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Bioengineering

और क्वांटम डॉट्स और बैक्टीरियल वृद्धि वक्र और प्लेट गणना के द्वारा विषाक्तता Assays जैव विकार solubilization

Published: July 11, 2012 doi: 10.3791/3969
Automatic Translation
1, 1, 1
1Department of Biomedical Engineering, McGill University, Montreal, QC Canada

Summary

अर्धचालक क्वांटम डॉट्स (QDs) के रूप में नैनोकणों विरोधी माइक्रोबियल या विरोधी कैंसर अनुप्रयोगों के लिए photoactivatable एजेंट बनाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इस तकनीक से पता चलता है कि कैसे करने के लिए पानी solubilize कैडमियम Telluride (CdTe) QDs में, उन्हें एक एंटीबायोटिक के लिए संयुग्म, और एक जीवाणु अवरोध विकास घटता है और थाली गिनती पर आधारित परख करते.

Protocol

1. QD solubilization

यह एक CdTe के लिए उपयुक्त विधि है. इसी तरह के तरीकों InP / 20 ZnS और सीडीएसई / 21 ZnS जैसे QDs में अन्य प्रकार के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है.

  1. 15 माइक्रोन (ऑप्टिकल = पहली exciton चरम पर घनत्व 2.5) पर टोल्यूनि में CdTe QDs में एक समाधान तैयार करें.
  2. एक गिलास शीशी में स्थानांतरण इस स्टॉक के 200 μL. प्लास्टिक का उपयोग नहीं!
  3. 800 μL टोल्यूनि, 200 मिमी borate बफर (9 पीएच) के 1 एमएल और 11.5 एम mercaptopropionic एसिड (एमपीए) के 2 μL जोड़ें.
  4. शीशी कैप और यह 30-60 सेकंड के लिए सख्ती से हिला.
  5. अनायास जलीय और कार्बनिक विलायक चरणों अलग कर देगा. जलीय चरण QDs का रंग हो जाएगा. टोल्यूनि परत से बचने के लिए, इसे हटाने और यह त्यागें. फिर एक साफ शीशी में जलीय चरण हस्तांतरण.
  6. धोने / फ़िल्टरिंग चार बार एक 500 μL, 10000 आणविक भार cutoff के अपकेंद्रित्र फिल्टर का उपयोग करने से solubilized QDs में शुद्ध. फिल्टर होना चाहिए13 मिनट के लिए 3000 XG पर घूमती है. कम से कम पिछले दो washes के लिए, वांछित अंतिम बफर के साथ धो लो.
  7. अंतिम धोने के बाद, वांछित पीएच और दुकान में 4 डिग्री सेल्सियस पर 50 मिमी borate बफर में धोया QDs में निलंबित वे 1-2 सप्ताह के लिए स्थिर हो जाएगा.
  8. Absorbance और उत्सर्जन स्पेक्ट्रा को मापने के लिए प्रकाशित 22 फ़ार्मुलों पर आधारित एकाग्रता का अनुमान है.

प्रतिनिधि परिणाम चित्रा 1 यूवी दीपक रोशनी के नीचे के CdTe QDs में एक छवि से पता चलता है, और पानी solubilization के पहले और बाद में उत्सर्जन स्पेक्ट्रा, टोपी विनिमय से नगण्य परिवर्तन दिखा. आकार मान कोर व्यास इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा मापा हैं.

2. एंटीबायोटिक के लिए QD संयुग्मन

प्रोटोकॉल के इस भाग को किसी भी नकारात्मक चार्ज पानी solubilized सबसे वाणिज्यिक QDs में, धातु कण, और अधिक 19 सहित nanoparticle, के लिए लागू है.

