Summary
يوصف بروتوكول للدفعات المزمن من الجلوكوز وIntralipid في الفئران. هذا النموذج يمكن استخدامه لدراسة تأثير المغذيات الزائدة على وظيفة الجهاز والمعلمات الفسيولوجية.
Abstract
فإنه يفترض التعرض المزمن لمستويات مفرطة من المغذيات تؤثر على وظيفة من عدة أعضاء وأنسجة والإسهام في تطوير العديد من المضاعفات المرتبطة بالسمنة ومتلازمة التمثيل الغذائي، بما في ذلك السكري من النوع 2. لدراسة الآليات التي مستويات مفرطة من الجلوكوز والأحماض الدهنية تؤثر على البنكرياس خلايا بيتا وإفراز الأنسولين، أنشأنا نموذجا ضخ المواد الغذائية المزمنة في الفئران. يتكون هذا الإجراء من القسطرة في الوريد الوداجي الأيمن والشريان السباتي الأيسر تحت التخدير العام، والسماح فترة النقاهة لمدة 7 أيام؛ ربط القسطرة إلى مضخات باستخدام قطب ونظام موازنة التي تمكن الحيوان من التحرك بحرية في القفص، وغرس الجلوكوز و / أو Intralipid (مستحلب زيت فول الصويا الذي يولد خليط من ما يقرب من 80٪ unsaturated/20٪ الأحماض الدهنية المشبعة عندما غرست مع الهيبارين) لمدة 72 ساعة. هذا النموذج يقدم عدة ADVANTAغيس، بما في ذلك إمكانية لتعديل ناعما المستويات المستهدفة لتعميم الجلوكوز والأحماض الدهنية، وخيار المشاركة في ضخ المركبات الدوائية، والإطار الزمني قصير نسبيا بالمقارنة مع النماذج الغذائية. ويمكن استخدامه لدراسة آليات الخلل الناجم عن المغذيات في مجموعة متنوعة من الأجهزة واختبار فعالية الأدوية في هذا السياق.
Introduction
وقد اقترحت مستويات مرتفعة مزمنة من الجلوكوز والدهون في الدورة الدموية إلى المساهمة في التسبب في مرض السكري نوع 2 عن طريق تغيير وظيفة من عدة أجهزة المتورطين في الحفاظ على توازن الجلوكوز بما في ذلك، ولكن ليس على سبيل الحصر، والبنكرياس خلايا بيتا (مراجعة في 1). وتذهب فرضية أن glucotoxicity ارتفاع السكر في الدم المزمن يؤدي إلى تفاقم الخلل خلايا بيتا التي أدت إلى ارتفاع السكر في الدم في المقام الأول، وبالتالي خلق حلقة مفرغة، والمساهمة في تدهور السيطرة على مستويات الجلوكوز في نوع 2 مرضى السكري. وعلى نحو مماثل، يقترح فرضية glucolipotoxicity أن الارتفاعات ما يصاحب ذلك من مستويات الجلوكوز والدهون، وغالبا ما لوحظ في مرض السكري من النوع 2، تضر خلايا بيتا.
