue en changeant la fréquence sonore. Chaque modèle de micro-courants génère également les différentes contraintes de cisaillement et des distributions d'étirement/compression à proximité d'une bulle sur un mur. Analyse des résultats micro-PIV montre également que les mouvements de micro-courants pilotée par ultrasons autour de bulles sont des mécanismes possibles pour mélange d'agents thérapeutiques dans le sang environnant, mais aussi aider sonoporative livraison des molécules à travers les membranes cellulaires. Modèles montrent des variations importantes autour de la bulle, suggérant des sonoporation peuvent être améliorés ou inhibé dans différentes zones dans l'ensemble de la surface cellulaire. Ainsi, en alternant les motifs peut entraîner sonothrombolysis et sonoporation améliorée. La délimitation claire et reproductible des micro-courants modèles basés sur la fréquence de conduite fait alternance modèle basé sur les fréquences une alternative possible à la pratique clinique moins souhaitable d'accroître la pression acoustique pour des effets équivalents de sonoporative ou sonothrombolytic. Divergence de surface est proposé comme une mesure pertinente à sonoporation.

Vous Inquiétez Pas Pour Les Dispositifs De Lab-on-a-chip - Tendances Actuelles Et Perspectives D'avenir

Cet examen porte sur l'utilisation de Förster Resonance Energy transfert (FRET) pour surveiller intra - et intermoléculaires réactions qui se produisent dans les réacteurs de la microfluidique. Dispositifs microfluidiques ont récemment été utilisés pour effectuer des dosages biologiques hautement efficaces et miniaturisés pour l'analyse des entités biologiques telles que les cellules, les protéines et les acides nucléiques. Essais de microfluidique sont caractérisent par nanolitre femtolitre volumes de réaction, ce qui rend nécessaire l'adoption d'un système de détection optique sensible. FRETTE sert un fort « spectroscopique souverain » pour élucider la structure tertiaire des biomolécules, comme l'efficacité du transfert d'énergie non radiatif est extrêmement sensible aux changements d'échelle nanométrique dans la séparation entre les marqueurs donneur et accepteur, attaché à la biomolécule d'intérêt. Dans cette revue, nous passerons en revue la mise en œuvre de divers essais de microfluidique qui emploient la frette pour diverses applications dans le domaine biomédical, ainsi que les avantages et inconvénients des différentes approches. Les perspectives d'avenir pour le développement de dispositifs microfluidiques intégrant la détection de FRET seront discutées.

Gestion De La Diffusion De 4-méthylumbelliférone à Travers Les Phases Dans Les Systèmes Microgouttelettes D'évolution Des Protéines in Vitro

Réactifs Fluorongenic basés sur 4-méthylumbelliférone (4-MU) ont été employé couramment pour la détection des activités de la phosphatase, sulfatase, estérase, lipase et glycosidase dans les systèmes de dosage enzyme classiquement mise en forme. Cependant, la sensibilité des tests basés sur ces substrats est aussi potentiellement très utile dans les formats de microgouttelettes en cours d'élaboration pour le haut débit dans des expériences in vitro évolution. Dans cet article, nous rapportons l'enquête de la diffusion de 4-MU comme colorant modèle de gouttelettes d'eau dans l'huile et la phase aqueuse interne de gouttelettes d'eau-dans-huile-dans-eau en microfluidique. On discute également l'effet de BSA dans la phase aqueuse sur la diffusion de 4-MU. Selon ces résultats, nous avons fourni ici de validation de la réaction de l'enzyme OpdA avec le coumaphos de substrat dans les gouttelettes d'eau-dans-huile-dans-eau. Dans ce système de double-émulsion, la réaction de OpdA et coumaphos a été atteint en autorisant le coumaphos à diffuser de la phase aqueuse continue à travers la phase huileuse dans les gouttes de solution aqueuses internes.

Électronique De Température Et De Densité-dépendance De Relaxation De Spin Dans Le Puits Quantique De GaAs/AlGaAs

Résumé : Température et transporteur dynamique dépendant de la densité de spin pour puits quantiques de GaAs/AlGaAs (QWs) avec différentes symétries structurels ont été étudiée en utilisant la technique de rotation Kerr de résolution temporelle. Le temps de relaxation de spin est mesuré pour être beaucoup plus longue pour le QW GaAs symétriquement conçu en comparant avec celle asymétrique, indiquant la forte influence du Rashba couplage de spin-orbite sur la relaxation de spin. D'yakonov-Perel' mécanisme a été révélé pour être la contribution dominante pour la relaxation de spin dans GaAs/AlGaAs QWs. Le temps de relaxation spin expose le comportement non monotone-dépendant de la température et la densité des porteurs de photo-excité, révélant le rôle important de la dépendance de la température et de densité non monotone de diffusion coulombienne électron-électron. Nos observations expérimentales montrent le bon accord avec la théorie de relaxation spin récemment développés basée sur spin cinétique microscopique approche équation Bloch.

Détection Sensible Microfluidique Exempte D'étiquette Axée Sur Les Oligonucléotides D'ions De Mercure (II) à L'aide D'exonucléase J'ai

Le mercure est un métal très toxique qui peut causer des dommages significatifs pour les humains et les écosystèmes aquatiques. Cet article décrit une nouvelle approche pour le mercure (détection des ions Hg(2+)) à l'aide de sondes oligonucléotidiques exempte d'étiquette et l'Escherichia coli exonucléase j'ai (Exo je) dans une plateforme séparés électrophorétique microfluidiques. Deux ADN (ADN simple brin) TT-21 monocaténaire et TT-44 avec 7 ont Thymine-Thymine sont utilisés pour rendre les ions de mercure. En raison de la structure de coordination de la TT-Hg(2+), ces ssDNAs sont pliées en épingle à cheveux-comme bicaténaire ADN (dsDNA) qui est plus difficiles à être digérées par Exo I, tel que confirmé par l'analyse de gel de polyacrylamide (PAGE) de l'électrophorèse. Une série d'études de séparation par électrophorèse capillaire microfluidiques sont réalisées pour étudier l'effet des Exo j'et mercury concentrations ioniques sur l'intensité de la fluorescence détectée. Cette méthode a démontré une grande sensibilité de détection des ions mercure avec la limite de détection autour de 15 nM ou 3 ppb. Une excellente sélectivité de la sonde pour les ions de mercure au cours de cinq ions d'interférence Fe(3+), Cd(2+), Pb(2+), Cu(2+) et Ca(2+) se révèle aussi. Cette méthode pourrait potentiellement être utilisée pour la détection des ions mercure avec fiabilité et haute sensibilité.

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