  1. किसी भी अणु काम करेंगे कि eithएर solubilized QDs में नकारात्मक के आरोप को स्वयं assembles, या कि एक प्रतिक्रियाशील समूह है कि संयुग्मित हो सकता है के रूप में एक प्राथमिक amine है. इस उदाहरण में, हम polymyxin (पी एम बी बी), जो सकारात्मक चार्ज किया जाता है और विकार अभिकर्मकों की आवश्यकता के बिना स्वयं assembles में प्रयोग कर रहे हैं. 60 माइक्रोन में एच 2 ओ पी एम बी भंग. (यदि चुना एंटीबायोटिक एच 2 हे में घुलनशील नहीं है, .1-1 मिमी की एकाग्रता में DMSO के या इथेनॉल में भंग). यह एक 10x (एच 2 हे) समाधान या एक 100x समाधान के विलायक में होगा.
  2. गणना आप कितना QD समाधान बैक्टीरियल विषाक्तता प्रयोगों के लिए की आवश्यकता होगी. 0.3 प्रति quadruplicates में एमएल के साथ एक 96 - अच्छी तरह से थाली के लिए, 200 एनएम संयुग्म के 0.5 एमएल की जरूरत है. दो ट्यूबों 50 मिमी borate बफर में 1 माइक्रोन क्वांटम डॉट्स के 100 μL युक्त तैयार.
  3. यदि एक प्राथमिक amine युग्मन, एक 19 मिलीग्राम / एमएल (100 मिमी) 1 - एथिल-3-3 [dimethylaminopropyl] के समाधान एच 2 ओ में carbodiimide हाइड्रोक्लोराइड (EDC) तैयार समाधान में EDC के स्थिर नहीं है, तुरंत उपयोग और बाकी फेंक.
  4. का 10x एंटीबायोटिक (एच 2 हे) समाधान या संयुग्म ट्यूब 100x समाधान (विलायक में) के 5 μL के 50 μL जोड़ें. पी एम बी के लिए 30:1 की दाढ़ अनुपात में CdTe विकार, 60 माइक्रोन पी एम की 50 μL जोड़ें. एच 2 हे या QD केवल नियंत्रण ट्यूब के लिए विलायक जोड़ें.
  5. यदि आवश्यक हो, EDC के स्टॉक समाधान के संयुग्म ट्यूब 1 μL जोड़ें.
  6. उपयुक्त बफर Tris जैसे कोई बफ़र्स amine युक्त, के रूप में वे EDC रोकना होगा borate बफर या पीबीएस के साथ 0.5 एमएल संयुग्म मात्रा लाओ.
  7. एल्यूमीनियम पन्नी, 1 घंटे के लिए nutator या घुमाव पर और जगह के साथ प्रकाश से ढाल ट्यूब. यदि एकत्रीकरण होता है, एंटीबायोटिक की कम सांद्रता के साथ संयुग्मन दोहराना. एकाग्रता ऊपर टाइट्रेट तक कणों कुल नहीं है.
  8. एक उपयुक्त फिल्टर के माध्यम से गुजर रहा conjugates धो लें. 10000 आणविक भार cutoff के सबसे एंटीबायोटिक दवाओं के लिए, लेकिन नहीं प्रोटीन या एंटीबॉडी के लिए काम करता है. Absorbance के या प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रोस्कोपी, जेल वैद्युतकणसंचलन, या फूरियर अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी (FTIR): अणु पर निर्भर करता है, अलग अलग तरीकों QD प्रति एंटीबायोटिक अणुओं की संख्या का अनुमान किया जा सकता है.

प्रतिनिधि परिणाम इस उदाहरण में, अंडर विकार QD उत्सर्जन स्पेक्ट्रम में परिवर्तन द्वारा होती है. चित्रा 2 अंडर अलावा के साथ CdTe QDs में स्पेक्ट्रा से पता चलता है.

