Summary
微接触印刷被广泛使用模式的蛋白质和其他分子在材料表面。我们展示这一过程的基本步骤，冲压到玻璃纤维连接蛋白的模式。
Abstract
Protocol
1。解决方案和材料的制备
这些步骤应该进行提前几天。
- 盖玻片。盖玻片清洗浸泡10分钟到一个解决方案Linbro 7X清洁剂：水混合1：3的比例和加热，搅拌，直到明确。盖玻片被广泛冲洗去离子水，然后在450℃烘烤6小时。装入陶瓷染色架盖玻片（见试剂）简化了这个过程。
- 蛋白质溶液冲压。重组纤维连接蛋白的1 mg / ml浓度的原液制造商的说明。
2。从拓扑主演员邮票
这些步骤可以进行提前几天。商店邮票图案在有盖菜，如组织培养皿。
- 使用压缩，过滤空气或惰性气体流，删除主浮尘。
- 广场主图案的一面，在一个塑料盘仅比主底部。 60 - 100毫米组织培养皿非常适合用于这一目的。
- 聚苯乙烯50 mL离心管，在固化剂的比例结合Sylgard组件：1：10的橡胶基地重量。调匀使用塑料的设备，如一次性吸管。准备好至少0.2毫升弹性体每平方厘米的菜面积。
- 300 G 50毫升管离心5分钟，以去除气泡。
- 倒在主的弹性，然后放置在干燥器中，在真空条件下，30分钟。
- 烘箱中固化在65℃至少2个小时的弹性。固化在更高的温度和更长的时间，结果更严厉的弹性。让冷却到室温。
- 从主分离的邮票纸。
3。微接触印刷到玻璃纤维连接蛋白
- 切出单枚邮票。邮票测量4毫米x 4毫米至1厘米× 1厘米，面积1 - 2毫米厚的最简单的开始。广场图案的一面，在玻片上或小塑料盘。
- 放置在等离子体清洁和过程的邮票，在真空条件下，30秒。一个科学Harrick等离子清洗器（设备），其最高输出设置渲染的PDMS表面的亲水性。更长的时间，在弹性体开裂。
- 用去离子水稀释到一个冲压浓度为50微克/毫升的纤维连接蛋白的解决方案。
- 将一小滴（10 - 50μL）冲压邮票上的解决方案。将分散在亲水表面。只添加足够的解决方案，下降涵盖了邮票，但不超过边缘运行。让蛋白质吸附邮票5分钟。
- 使用Kimwipe ®或其他清洁纸巾，灯芯从邮票大部分蛋白质溶液，而不触及图案的区域。
- 下一个清洁，干燥，惰性气体，如氮，流干从邮票的解决方案。
- 使用镊子，取出载玻片邮票，反转，并在清洗玻璃盖玻片（表面图案）接触的地方。放置在顶部的重量，以促进良好的接触。具体的重量，提供了最好的图案是邮票大小和图案的依赖;开始用5克重，和调整之间的冲压件。离开邮票与表面1分钟接触。
- 仔细拆解堆栈，并从盖玻片单独的邮票。
- 大力漂洗，去离子水，在PBS图案盖玻片删除不被吸附到表面的蛋白质，是。干盖玻片下氮气流。
代表性的成果
微接触印刷是表面上的图案分子的强大的过程。这个过程有能力创造，从几十微米到几百纳米的尺寸不等的功能;图。 1A，在左边的标志是每200微米的高度，而绿色的点如图所示。 1B是直径在1微米，间距4微米的间隔，测量中心到中心。图1B也说明了微接触印刷的强大属性，即它是和添加剂的过程。微接触印刷的多轮可用于创建一个表面多组分体系 3 。
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Discussion
微接触印刷过程的概念很简单，非常强大的，已被应用于各种基材上的广泛的分子图案。然而，这个过程仍然是一门艺术的东西。创建，该模式的具体几何图案的蛋白质，适用于重量，和涂料/冲压条件都影响冲压件的质量。例如，过小，重量轻，适用于大的特点，往往在模式中的正确的标志在图上可以看到差距的结果。 1A。相反，过多的重量会导致下垂和邮票的崩溃，造成意想不到的沉积蛋白质在图案之间的地区features.As第二个例子，特定的蛋白质（如抗体）与更好的保真度格局如果省略等离子体处理步骤，使PDMS的亲水性。冲压到玻璃纤维连接蛋白在这里作为一个起点，这样的修改和优化，展示这一过程的基本技术。
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Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Plasma Cleaner | Harrick Scientific Products, Inc. | PDC-32G | ||
| Desiccator | Nalge Nunc international | 5315-0150 | ||
| PBS | Reagent | Invitrogen | 10010-072 | |
| Protein labeling kit | Reagent | Invitrogen | A30006 | |
| Fibronectin | Reagent | Sigma-Aldrich | F2006 | |
| Staining rack | Reagent | Thomas Scientific | 8542E40 | |
| Coverslips | Reagent | Fisher Scientific | 12-544-12 | |
| Sylgard 184 | Reagent | Ellsworth Adhesives | 184 Sil Elast Kit | |
| Diffraction Grating | Reagent | Edmund Scientific | 3040267 |
References
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