فك رموز الآليات الخلوية والجزيئية من الآثار الضارة من المواد الغذائية مرتفعة بشكل مزمن في البنكرياس وظيفة خلايا بيتا هو المفتاح لunderstandiنانوغرام من التسبب في مرض السكري من النوع 2 1. تحقيقا لهذه الغاية، وعدد كبير من الدراسات التي بحثت آليات المغذيات الزائدة المزمنة فيفو السابقين في الجزر المعزولة لانجرهانز في المختبر أو في النسيلي، خطوط الخلايا إفراز الانسولين. ومع ذلك، وترجمة النتائج التي تم الحصول عليها في هذه النظم نموذج للكائن الحي كله المعقدة، ولا سيما لأن تركيزات الأحماض الدهنية المستخدمة في الخلايا المستزرعة أو الجزر نادرا ما تتطابق مع مستويات تداولها في المنطقة المجاورة للخلايا بيتا في الجسم الحي 2. من ناحية أخرى، وقد تم فحص آليات فشل خلايا بيتا في استجابة لزيادة المغذيات في نماذج القوارض من مرض السكري، كما يتضح من زوكر السكري الفئران الدهنية 3،4، ويربوع Psammomys obesus (5) وعالية من الدهون نظام غذائي بنك الاحتياطي الفيدرالي الماوس 6. هذه النماذج، ومع ذلك، تتميز حالات الشذوذ الأيضي الجوهرية وليست قابلة بسهولة للتلاعب من الجلوكوز في الدمو / أو مستويات الدهون في وضع أكثر سيطرة وأقل المزمنة. لتكون قادرة على تغيير تعميم مستويات المغذيات في إطار زمني من الأيام في الحيوانات العادية خلاف ذلك، قمنا بتطوير نموذج التسريب المزمنة في الفئران العادية والتي تمكننا من دراسة آثار الدهون والجلوكوز، وحده أو في الجمع، وعلى المعلمات الفسيولوجية وظيفة 7،8.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
لمحة عامة: الإجراء يتكون من القسطرة في الوريد الوداجي الأيمن والشريان السباتي الأيسر تحت التخدير العام، والسماح فترة النقاهة لمدة 7 أيام؛ ربط القسطرة إلى مضخات باستخدام قطب ونظام موازنة التي تمكن الحيوان من التحرك بحرية في القفص؛ وغرس الجلوكوز و / أو Intralipid (مستحلب زيت فول الصويا الذي يولد خليط من ما يقرب من 80٪ unsaturated/20٪ الأحماض الدهنية المشبعة عندما غرست مع الهيبارين 9) لمدة 72 ساعة.
1. Canulation من حبل الوريد الأيمن والشريان السباتي الأيسر
- تعقيم الأدوات الجراحية. يجب أن تكون أنابيب Canulation أيضا الباردة تعقيمها باستخدام عامل تعقيم السائل (2.6٪ غلوتارالدهيد) قبل الإجراء. تزج الأنبوب في حاوية تعقيمها ل16-24 ساعة. شطف ومسح جيدا بالماء المقطر المعقم لإزالة كل آثار غلوتارالدهيد قبل الاستخدام.
- وزن الفئران على حسابجرعات المخدرات:
كاربروفين 5 ملغ / كغ: التخفيف 1/10 = وزن الجسم (ز) × 0.001 مل SC (مسكن)
غليكوبيرولات 0.01 مغ / كغ: التخفيف 1/10 = BW (ز) X 0.0012 مل SC (مضادات الكولين) - تخدير الفئران باستخدام isoflurane والأكسجين و.
- وضع فأر على بطنه. حلاقة المنطقة خلف الأذنين إلى قاعدة الكتفين. وضع فأر على ظهرها. حلاقة المنطقة تحت الرقبة إلى الجبهة الكفوف.
- الإعدادية على موقع الجراحية بالكلورهيكسيدين، والكحول، واليود. إدارة المخدرات.
- نقل الفئران إلى الميدان الجراحية.
- باستخدام تقنية العقيم، canulate حبل الوريد اليمين واليسار الشريان السباتي مع قنية PE-50 تعلق على حقنة 1 مل مليئة 5 U من المياه المالحة heparinized. مسح canulas مع 50 U من المياه المالحة heparinized لتجنب تخثر خلال فترة النقاهة. استخدام الإبر 23G اضعافها. إغلاق كل قنية مع دبوس 23G.
- بعد الجراحة، وتقليم حوالي 2.5 ملم قبالةالقواطع السفلية ومكان الفئران في سترة التسريب لمنع canulas من اكلتها.
- توفير الأوكسجين (1 لتر / دقيقة لمدة 10 دقيقة) للمساعدة في اجلاء isoflurane و.