3. बैक्टीरिया की 96 अच्छी तरह से स्क्रीन के लिए तैयार करना एंटीबायोटिक 50 आईसी निर्धारण

यह लगभग किसी भी बैक्टीरिया उपयुक्त 18 मध्यम में बड़े तनाव के लिए लागू है. समय रिकॉर्डिंग जारी रखने चाहिए की सटीक लंबाई बैक्टीरियल वृद्धि दर पर निर्भर करता है. हमारे उदाहरण में, हम Escherichia कोलाई lysogeny (पौंड) शोरबा मध्यम में उगाई का उपयोग करें.

  1. आदेश में उचित QD संयुग्म सांद्रता का चयन करने के लिए, यह जानना महत्वपूर्ण हैएंटीबायोटिक की 50 आईसी संयुग्मित हो और अगर अकेले QDs में विषाक्त कर रहे हैं. इस विकार प्रयोग 2 दिन पहले शुरू हो जाना चाहिए. शाम में, बीज बैक्टीरियल वृद्धि मध्यम के एक ताजा कॉलोनी से 10 एमएल, सही बाँझ और जैव सुरक्षा तकनीक का उपयोग कर.
  2. अगले दिन, प्रयोग से पहले 1-2 घंटे, मध्यम विकास के लगभग एक अधिक से अधिक राशि के साथ एक स्पष्ट नीचे 96 अच्छी तरह से थाली के कुओं की प्रत्येक को भरने. एक multichannel विंदुक बीज, बैक्टीरिया संस्कृति के 1-50 μL (एकाग्रता पर निर्भर करता है कितनी तेजी से विशेष रूप से तनाव बढ़ता है और अपने प्रयोगशाला द्वारा calibrated किया जा आवश्यकता होगी) प्रत्येक के साथ अच्छी तरह से उपयोग.
  3. प्लेट पाठक पर थाली रखो और यह सेट करने के लिए एक निर्धारित तरंगदैर्ध्य (आमतौर पर 600 एनएम) में 2 घंटे के लिए हर 10 मिनट में पढ़ें. मॉनिटर थाली इतना है कि बैक्टीरिया बहुत घने भी जल्दी जाना नहीं है.
  4. जब कोशिकाओं = आयुध डिपो 0.1-0.15 तक पहुँचने के लिए, थाली पाठक से थाली हटा और रिकॉर्डिंग बंद करो.
  5. दवा अकेले जोड़ें पर अकेले QDsकम से कम triplicates में अलग सांद्रता. एक "अंधेरे" नियंत्रण और एक आधे के लिए प्रबुद्ध के रूप में थाली के एक तरफ का उपयोग करें. एक सुझाव दिया लेआउट चित्रा 3 में दिया जाता है. सांद्रता के एक विस्तृत रेंज अवधि के लिए एक एकाग्रता है कि बैक्टीरिया बहुत छोटे से रोकता है, और एक है कि उन सभी को मारता शामिल होना चाहिए.
  6. एल्यूमीनियम पन्नी के साथ थाली के "अंधेरे पक्ष" शील्ड. वांछित तरंगदैर्य में एक दीपक के लिए दूसरे पक्ष को बेनकाब. हम एक कस्टम 96 अच्छी तरह से, 440 एनएम 2.4 मेगावाट (चित्रा 4) एल ई डी और 30-60 मिनट के लिए चमकना से बना दीपक का उपयोग करें. स्पष्ट पैंदा के साथ काले रंग प्लेटें आवारा प्रकाश से unexposed बैक्टीरिया ढाल मदद करते हैं. उजागर और संयुक्त राष्ट्र उजागर पक्षों के बीच एक खाली स्तंभ भी इस्तेमाल किया जा सकता है.
  7. प्रकाश प्रदर्शन के बाद, प्लेट पाठक और रिकॉर्ड 600 आयुध डिपो विकास दर के आधार पर 5-12 घंटे के लिए हर 10 मिनट में थाली डाल दिया. <32 डिग्री सेल्सियस तापमान यदि संभव हो तो संस्कृतियों के सूखने से बचने के लिए. रखें
  8. विकास घटता प्लॉटचयनित समय बिंदु पर लॉग बनाम एकाग्रता और आईसी हिल समीकरण का उपयोग कर एंटीबायोटिक के 50 निर्धारित:

एक समीकरण
वाई अधिकतम, जहां एच हिल गुणांक है (आदर्श एक पठार पर) विकास के उच्चतम बिंदु है, और वाई मिनट शून्य बिंदु है, एक पठार पर भी आदर्श है. यह संभावना नहीं है कि अकेले QDs में ज्यादा मात्रा में इस्तेमाल किया कोशिकाओं को विषाक्तता दिखाई देगा, तो एक मूल्य निर्धारित नहीं किया जाएगा.

प्रतिनिधि परिणाम. रिकॉर्डिंग अवधि के अंत में, स्पष्ट कुओं पूरा कोशिका मृत्यु का संकेत है, और सेल घनत्व की एक ढाल दवा की सांद्रता में वृद्धि के साथ प्रकट करना चाहिए. बैक्टीरिया विकास एस आकार घटता (चित्रा 5) दिखाना चाहिए, अधिकतम पठार का स्थान तनाव तनाव से बहुत भिन्न है और तापमान पर भी निर्भर करता है. एक दिया समय का बिंदु हो सकता हैप्रतिनिधि के रूप में चुना और मूल्यों साजिश रची बनाम प्रवेश [एंटीबायोटिक] आईसी 50 (5 चित्रा बी) दे. QD विषाक्तता का मूल्यांकन करने के लिए, अस्तित्व बनाम प्रवेश [QD भी साजिश रची जा सकता है लेकिन QDs में के साथ महत्वपूर्ण जीवाणु हत्या में अकेले प्राप्त करने के लिए दुर्लभ है (चित्रा 5 सी).

4. जीवाणु एंटीबायोटिक / QDs में के साथ 96 अच्छी तरह से स्क्रीन के लिए तैयार

  1. प्रयोग, बीज उचित अमीर मध्यम में संस्कृति की एक ताजा कॉलोनी से 10 एमएल, सही बाँझ और जैव सुरक्षा तकनीक का उपयोग करने से पहले दिन. QD - एंटीबायोटिक संयुग्म इस दिन पर तैयार किया जाना चाहिए, जब तक यह अत्यधिक अस्थिर है.
  2. प्रयोग से पहले 1-2 घंटे में, एक स्पष्ट मध्यम विकास के लगभग एक अधिक से अधिक राशि के साथ नीचे 96 अच्छी तरह से थाली के कुओं की प्रत्येक भरने. एक multichannel विंदुक बीज, 1-50 μL बैक्टीरिया संस्कृति के साथ प्रत्येक अच्छी तरह से उपयोग.
  3. प्लेट पाठक पर थाली रखो और यह सेट करने के लिए के रूप में भाग 3 में एक ही तरंग दैर्ध्य में 2 घंटे के लिए हर 10 मिनट में पढ़ें.
  4. जब कोशिकाओं = आयुध डिपो 0.1-0.15 तक पहुँचने के लिए, थाली पाठक से थाली हटा और रिकॉर्डिंग बंद करो.
  5. कम से कम चार प्रतियों में अलग सांद्रता में QD conjugates जोड़ें. एक "अंधेरे" नियंत्रण और एक आधे के लिए प्रबुद्ध के रूप में थाली के एक तरफ का उपयोग करें. एक सुझाव दिया लेआउट चित्रा 6 में दिया जाता है. एक जीवाणु केवल नियंत्रण पट्टी हमेशा संस्कृति, तापमान, साथ मामले की समस्याओं में शामिल किया जाना चाहिए, आदि के विकास की स्थिति को प्रभावित करता है. केवल दवा की एक पट्टी है और केवल QD भी करने के लिए सुनिश्चित करें कि वे पहले किया नियंत्रण की थाली से मिलान करने के लिए शामिल किया जाना चाहिए. कुओं की बाकी conjugates क्रम में अच्छा आँकड़ों के लिए अनुमति देने के लिए समर्पित कर रहे हैं.
  6. एल्यूमीनियम पन्नी के साथ थाली के "अंधेरे पक्ष" शील्ड. वांछित तरंगदैर्य में एक दीपक के लिए दूसरे पक्ष को बेनकाब.
  7. प्रकाश प्रदर्शन के बाद, प्लेट पाठक और रिकॉर्ड 600 आयुध डिपो 5-12 घंटे के लिए हर 10 मिनट में थाली डाल दिया. तापमान रखें <32 ° C अगर संभव डॉ. बचने के लिएसंस्कृतियों की यिंग.

