Summary
Transabdominal ultraljud beskrivs som ett effektivt, icke-invasivt sätt att bedöma reproduktiv status i Reeves muntjac hjort. Dessa metoder kan användas för att uppnå tidig graviditet diagnos och för att utvärdera fetala livskraft. Framtida tillämpningar av denna teknik inkluderar uppskattning av graviditetslängd ålder och effekter av moderns sjukdom på fetala utveckling.
Abstract
Reeves muntjac hjort (Muntiacus reevesi) är en liten hjortdjursart som är infödd i Sydostasien, och undersöks för närvarande som en potentiell modell för överföring av prionsjukdomar och patogenes. Vertikal överföring är ett område av intresse bland forskare som studerar infektionssjukdomar, inklusive prionsjukdom, och dessa undersökningar kräver effektiva metoder för att utvärdera effekterna av moderns infektion på reproduktiv prestanda. Ultrasonografisk undersökning är ett väletablerat verktyg för att diagnostisera graviditet och bedöma fosterhälsa hos mångadjurarter 1-7, inklusive flera arter av odlade hjortdjur8-19, men denna teknik har inte beskrivits i Reeves muntjac hjort. Här beskriver vi tillämpningen av transabdominal ultraljud för att upptäcka graviditet i muntjac gör och att utvärdera fetala tillväxt och utveckling under hela graviditetsperioden. Med hjälp av detta förfarande identifierades dräktiga djur så tidigt som 35 dagar efter doe-buck parning och detta var ett effektivt sätt att säkert övervaka graviditeten med jämna mellanrum. Framtida mål för detta arbete kommer att omfatta fastställande av normala fetala mätreferenser för uppskattning av graviditetslängd ålder, bestämma känslighet och specificitet av tekniken för att diagnostisera graviditet i olika stadier av dräktigheten och identifiera variationer i fetala tillväxt och utveckling under olika experimentella villkor.
Introduction
Ultrasonografisk undersökning är en väl beskriven metod för graviditetsdiagnos hos nötkreatur1,får2,3,getter 4,hästar 5,sällskapsdjur6,7och andra inhemska djurarter. Denna bildframställning modalitet har också identifierats som ett värdefullt verktyg för graviditet upptäckt och fetala ålder uppskattning i flera arter av fångenskap hjortdjur, inklusive dovhjorten8-11,kronhjorten12-16,Hokkaido sika hjort17, ochrenar 18,19. I många fall har ultrasonografi producerat högre noggrannhet än andra mekanismer för graviditet upptäckt, såsom serum progesteron eller graviditet-associerade glykoprotein analys9,18. Dessutom kan ultrasonographic visualisering av reproduktionskanalen ge ytterligare information om fetala livskraft, graviditetslängd ålder och identifiering av utvecklingsmässiga avvikelser som annars skulle vara svårt att bedöma. Nyttan av ultrasonography för utvärdering av reproduktiv status föreslår att denna metod bör anpassas till andra arter där aktiva avelsprogram används.
Reeves muntjac hjort (Muntiacus reevesi) är en liten hjortdjursart som är infödd i sydostasien20. Medan reproduktionscykeln hos dessa djur inte är väl karakteriserad i sina inhemska territorier, har studier av vilda populationer i delar av södra England förbättrat förståelsen för derasavelsmönster 20. Till skillnad från de flesta hjortdjur verkar Reeves muntjac uppfödas året runt, utan några uppenbara säsongsfasadtoppar20-22. Kvinnlig muntjac föder vanligtvis en enda fawn efter en 210-dagars graviditetsperiod och på ett tillförlitligt sätt ange en postpartum estrus inom 24 timmar20-22. Blir det inte gravid under denna postpartumperiod kommer att återvända till estrus cirka 24-25 dagar senare20. I fångenskap situationer uppnås reproduktion vanligtvis genom bostäder gör med en eller flera intakta hanar. Detta system ger tillfredsställande befruktningsgrader och kräver liten teknisk skicklighet för personalen, men exakta avelsdatum är svåra, om inte omöjliga, att bestämma.
