Biology

ボリューム圧力記録、テールカフ法を用いたマウスにおける測定血圧

Published: May 15, 2009 doi: 10.3791/1291

Alan Daugherty¹, Debra Rateri¹, Lu Hong¹, Anju Balakrishnan¹

¹Cardiovascular Research Center, University of Kentucky

Summary

CODA 8チャンネル高スループット非観血式血圧のシステムは、同時に最大8匹のマウスまたはラットの血圧を測定します。このテールカフシステムは、尾の血液量を決定することにより血圧を測定するためにボリュームプレッシャーレコーディング（VPR）を使用しています。

Abstract

CODA 8チャンネル高スループット非観血式血圧のシステムは、同時に最大8匹のマウスまたはラットの血圧を測定します。 CODAテールカフシステムは、尾の血液量を決定することにより血圧を測定するためにボリュームプレッシャーレコーディング（VPR）を使用しています。個々のパルス信号を取得することなく、特別に設計された差圧変換器と閉塞尾袖口の測定尾の総血液量。特別な注意は、最も正確な血圧測定値を導出するために、閉塞のカフの長さに与えられる。 VPRは簡単にそのようなC57BL6マウスのような浅黒い肌げっ歯類、上に測定値を取得し、互換性のあるMRIですできます。 CODAのシステムは、6（6）別の血圧パラメータの測定をご提供します。収縮期および拡張期血圧、心拍数、血圧、尾の血流、および尾部の血液量を意味する。測定は、目を覚ましたり、麻酔したマウスまたはラットのいずれかで行うことができます。 CODAのシステムは、コントローラ、ラップトップコンピュータ、ソフトウェア、袖口、動物の所有者、赤外線加温パッド、および赤外線温度計が含まれています。 900グラムと同じ大きさのラットに8グラムのような小さなマウスのための7つの異なるホルダーのサイズがあります。