- وضع الفئران في قفص ساخنة حتى يكون مستيقظا تماما.
- تشغيل أربعة الفئران لاستخدام واحد في حالة التسريب (الجدول 1).
2. العناية بعد الجراحة (العلاج بعد العمليات الجراحية والقسطرة من اتصال)
- وزن الفئران في يوم 1 و 2 يوم بعد الجراحة.
- إدارة غليكوبيرولات (BW (ز) × 0.00048 ML) SC مرتين في يوم 1 بعد الجراحة ومرة واحدة في اليوم 2 بعد الجراحة.
- يمكن أن تدار العلاجات إضافية داعمة إذا لزم الأمر: السوائل، وسادة التدفئة، والنظام الغذائي الرطب، والعلاج الأوكسجين، المسكنات، مضادات الكولين.
- في يوم 7 بعد الجراحة، وزن الفئران لحساب معدلات التدفق للتسريب.
- ربط كل فأر إلى نظام التسريب باستخدام حبل وقطب التي شنت على قفص شواء الأعلى (الشكل 1).
- مسح canulas مع 5 U من المياه المالحة heparinized لإزالة جلطات. مسح canulas مرة أخرى مع 50 U من المياه المالحة heparinized لمنع تخثر الدم.
- السماح للفئران حتى يتأقلم على حبل وقطب لمدة 24 ساعة على الأقل قبل بدء التسريب.
3. صب
- رسم 0.15 مل من الدم من الشريان السباتي من كل الفئران سكر الدم وقياس. مسح canulas الوداجي. استخدام 50 U من المياه المالحة heparinized لمنع تخثر في كلا canulas من كل فأر.
- نقل عينة الدم إلى مل أنبوب جمع 0.5 تحتوي على 2٪ EDTA. الطرد المركزي في 10،000 دورة في الدقيقة لمدة 2 دقيقة وتجميد البلازما عند درجة حرارة -20 درجة مئوية.
- ملء اثنين من المحاقن 60 مل لكل من ظروف التسريب المدرجة أدناه. مكان الحقنة 1 على موقف الجبهة من المضخة والحقنة 2 مكان على موقف الخلفي من المضخة.
- تاريخ كل زوج من الحلول معا مع Y-الموصلات وCO-EX أنابيب T22 التي تم تعقيمها. وضع الحقن على هارفارد 33ضخ حقنة المزدوج.
- تغيير أسفل القفص، وإزالة جميع المواد الغذائية من القفص شواء الأعلى.
- تزن 150 غرام من معيار تشو ووضعت على القفص شواء الأعلى.
- توصيل الحقن إلى قطب على استجواب القفص. تدفق الحقن بشكل صحيح لإزالة الهواء المحبوس من خطوط.
- حساب معدلات تدفق التسريب باستخدام وزن الجسم التي تم اتخاذها قبل توصيل الفئران لنظام التسريب. وتحسب معدلات مع ملف Microsoft Excel الذي يحول معدل ضخ الجلوكوز (جير) في مل / ساعة.
- تعيين مضخة لإدارة معدلات تدفق لمدة 60 مل المحاقن وفقا للإعدادات الشركة المصنعة. أدخل سعر للحقنة 1 (حقنة الجبهة) وبسعر لالحقنة 2 (حقنة الظهر).
- بدء ضخ.
4. الرصد
- بعد بدء تشغيل المضخة، تحقق من أنه لا يوجد أي تسرب من قطب أو من canulas وغير الملتوية التي أنابيب التسريب. تحقق أيضا من عدم وجود فقاعات الهواء فيالأنبوب.