प्रतिनिधि परिणाम. QDs में और एंटीबायोटिक के संयोजन कम अकेले एंटीबायोटिक से विषाक्त हो सकता है, समान रूप से विषाक्त, या अधिक विषाक्त. यह विकास घटता है और आईसी 50 माप का उपयोग कर 7 चित्रा मात्रा निर्धारित किया जा सकता है कि एंटीबायोटिक के रूप में समान रूप से विषाक्त अकेले, conjugates और conjugates का एक उदाहरण है कि और अधिक विषाक्त कर रहे हैं के एक उदाहरण से पता चलता है.

5. प्लेट गणना

  1. 96 अच्छी तरह से इलाज थाली में से एक या एक से अधिक कुओं धारावाहिक dilutions और कॉलोनी की गिनती के लिए इस्तेमाल किया जा चुनें.
  2. पीबीएस या नमकीन घोल (0.9% NaCl) के साथ चयनित बैक्टीरिया के नमूने में से प्रत्येक के एक धारावाहिक कमजोर पड़ने. 20 बैक्टीरियल समाधान की μL स्थानांतरण और यह 180 μL नमकीन घोल के साथ पतला, पिपेट टिप मिश्रण, बदलने के लिए और पतला बैक्टीरियल समाधान की 180 μL खारा समाधान के लिए 20 μL हस्तांतरण. 6 बार दोहराएँ.
  3. प्रत्येक कमजोर पड़ने और थाली से एक उपयुक्त पर 10 μL ले लो ठोस मीडिया थाली. एक नमूना के सभी 8 सांद्रता एक 10 सेमी दौर पेट्री डिश पर चढ़ाया जा सकता है, हालांकि आयताकार बर्तन के रूप में यह आसान है बातें लाइन पसंद कर रहे हैं.
  4. यह 15 मिनट के लिए बेंच पर सूखी. तो आपके जीवाणु के लिए उपयुक्त तापमान पर 16 घंटे के लिए सेते हैं.
  5. कालोनियों की गिनती और (# कालोनियों के x कमजोर पड़ने कारक) / मात्रा चढ़ाया = CFU / एमएल. अनुसार कॉलोनी के गठन इकाइयों (CFU) की गणना

8 चित्रा एक उदाहरण CFU थाली से पता चलता है.

6. प्रतिनिधि परिणाम

चित्रा 1
चित्रा 1 CdTe QDs में. (ए) CdTe QDs में आठ तैयारी एक यूवी छड़ी (365 एनएम) के साथ प्रबुद्ध. (बी) से पहले और बाद पानी solubilization पांच चयनित आकार के absorbance और उत्सर्जन स्पेक्ट्रा. धराशायी लाइनों टोल्यूनि में स्पेक्ट्रा हैं, ठोस लाइनों के पानी में हैं.