Muntjac används ofta i cytogenetiska studier på grund av det stora utbudet av diploidkromosomtal och hög frekvens av karyotypisk diversifiering bland de olikaarterna 23. Dessa djur undersöks för närvarande också som en modell för prionsjukdomspatogenes och överföring, med särskilt intresse för studier av vertikal överföring av kronisk slösande sjukdom (CWD) hos hjortdjur. Muntjacs betydelse i ett antal olika forskningstillämpningar tyder på att förbättrad reproduktiv teknik bör inrättas för att komplettera de nuvarande utredningsförfarandena. Specifikt kan icke-invasiva mekanismer för att bedöma graviditetsperioden potentiellt klargöra kritiska variationer i reproduktiv prestanda och fetala tillväxt och utveckling under olika experimentella förhållanden. Vidare skulle utvecklingen av fostermätningsreferenser i realtid vara potentiellt värdefull för att uppskatta graviditetsåldern i situationer där avelsdatum inte kan fastställas. Tidigare studier har beskrivit mekanismer för att använda fetala mätningar, såsom kron-rumpa längd (CRL), bröstdjup (CD) och huvudlängd (HL) för att uppskatta det ungefärliga dräktighetsstadiet hoshjortdjursarter 11-14, 16,17. Dessutom har vissa av dessa studier också fastställt riktlinjer som beskriver när specifika utvecklingsmässiga milstolpar, såsom skelettmineralisering eller fetala hjärtslag, kan identifieras8-19. Medan dessa data kan vara användbara för att vägleda reproduktiv ultraljudsanalys i muntjac, har de flesta andra studerade hjortdjur mycket större kroppsstorlek och längre graviditetsperioder, vilket minskar översättningsvärdet av dessa studier för muntjac-applikationer.
Protokollet som beskrivs här beskriver transabdominal ultrasonography av kvinnliga muntjac för att diagnostisera och övervaka graviditet. Framgångsrikt utförande av detta protokoll kan underlätta tidig graviditet upptäckt och utvärdering av fetala tillväxt och utveckling. Denna teknik har värdefulla tillämpningar i genomförandet av studier som undersöker reproduktion, in utero utveckling eller vertikal överföring av infektionssjukdomar i en liten cervid modell och kan också vara användbar för kliniska ändamål i fångenskap avel operationer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Förberedelse av förfaranden
Alla djurförsök som beskrivs har granskats och godkänts av Institutional Animal Care and Use Committee vid Colorado State University, en association för bedömning och ackreditering av laboratoriedjurvård (AAALAC), Intl. ackrediterad institution.
- Före undersökningen immobilisera djur med lämpliga sederings- eller anestesiprotokoll för att ge avslappning och möjliggöra lämplig positionering. En hanterare håller fast hjorten medan en andra person administrerar sederingen till djuret.
Anmärkning: Författarna har funnit följande kombination för att ge effektiv sedering i denna art: butorphanol (0,45 mg/kg), azaperon (0,035 mg/kg) och medetomidin (0, 04 mg/kg), administreras intramuskulärt i gluteala muskler. - När doe har nått ett sederingsplan som möjliggör kompatibel hantering, placera henne i antingen dorsal eller lateral återplantering på ett undersökningsbord eller inom ett V-tråg. Lyft huvudet, nacken och bröstkorgen något (ca 20-30°) för att minska risken för uppstötning och aspiration av idisslarinnehåll och för att underlätta korrekt ventilation under proceduren.
Anmärkning: Hos de flesta hjortdjur eller andra idisslarearter utförs buk ultraljud hos stående djur; Emellertid, den lilla storleken och beteendemässiga överväganden av denna art kräver tung sedering för undersökning och sternala positionering är därför svårare och kan utesluta effektiv bildframställning teknik. Positionering av djuret halvvägs mellan sternal och laterala liggande liggande kan vara idealisk för att minska risken för uppstötning och hypoventilation och bör övervägas om möjligt. I alla återhållsama läge är det viktigt att noggrant övervaka djurens andning och omedelbart stoppa undersökningen och placera djuret i sternal recumbency om uppstötning eller hypoventilation noteras. - Klipp vid behov hår från det område av buken som ska undersökas för att uppnå tillräcklig kontakt mellan givarens fotavtryck och huden.