- بعد 3 ساعة من الحقن، أخذ عينة الدم لمراقبة سكر الدم. كرر بعد 6، 24، 48، و 72 ساعة من الحقن في الوريد. وكإجراء وقائي، يتم مراقبة سكر الدم أيضا بعد 30، 34، 54، و 60 ساعة من الحقن في الوريد. نسبة الجلوكوز في الدم ويمكن قياسها باستخدام قطرة واحدة من الدم الكامل باستخدام جهاز الجلوكوز المحمولة. هذا يحد من كمية الدم المسحوب خلال التسريب وبالتالي يتجنب إحداث تغييرات كبيرة حجم الدم و / أو الهيماتوكريت.
- يتم تعديل معدل للحقنة 1 على أساس القيم سكر الدم للحفاظ على مستوى السكر في الدم في 220-250 ملغ / دل. معدل لالحقنة 2 لا يتغير خلال ساعة 72 من التسريب لأنه يتم الحفاظ على الأحماض الدهنية الحرة في 1 مليمول / لتر.
- يتم إقران ظروف التسريب بحيث حجم ردت للحيوانات مراقبة ما يعادل حجم ردت للحيوانات الاختبار (الجدول 1).
- بعد 24 ساعة من الحقن، تغيير أسفل القفص وتزن المتبقية في قفص شواء الطعام. العودة الجزء ر غير مأكوليا شواء القفص. كرر بعد 48 ساعة.
- المحاقن عبوة يوميا حسب الحاجة خلال ساعة 72 من التسريب.
- خلال التسريب، دائما مراقبة الفئران لأي علامات الالتهاب أو عدم الراحة. إدارة الرعاية المناسبة إذا لزم الأمر.
5. القتل الرحيم بعد التسريب
- بعد 72 ساعة من الحقن، الفئران هي تخدير في الوريد مع 0.5 مل من كوكتيل الكيتامين / زيلازين (182 ملغم / كغم من الكيتامين و 11.6 ملغم / كغم من زيلازين المخفف 01:02 مع 0.9٪ كلوريد الصوديوم).
- يتم استخدام منعكس أخمص القدمين قرصة للتحقق من مستوى التخدير. يدار مخدر إضافية حسب الحاجة.
- عندما الفئران هو تخدير، يتم فتح تجويف البطن مع مقص جراحي. وexsanguinated الفئران عن طريق رسم 10-15 مل من الدم في حقنة من الشريان الأورطي أو الوريد الأجوف.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
للخروج من سلسلة من 42 الفئران التي خضعت لعملية جراحية، قد فقدت 5 الفئران خلال فترة ما بعد الجراحة، وكان خسر 1 الفئران خلال التسريب، وهو ما يمثل نسبة النجاح الإجمالية 86٪. وكان متوسط وزن الجسم للفئران 37 التي تم غرست في نهاية المطاف 608 ± 5 ز قبل الجراحة و 588 ± 6 غرام عند الشروع في ضخ (يعني ± SE، ن = 37، P <0.0001 قبل الاقتران اختبار t). وقد تم الحصول على النتائج التالية ممثل في 2 مجموعات ضخ:. المالحة (SAL)، والجلوكوز + Intralipid (GLU + IL) أرقام 2A و 2B عرض مستوى السكر في الدم ومستويات الأحماض الدهنية، على التوالي، خلال الفترة ضخ 72 ساعة. حسب التصميم، يتم الحفاظ على مستويات السكر في حوالي 220-250 ملغ / دل في جميع أنحاء التسريب، استنادا إلى قياسات وتعديلات من معدل ضخ الجلوكوز (جير) كما هو مبين في الشكل (3) العادية. القوارض لديها قدرة قوية للتعويض عن ضخ الجلوكوز عن طريق زيادة الانسولين الذاتية SEcretion. ولذلك، يجب زيادة جير خلال ضخ لمستويات السكر في الدم إلى الحفاظ عليها في النسبية ثابت للدولة. ومع ذلك، ومستويات السكر في الدم تميل إلى الانخفاض نحو نهاية التسريب، كما رأينا في الشكل 2A. منذ وغرست هذه الحيوانات مع المواد الغذائية من السعرات الحرارية، فإنها تنخفض بشكل عفوي تناول طعامهم (الشكل 4).
| التسريب حالة | حقنة 1 (موقف الجبهة) | حقنة 2 (مركز الظهير) |
| 1 | سكر العنب 70٪ | ملحي |
| 2 | ملحي | ملحي |
| 3 | سكر العنب 70٪ | Intralipid 20٪ + الهيبارين 20U/ml |
| 4 | ملحي | Intralipid 20٪٪ + الهيبارين 20U/ml |
الجدول 1. نظم الحقن في الوريد.