/ files/ftp_upload/3969/3969fig2.jpg ">
चित्रा 2 QD अंडर conjugates के वर्णक्रमीय और जेल विश्लेषण. ऑरेंज उत्सर्जन CdTe QDs में इस उदाहरण के लिए इस्तेमाल किया गया, QDs की अन्य प्रकार पर प्रभाव प्रत्येक प्रयोग के लिए मूल्यांकन किया जा आवश्यकता होगी. (ए) विशिष्ट (ग्रे पंक्ति) absorbance और अंडर के विकार उत्सर्जन और अंडर का 160 दाढ़ समकक्ष के अलावा के बाद (धराशायी लाइन) से पहले QDs में उत्सर्जन स्पेक्ट्रा (काला लाइन). (बी) पी एम बी का अनुपात और QD उत्सर्जन तीव्रता (वर्ग) और शिखर तरंगदैर्ध्य स्थान (त्रिकोण) के बीच संबंध.

चित्रा 3
चित्रा 3 थाली लेआउट नियंत्रण विकास की थाली के लिए सुझाव. पी एम और QD सांद्रता की एक विस्तृत श्रृंखला का प्रतिनिधित्व किया है. थाली के एक आधा है विकिरणित प्रकाश डाला (नीला), और एक समान आधा प्रकाश से सुरक्षित है. यहाँ क्लिक करेंबड़ा आंकड़ा देखने के लिए.

चित्रा 4
चित्रा 4 कस्टम विकिरण वर्दी थाली के लिए 96 एलईडी दीपक, उपस्थिति दिखा बंद और पर. एक विशिष्ट हाथ से आयोजित यूवी दीपक भी, इस्तेमाल किया जा सकता है लेकिन समान रूप से कवर नहीं किया जाएगा पूरी थाली.

चित्रा 5
चित्रा 5. नियंत्रण विकास प्लेट के लिए उदाहरण परिणाम है. (ए) के प्रतिनिधि अलग दवा सांद्रता के साथ बैक्टीरियल वृद्धि वक्र, 0 से कोशिका मृत्यु को पूरा करने के लिए. खुले प्रतीकों केवल पी एम साथ सांद्रता दिया, विकिरण के बिना ठोस प्रतीकों CdTe - पी एम बी कर रहे हैं, और आधे भरे प्रतीकों CdTe के विकिरण के साथ - पी एम बी कर रहे हैं. विकिरण अंडर केवल नमूने पर कोई प्रभाव नहीं था, तो इन से घटता स्पष्टता के लिए छोड़े गए थे. QD अनुपात: सभी पी एम CdTe conjugates 30:1 पी एम बी कर रहे हैं. (बी) के विकास वक्र मूल्यों की 200 मिनट बनाम प्रवेश [पी एम] में भूखंड और Eq के लिए फिट बैठता है. (1). ऑन करने के लिएrol के प्रकाश के प्रभाव के लिए, एक वक्र प्रकाश जोखिम के 30 मिनट के साथ ही एंटीबायोटिक के साथ किया जाता है. (सी) 200 मिनट बनाम QD एकाग्रता, CdTe QDs का उपयोग कर बैक्टीरियल अस्तित्व. कुछ विषाक्तता प्रकाश जोखिम है, लेकिन बहुत कम एक आईसी 50 मूल्य निर्धारण के साथ देखा जाता है. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहाँ क्लिक करें .

चित्रा 6
चित्रा 6 संयुग्म परीक्षण थाली के लिए लेआउट सुझाव. थाली के आधे नीले प्रकाश डाला प्रकाश के संपर्क में किया जाना चाहिए, और unhighlighted आधा सुरक्षित है. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहाँ क्लिक करें .

7 चित्रा
7 चित्रा उदाहरण संयुग्म परीक्षण थाली के लिए परिणाम. 200 मिनट पर विकास वक्र मूल्यों pl थेotted और Eq के लिए फिट है. (1). (ए) CdTe - अंडर conjugates अकेले अंडर पर विषाक्तता बढ़ शो. (बी) गोल्ड Au-अंडर nanoparticle के conjugates के अंडर में कोई वृद्धि अकेले विषाक्तता दिखा.

