Biology

Blutdruckmessung in Mäuse mit Volume Druck Recording, ein Tail-Manschette Methode

Published: May 15, 2009 doi: 10.3791/1291

Alan Daugherty¹, Debra Rateri¹, Lu Hong¹, Anju Balakrishnan¹

¹Cardiovascular Research Center, University of Kentucky

Summary

Die CODA 8-Kanal High-Throughput-Non-Invasive Blood Pressure System misst den Blutdruck in bis zu 8 Mäuse oder Ratten gleichzeitig. Dieser Schwanz-Manschette System nutzt Volume Druck Recording (VPR), um den Blutdruck durch die Bestimmung der Schwanz Blutvolumen messen.

Abstract

Die CODA 8-Kanal High-Throughput-Non-Invasive Blood Pressure System misst den Blutdruck in bis zu 8 Mäuse oder Ratten gleichzeitig. Die CODA tail-cuff-System verwendet Volume Druck Recording (VPR), um den Blutdruck durch die Bestimmung der Schwanz Blutvolumen messen. Eine speziell entwickelte Differenzdruck-Messumformer und eine Okklusion tail-cuff messen die gesamte Blutvolumen in den Schwanz, ohne die Notwendigkeit, die einzelnen Pulse Signal zu erhalten. Besonderes Augenmerk wird auf die Länge der Okklusion Manschette gewährt, um daraus die genauesten Blutdruckwerte. VPR kann leicht zu erhalten Lesungen auf dunkelhäutige Nagetiere wie Mäuse C57BL6 und MRI-kompatibel. Die CODA-System bietet Ihnen mit Messungen von sechs (6) verschiedene Parameter Blutdruck, systolischer und diastolischer Blutdruck, Herzfrequenz, der mittlere Blutdruck, Schwanz Durchblutung und Schwanz Blutvolumen. Die Messungen können entweder wach oder narkotisierten Mäusen oder Ratten durchgeführt werden. Die CODA-System enthält eine Steuereinheit, Laptop-Computer, Software, Manschetten, Tierhaltung, Infrarot-Wärmekabine Pads und einem Infrarot-Thermometer. Es gibt sieben verschiedene Halter Größen für Mäuse so klein wie 8 Gramm an Ratten so groß wie 900 Gramm.