الشكل 1. صورة من نظام ضخ تبين الفئران مع القسطرة في مكان وحبل، قطب، والذراع موازنة شنت على استجواب القفص.
الشكل 2. . مستويات البلازما من الجلوكوز (A) والأحماض الدهنية الحرة (B) خلال ضخ المياه المالحة (SAL) أو شارك في ضخ الجلوكوز وIntralipid (GLU + IL) في 6 أشهر فئران ويستار القديمة البيانات يعني ± SEM من 3 - 4 حيوانات في كل مجموعة.
الشكل (3) "SRC =" / files/ftp_upload/50267/50267fig3.jpg "/>
الشكل (3). تعديل معدل ضخ الجلوكوز خلال الرئيسين ضخ الجلوكوز وIntralipid (GLU + IL) في 6 أشهر فئران ويستار القديمة. البيانات يعني ± SEM من 4 حيوانات.
الشكل 4. متوسط الاستهلاك الغذائي اليومي من 6 أشهر فئران ويستار القديمة التي غرست مع المالحة (SAL) أو زملاء غرست مع الجلوكوز وIntralipid (GLU + IL). ويعني ± SEM البيانات من الحيوانات 3-4 في كل مجموعة. ** P <0.01.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
ورغم أن عددا من الدراسات السابقة قد استخدمت الحقن المزمن من الجلوكوز (مثلا 10-15) أو الدهون (مثل 16،17) في القوارض، على حد علمنا قد فقط تم الإبلاغ عن ضخ المؤتلفة لكل من الوقود في الفئران 18. نموذج التسريب المزمنة المقدمة هنا تقدم العديد من المزايا لدراسة الآثار المترتبة على فائض المواد الغذائية على مجموعة متنوعة من الوظائف البيولوجية في الفئران. الأول، أنها لا تنطوي على القوارض السمنة وراثيا، ومنذ السمنة شيوعا في البشر هو جينائي 19، والنتائج وبالتالي هم أكثر عرضة لتكون مناسبة لآثار زيادة العرض المغذيات في عموم السكان. الثانية، وهذا النموذج يوفر إمكانية لاختبار تأثير المواد الغذائية المختلفة (وخاصة السكريات أو الدهون) في مستويات تداولها مختلفة، عن طريق تغيير طبيعتها ومعدل تدفق الحقن في الوريد. الثالثة، والطريق الرابع من إدارة تمكن المشترك التسريب من المركبات أو المخدرات جنبا إلى جنب مع نوترients 20. وأخيرا، والإطار الزمني القصير نسبيا من التجربة (72 ساعة مقابل أسابيع لحمية عالية الدهون النماذج التي يسببها) هو وفعالة من حيث التكلفة الوقت لدراسات ما قبل السريرية.