संख्या 8
8 चित्रा CFU थाली का उदाहरण ई. एक 96 अच्छी तरह से थाली में वरीयता प्राप्त कोली के साथ QD - अंडर 30 मिनट के लिए विकिरण के साथ या बिना इलाज किया गया था. तो 4 घंटे के लिए 32 ° सी में incubated रहे. प्रत्येक जीवाणु नमूना के धारावाहिक dilutions नमकीन घोल, और 100 10 7 एक्स dilutions के एक्स 10 μL के साथ किए गए अगर प्लेट पर चढ़ाया गया. प्लेटों को 37 डिग्री सेल्सियस और कालोनियों पर 16 घंटे के बाद गिना रहे थे incubated रहे थे. थाली संकेत के रूप में पंक्तियों के साथ इस dilutions से पता चलता है, स्तंभ हैं: (ए) 0.06 माइक्रोन अंडर + 2 एनएम CdTe, (बी) 0.12 माइक्रोन पी एम बी 4 एनएम CdTe (सी) 0.2 माइक्रोन अंडर + 6.7 एनएम CdTe, (डी) 0.06 माइक्रोन अंडर + 2 एनएम विकिरणित, (ई) 0.12 माइक्रोन अंडर + 4 एनएम CdTe विकिरणित, (एफ) 0.2 माइक्रोन अंडर + 6.7 एनएम CdTe irra CdTediated.

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Discussion

नैनोकणों नए विरोधी माइक्रोबियल एजेंटों के निर्माण के लिए एक आशाजनक दृष्टिकोण का प्रतिनिधित्व करते हैं. विकास वक्र विश्लेषण बैक्टीरिया कोशिका घनत्व है कि विकास हिचकते कोशिकाओं से कोशिकाओं को सक्रिय रूप से बढ़ती अलग की निगरानी के लिए एक रास्ता है. जब थाली गिनती के साथ युग्मित, यह एक संयुग्म एंटीबायोटिक क्षमता का एक गहन विश्लेषण के लिए अनुमति देता है. 96 अच्छी तरह प्रारूप में एकाग्रता की उच्च throughput अपेक्षाकृत प्रकाश जोखिम के रूप में विविधताओं और अन्य शर्तों परमिट बाद क्वांटम डॉट्स के रूप में प्रकाश सक्रिय एजेंटों के लिए महत्वपूर्ण है. इस बुनियादी दृष्टिकोण पर कई बदलाव संभव हो रहे हैं, यह nanotoxicology के लिए एक बहुमुखी विधि बना.

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Disclosures

ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.

Acknowledgments

यह काम NSERC व्यक्तिगत डिस्कवरी कार्यक्रम, NSERC / CIHR सहयोगी स्वास्थ्य अनुसंधान कार्यक्रम (CHRP), और NSERC बनाने कैनेडियन Astrobiology प्रशिक्षण के कार्यक्रम (CATP) द्वारा वित्त पोषित किया गया.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Borate Buffer Component #1 Fisher Boric acid A-74-1
Borate Buffer Component #2 Sigma-Aldrich Sodium Tetraborate B9876
MPA Sigma-Aldrich M5801
Vivaspin 500 GE Healthcare 28-9322 Various MWCO available
Glass vials Fisher 03-338C
EDC Sigma-Aldrich E6383
Polymyxin B Sigma-Aldrich P1004
Bacterial growth medium (LB) Component #1 Fisher NaCl S271
Bacterial growth medium (LB) Component #2 BD Tryptone 211705
Bacterial growth medium (LB) Component #3 BD Yeast Extract 211929
Lamp for light exposure Custom
Clear-bottom 96-well plates Fisher 07-200-567 or 07-200-730
Fluorescence spectrometer Molecular Devices
Absorbance plate reader Molecular Devices
BactoAgar for solid media Bioshop AGR001.1
Petri dishes round Fisher 08-75-12
Petri dishes rectangular Fisher 08-757-11A

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References

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