Protocol

Ausrüstung Set-up
1. Wählen Sie einen Bereich in dem Labor, in dem die Raumtemperatur bei oder über 20 ° C.
2. Vermeiden Sie Orte in der Nähe Luftdüsen und / oder laute Geräusche.
3. Vermeiden Sie es, das Tier, um Gerüche, die Hautreizungen und / oder Stress verursachen, wie Parfüm, Eau de Cologne, Chemikalien und Reinigungsmittel können.
4. Schalten Sie den CODA-Controller.
5. Schalten Sie den Warming-Plattform und auf Level 3. Wenn die Raumtemperatur über 25 ° C, auf Stufe 1 oder 2 zu beginnen.
6. Controller Diagnostics-Test
  1. Öffnen Sie die CODA-Software.
  2. Wählen Sie die CODA-Gerät, indem Sie auf sie.
  3. Klicken Sie auf "Test Selected Device".
  4. Wählen Sie die Manschetten und Kanäle zu testen, und klicken Sie auf "Test".
  5. Nach der Test abgeschlossen ist, schließen Sie das Device Test-Fenster.
Software Set-up
1. Verwalten Personal und Tiere
  1. Verwalten Personal
    1. Wählen Sie Extras> Personal.
    2. Klicken Sie auf "Researcher 1", um den Namen zu ändern.
    3. Klicken Sie auf nachfolgenden Zeilen, um weitere Forscher hinzu.
    4. Klicken Sie auf "Techniker Tab" zu ändern oder zu ergänzen Techniker.
    5. Klicken Sie auf "Proben Tab", um das Tier für eine einfache Identifizierung Name und das Tier auszuwählen; Ratte oder Maus.
    6. Klicken Sie auf "Animals Tab", um die Tierart und die Empfindlichkeit zu verändern.
2. New Experiment
  1. Wählen Sie Datei> Neu> Experiment
  2. Beginnen Sie ein neues Experiment
    1. Geben Sie den Namen Experiment.
    2. Wählen Sie den Key Researcher.
    3. Wählen Sie ein Startdatum und klicken Sie auf "Weiter".
  3. Grundlegende Session Info
    1. Geben Sie die Session Name
    2. Set "Akklimatisierung Cycles" bis 5. Wenn Sie nicht mit Akklimatisierung Zyklen, auf Null gesetzt sind bevorzugen. Um mit acclimating das Tier an den Halter und Manschetten zu unterstützen, zusätzliche Zyklen zu Ihrem Experiment und führen Sie das Experiment an 5 aufeinander folgenden Tagen.
    3. Set "Anzahl der Sätze" auf 1.
    4. Set "Time Between Sets" bis 30 Sekunden für mehrere Sätze
    5. Set "Zyklen pro Set" bis 20 Zyklen.
    6. Set "Zeit zwischen den Zyklen" auf 5 Sekunden und klicken Sie auf "Weiter".
3. Specimen Selection
  1. 1. Wählen Sie die Probe aus der Probe Pool und weisen es der erste verfügbare Kanal und klicken Sie auf "Weiter".
  2. Session-Parameter
    1. Set "Maximum Occlusion Pressure" auf 250mmHg.
    2. Set "Deflation Time" bis 20 Sekunden für Mäuse, 15 Sekunden für Ratten.
    3. Set "Minimum Volume" auf 15ul.
    4. Set "Display Style" zu einem Kanal pro Grafik.
    5. Fügen Sie zusätzliche Forscher und Techniker aus und klicken Sie auf "Weiter".
  3. Session Script
    1. Überprüfen Sie die Session Script und klicken Sie auf "Weiter".
    2. Wählen Sie nicht Fertig, bis Sie das Tier Vorbereitung Abschnitt abzuschließen.
Tierische Vorbereitung
1. Tierische Set-up
  1. Tierhalter
    1. Zu trainieren und zu verbessern Tier Akklimatisierung, fügen Sie weitere Zyklen, Ihr Experiment und führen Sie das Experiment an fünf aufeinanderfolgenden Tagen. Sie können auch mit Akklimatisierung, indem das Tier in die Halterung für 15 Minuten an 3 aufeinanderfolgenden Tagen vor dem eigentlichen Studium zu unterstützen.
    2. Legen Sie für jedes Tier in einer Halterung, indem Sie den Tier am Schwanz und sanftes Auflegen das Tier in den hinteren Teil der Halterung, die das offene Ende des Nasenkonus Gesichter. Hinweis: die Größe des Tieres in Bezug auf die Größe der ausgewählten Halter. Das Tier sollte in der Lage, frei zu geben den Halter.
    3. Sorgfältig sichern die Heckklappe an den Inhaber durch Drehen des roten Schraubverschluss auf der Heckklappe. Es ist darauf zu vermeiden, Einklemmen des Schwanzes oder andere Körperteile bei gleichzeitiger Sicherstellung der Heckklappe werden.
    4. Schieben Sie die Bugspitze auf der Heckklappe, die Begrenzung der Bewegung des Tieres. Die Nase Kegel sollten in der Lage, das Tier von sich umzudrehen, während im Inneren des Halters zu begrenzen.
    5. Platzieren Sie die Halterung auf die Erwärmung Plattform in der dafür vorgesehenen Stelle. Wenn der Test die gleiche Gruppe von Tieren über einen Zeitraum von Zeit, sicher sein, auf den Inhaber Position auf die Erwärmung Plattform drehen, um die Konsistenz und Genauigkeit der BP-Messungen zu verbessern. Lassen Sie das Tier mindestens 5-Minuten, um die Halterung zu akklimatisieren zu.
    6. Nicht berühren oder Griff des Tieres, während im Inneren des Halters. Die vermehrte Kontakte konnte reizen das Tier.
    7. Lassen Sie das Tier in den Inhabern unbeaufsichtigt.
  2. Cuff Placement
    1. Sichern Sie die "Occlusion Manschettenschlauch" in die Kerbe am oberen Rückseite des Halters.
    2. Thema der Schwanz durch die "VPR Cuff", indem es innerhalb von 2 mm von der "Occlusion Cuff".
    3. Sichern Sie die "VPR Manschettenschlauch" in die Kerbe am oberen Rückseite des Halters.
    4. Befestigen Sie die Manschette auf die CODA-Controller.
  3. Tierische Temperatur
    1. Lassen Sie das Tier mindestens 5-Minuten thermoregulate.
    2. Notieren Sie die Temperatur des Tieres häufig mit einem Infrarot-Thermometer. Das Tier Temperatur sollte 32 bis 35 ° C werden
Experiment
1. Begin Experiment
  1. Klicken Sie auf "Fertig stellen" und das Experiment beginnt sofort.
2. End Experiment
  1. Tier
    1. Entfernen Sie unverzüglich die Tiere aus den Manschetten und Halter.
    2. Zurück das Tier zu ihrem Käfig nach der "Simple Session Summary Report" angezeigt wird.
  2. Data Collection
    1. Nach Abschluss des letzten Zyklus der akzeptierten Zyklen automatisch in Spreadsheet-Format innerhalb der CODA-Anwendung angezeigt werden, auf der "Export to Excel" klicken.
    2. Wählen Sie den Ordner, um die Datei vorhanden, benennen Sie die Datei und klicken Sie auf "Speichern".
    3. Öffnen Sie die Excel-Anwendung und klicken Sie auf "Öffnen".
    4. Alle Dateitypen, die ". Csv-Datei gespeichert"-Display, auf die Datei.
  3. Data Processing
    1. Es gibt mehrere Möglichkeiten, um die Daten in der Excel-Datei zu verarbeiten. Eine gängige Praxis ist, die durchschnittliche und die Standardabweichung zu erhalten.
    2. Löschen Messungen, wenn die Standardabweichung größer als 30 ist.
    3. Darüber hinaus kann abgelehnt Zyklen angesehen werden und die gesamte Datenbank kann einfach nach Excel exportiert werden. Wenden Sie sich an die Bedienungsanleitung für weitere Informationen.