هذا النموذج أيضا بعض العيوب والقيود. أولا، لأن أي نموذج الجراحية ويتطلب الموظفين المدربين تدريبا عاليا والمهرة في جراحة العقيم. ثانيا، على النحو المذكور في النتائج الممثل قسم الحيوانات تميل للتعويض عن ضخ الجلوكوز عن طريق زيادة إفراز الانسولين الذاتية، الأمر الذي يتطلب الرصد المتكرر لمستويات السكر في الدم والتعديلات التي تجرى على جير للحفاظ على مستويات السكر في الدم المستهدفة في جميع أنحاء التسريب. ثالثا، الإجراء لا ينطبق بسهولة على الفئران، التي من شأنها أن تكون هناك حاجة لاستخدامها في الحيوانات المعدلة وراثيا. في تجربتنا، والقسطرة من كلا حبل الوريد والشريان السباتي في الفئران في تحديا تقنيا وأسهل النهج في هذه الحيوانات أصغر هو وضع جوالقسطرة gular عن التسريب وإلى عينة من سفينة الطرفية. هذا، ومع ذلك يحد كثيرا من حجم وتواتر أخذ العينات خلال الحقن في الوريد.
ونظرا للتركيز من مختبرنا، وقد استخدمنا هذا النموذج لدراسة آليات glucolipotoxicity في البنكرياس خلايا بيتا 7،8. ومع ذلك، فإنه يمكن تطبيقها على دراسة آثار زيادة المغذيات في أي نوع من الأنسجة والأعضاء مثل، ولكن ليس على سبيل الحصر، قلب 21، العضلات والهيكل العظمي، 22، والكبد 23.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
فنسنت Poitout هو المؤسس المشارك لوحصلت على عقود من الأبحاث Bêtagenex المحدودة، وهي منظمة بحثية العقد الذي يقدم النموذج التسريب المقدمة في هذه المقالة كخدمة تجارية.
Acknowledgments
وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة (R01DK58096 إلى فنسنت Poitout). فنسنت Poitout يحمل كرسي أبحاث كندا في مرض السكري والبنكرياس وظيفة خلايا بيتا. تلقى بدر Zarrouki زمالات ما بعد الدكتوراه من شركة ميرك وايلي ليلي. كان مدعوما من قبل FONTES Ghislaine زمالة ما بعد الدكتوراه من الرابطة الكندية للسكري.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Saline 0.9% | BD | JB1324 | |
| Dextrose 70% | McKesson | ||
| Intralipid 20% | Fresenius Kabi | JB6023 | |
| Metricide (Glutaraldehyde 2.6%) | Metrex | 11-1401 | |
| Heparin Sodium 10,000 USP u/ml | PPC | ||
| Carprofen | Metacam | ||
| Glycopyrrolate | Sandoz | ||
| Isoflurane | Abbott | ||
| Chlohexidine 2% | |||
| Alcohol 70% | |||
| Iodine | |||
| PE-50 | BD | 427411 | |
| CO-EX T22 | Instech Solomon | BCOEX-T22 | |
| Connector 22G | Instech Solomon | SC22/15 | |
| Swivel 22G | Instech Solomon | 375/22PS | |
| Y-Connector 22G | Instech Solomon | ||
| Counterbalance and arm | Instech Solomon | CM375BP | |
| 23 G blunted needles | Instech Solomon | LS23 | |
| 23 G canulation pins | Instech Solomon | SP23/12 | |
| Tethers (12 inch) | Lomir | RT12D | |
| Infusion jackets | Lomir | RJ01, RJ02, RJ03, RJ04 | |
| (SM-XL) | |||
| Tether attachment piece | Lomir | RS T1 | |
| 60 ml syringe | BD | 309653 | |
| 1 ml syringe | BD | 309602 |
References
- Poitout, V., Robertson, R. P. Glucolipotoxicity: fuel excess and beta-cell dysfunction. Endocr. Rev. 29, 351-366 (2008).
- Poitout, V., et al.
- Unger, R. H. Minireview: weapons of lean body mass destruction: the role of ectopic lipids in the metabolic syndrome. Endocrinology. 144, 5159-5165 (2003).
- Harmon, J. S., Gleason, C. E., Tanaka, Y., Poitout, V., Robertson, R. P. Antecedent hyperglycemia, not hyperlipidemia, is associated with increased islet triacylglycerol content and decreased insulin gene mRNA level in Zucker diabetic fatty rats. Diabetes. 50, 2481-2486 (2001).