Protocol

セットアップ機器
1. 室温が20℃以上であるラボのエリア℃を選択します。
2. エアコンの通気口および/または大きな音近くは避けてください。
3. そのような香水、オーデコロン、化学薬品、および洗剤のように、刺激および/またはストレスの原因となる臭いに動物を放置しないでください。
4. CODAのコントローラをオンにします。
5. 温暖化プラットフォームをオンにして、レベル3に設定します。室温が25℃を超える場合は、レベル1または2で開始します。
6. コントローラ診断テスト
  1. CODAのソフトウェアを開きます。
  2. それをクリックして、CODAのデバイスを選択してください。
  3. "テストの選択したデバイス"をクリックしてください。
  4. "Test"をテストし、クリックして袖口とチャンネルを選択します。
  5. テストが完了したら、デバイステストウィンドウを閉じてください。
セットアップソフトウェア
1. 人事や動物を管理する
  1. 人事を管理する
    1. [ツール]>人事管理。
    2. 名前を変更する"研究1"をクリックしてください。
    3. 追加の研究者を追加するには、後続の行をクリックしてください。
    4. 技術者を変更または追加するには、"技術者のタブ"をクリックしてください。
    5. ラットやマウス、識別しやすいように動物の名前を指定すると、動物の種類を選択するには"標本のタブ"をクリックしてください。
    6. 動物の種類や感度を変更する"動物のタブ"をクリックしてください。
2. 新しい実験
  1. [ファイル]> [新規作成]> [実験]を選択します
  2. 新しい実験を始める
    1. 実験名を入力してください。
    2. キー研究を選択してください。
    3. 開始日を選択し、"Next"をクリックします。
  3. 基本的なセッション情報
    1. セッション名を入力します。
    2. 5に"馴化のサイクル"を設定します。あなたがゼロに設定順化サイクルを、インクルードしたくない場合。ホルダーと袖口に動物を順化を支援するために、あなたの実験を追加サイクルを追加し、5日間連続の実験を実行する。
    3. "セットの数"を1に設定します。
    4. 複数のセットを30秒に、"セット間の時間"を設定
    5. "セット当たりのサイクル数"20サイクルに設定します。
    6. 5秒に"サイクルの間の時間"を設定し、"次へ"をクリックします。
3. 標本の選択
  1. 1. 試料のプールから標本を選択して、最初に使用可能なチャネルに割り当て、"次へ"をクリックします。
  2. セッションパラメータ
    1. 250mmHgに"最大閉塞圧を"設定してください。
    2. マウス、ラットの15秒20秒に"デフレの時間"を設定します。
    3. 15ulの"最小音量"を設定します。
    4. グラフごとに1つのチャンネルに"表示スタイル"を設定します。
    5. 追加の研究者や技術者を追加し、"次へ"をクリックします。
  3. セッションスクリプト
    1. セッションスクリプトを確認し、"次へ"をクリックします。
    2. あなたが動物の準備のセクションを完了するまで、[完了]を選択しないでください。
動物の準備
1. 動物のセットアップ
  1. アニマルホルダー
    1. 訓練と動物の順化を向上させる、あなたの実験を追加サイクルを追加し、5日連続で実験を実行する。また、実際の調査に先立って3日間連続で15分間保持者に動物を置くことにより順化を支援することができます。
    2. 尾で動物を拾って、ゆっくりとノーズコーンの開放端に直面しているホルダーの後部に動物を置くことによって、ホルダーにそれぞれの動物を置きます。注：選択したホルダーのサイズとの関係で動物の大きさ。動物は自由にホルダーを入力することができるはずです。
    3. 慎重に後部のハッチに赤いスクリューキャップを回してホルダーに後部のハッチを固定します。ケアは、後部のハッチを確保しつつ、尾やその他の体の部分を挟まないように注意する必要があります。
    4. 動物の動きを制限し、後部のハッチに向かってノーズコーンをスライドさせます。ノーズコーンは、ホルダーの内側であるときに振り返ってから動物を制限するために位置にあるはずです。
    5. 指定された位置での温暖化のプラットフォームの上にホルダーを置きます。ある期間にわたって、動物の同じグループをテストする場合、あなたのBP測定値の一貫性と精度を向上させるために地球温暖化のプラットフォーム上でホルダーの位置を回転するようにしてください。少なくとも5分は、ホルダーに順応するために動物を許可する。
    6. ホルダー内部の間に動物に触れたり、取り扱いに十分ご注意ください。増加の接触は、動物を刺激することができます。
    7. 無人ホルダーに動物を離れることはありません。
  2. カフの配置
    1. ホルダーの上部背面のノッチの"オクルージョンカフチューブを"確保する。
    2. "オクルージョンカフ"から2mm以内に配置、"VPRカフ"を介して尾を通します。
    3. ホルダーの上部背面のノッチの"VPRカフチューブを"確保する。
    4. CODAのコントローラに袖口を取り付けます。
  3. 動物の温度
    1. 少なくとも5分は、体温を調節するために動物を許可する。
    2. 赤外線温度計で頻繁に動物の温度を記録します。動物の温度は32〜35℃にする必要があります
実験
1. 実験を始める
  1. "Finish"をクリックし、実験がすぐに開始されます。
2. 最後の実験
  1. 動物
    1. すぐに袖口とホルダーから動物を取り外します。
    2. "シンプルセッションサマリーレポート"が表示された後にケージに動物を返します。
  2. データ収集
    1. 受理サイクルが自動的にCODAアプリケーション内のスプレッドシート形式で表示される最後のサイクル終了後、"Excelにエクスポート"ボタンをクリックしてください。
    2. 、でファイルを配置するフォルダを選択し、ファイルを名前を付けて"保存"をクリックします。
    3. Excelアプリケーションを開いて、"開く"をクリックしてください。
    4. "保存された。csvファイルを"表示するすべてのファイルタイプを表示する、ファイルをクリックしてください。
  3. データ処理
    1. Excelファイル内のデータを処理するために、いくつかの方法があります。一般的な方法は、平均値と標準偏差を取得することです。
    2. 標準偏差が30より大きい場合の測定値を削除します。
    3. また、拒否されたサイクルが見られるかもしれないと、データベース全体を簡単にExcelにエクスポートすることができます。詳細については、ユーザーズマニュアルを参照してください。