- Bachar, E., Ariav, Y., Cerasi, E., Kaiser, N., Leibowitz, G. Neuronal nitric oxide synthase protects the pancreatic beta cell from glucolipotoxicity-induced endoplasmic reticulum stress and apoptosis. Diabetologia. 53, 2177-2187 (2010).
- Peyot, M. L., et al. Beta-cell failure in diet-induced obese mice stratified according to body weight gain: secretory dysfunction and altered islet lipid metabolism without steatosis or reduced beta-cell mass. Diabetes. 59, 2178-2187 (2010).
- Hagman, D. K., et al. Cyclical and alternating infusions of glucose and intralipid in rats inhibit insulin gene expression and Pdx-1 binding in islets. Diabetes. 57, 424-431 (2008).
- Fontes, G., et al. Glucolipotoxicity age-dependently impairs beta cell function in rats despite a marked increase in beta cell mass. Diabetologia. 53, 2369-2379 (2010).
- Stein, D. T., et al. Essentiality of circulating fatty acids for glucose-stimulated insulin secretion in the fasted rat. J. Clin. Invest. 97, 2728-2735 (1996).
- Leahy, J. L., Cooper, H. E., Weir, G. C. Impaired insulin secretion associated with near normoglycemia. Study in normal rats with 96-h in vivo glucose infusions. Diabetes. 36, 459-464 (1987).
- Hager, S. R., Jochen, A. L., Kalkhoff, R. K. Insulin resistance in normal rats infused with glucose for 72 h. The American Journal of Physiology. 260, 353-362 (1991).
- Laybutt, D. R., Chisholm, D. J., Kraegen, E. W. Specific adaptations in muscle and adipose tissue in response to chronic systemic glucose oversupply in rats. The American Journal of Physiology. 273, E1-E9 (1997).
- Jonas, J. C., et al. High glucose stimulates early response gene c-Myc expression in rat pancreatic beta cells. The Journal of Biological Chemistry. 276, 35375-35381 (2001).
- Tang, C., et al. Glucose-induced beta cell dysfunction in vivo in rats: link between oxidative stress and endoplasmic reticulum stress. Diabetologia. 55, 1366-1379 (2012).
- Alonso, L. C., et al. Glucose infusion in mice: a new model to induce beta-cell replication. Diabetes. 56, 1792-1801 (2007).
- Magnan, C., Gilbert, M., Kahn, B. B. Chronic free fatty acid infusion in rats results in insulin resistance but no alteration in insulin-responsive glucose transporter levels in skeletal muscle. Lipids. 31, 1141-1149 (1996).
- Goh, T. T., et al. Lipid-induced beta-cell dysfunction in vivo in models of progressive beta-cell failure. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 292, 549-560 (2007).
- Pascoe, J., et al. Free fatty acids block glucose-induced beta-cell proliferation in mice by inducing cell cycle inhibitors p16 and p18. Diabetes. 61, 632-641 (2012).
- Bell, C. G., Walley, A. J., Froguel, P.
- Fontes, G., Hagman, D. K., Latour, M. G., Semache, M., Poitout, V. Lack of preservation of insulin gene expression by a glucagon-like peptide 1 agonist or a dipeptidyl peptidase 4 inhibitor in an in vivo model of glucolipotoxicity. Diabetes Res. Clin. Pract. 87, 322-328 (2010).
- Crawford, P. A., Schaffer, J. E. Metabolic stress in the myocardium: Adaptations of gene expression. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. , (2012).
- Kewalramani, G., Bilan, P. J., Klip, A. Muscle insulin resistance: assault by lipids, cytokines and local macrophages. Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab Care. 13, 382-390 (2010).
- Cusi, K. Role of obesity and lipotoxicity in the development of nonalcoholic steatohepatitis: pathophysiology and clinical implications. Gastroenterology. 142, 711-725 (2012).