Anmärkning: I tidig dräktighet kan bevis på graviditet detekteras i kaudal buken nära bröstkörtlarna. Denna region i muntjac är vanligtvis hårlös, och därför kan rakning inte anges för närvarande. När fostret växer och livmodern distends för att uppta en mer hjärnskålen position i buken, klippning av håret kommer att vara nödvändigt före bildbehandling. Försiktighet bör vidtas för att undvika att orsaka mekaniska skador på huden, inklusive skärsår från rakblad eller termiska skador från elektriska klippare. - Placera ultraljudsenheten på en plats som gör det möjligt för teknikern att enkelt visualisera bildskärmen medan han eller hon utför undersökningen med sin dominerande hand. Indata om identifiering av djur (namn, identifikationsnummer osv.)i systemet för att automatiskt märka sparade bilder och videoloopar.
2. Transabdominal reproduktiv ultraljud undersökning
- Applicera en generös mängd akustisk kopplingsgel på kaudal buken.
- Placera en 5-10 MHz böjd linjär givare på huden på kaudal buken, omedelbart hjärnskålen till pubis, och flytta den långsamt i en kranial riktning för att utvärdera strukturerna i bäckenhålorna hålighet. Skanna vänster och höger kvadranter i kaudal buken för att bedöma båda hornen i muntjacs bicornuate livmoder.
Anmärkning: Omfattande buken ultraljud innebär bedömning av alla buken inälvor, inklusive lever, njurar, mjälte, mag-tarmkanalen, urinblåsan och reproduktiva systemet. I detta protokoll kommer endast undersökning av graviditet att diskuteras i detalj. Det normala utseendet på andra kaudala bukorgan bör dock erkännas eftersom dessa strukturer sannolikt kommer att uppstå under studiens gång. Organ som oftast ses på denna plats inkluderar segment av mag-tarmkanalen, urinblåsan och reproduktionskanalen. De stora och små tarmarna identifieras av tarmväggens karakteristiskt skiktade utseende. Lumen kan eller får inte uttalas beroende på typ och mängd innehåll, vilket kan inkludera vätska, gas, slemhinnor eller matpartiklar. Urinblåsan kan vara svår att identifiera om den inte distended med urin, och lagren av urinblåsan väggen är betydligt mindre distinkta än tarmarna. Förutom livmodern kan äggstockarna också hittas på ultraljud av det reproduktiva systemet hos den kvinnliga muntjac. Äggstockarna kommer att visas som äggformade strukturer nära njurarnas kaudala pol, och deras utseende kan förändras under estriska cykeln. Närvaron av flera mogna, vätskefyllda folliklar i cortex är suggestiv av estrus.
Anmärkning: Genom att rotera och/eller "fanning" av givarens scanhead kan strukturer utvärderas i tvärgående eller sagitala plan.- Om det behövs för att skilja en gravid livmoder från urinblåsan, töm blåsan manuellt genom att applicera försiktigt tryck på kaudal buken eller genom att placera en urinkateter och upprepa skanningen.
Anmärkning: Manuellt uttryck av urinblåsan bör endast försökas när djuret är i ett sternalt eller upprätt läge, vilket underlättar en mer naturlig orientering av buken inälvor och minskar risken för trauma till andra strukturer. Livmodern kan också skiljas från urinblåsan genom att bedöma tjockleken på organets vägg. Den typiska tjockleken på en måttligt distended urinblåsa är cirka 1,4 mm24, medan författarna har funnit att den mer muskulösa väggen i den gravida livmodern i muntjac i allmänhet mäter mellan 7-8 mm.
Anmärkning: Tidig graviditet är svårt att diagnostisera definitivt på grund av brist på identifierbara fetala strukturer, och i själva verket kan den första indikationen på graviditet helt enkelt vara en liten vätskeficka i kaudal buken. Om det ses vid denna tidpunkt kommer det utvecklande embryot att visas som en hyperechoic, äggoid till amorf struktur i livmodern (Figur 1).
- Om det behövs för att skilja en gravid livmoder från urinblåsan, töm blåsan manuellt genom att applicera försiktigt tryck på kaudal buken eller genom att placera en urinkateter och upprepa skanningen.
- Gör justeringar av djupet, frekvensen och få vid behov för att förbättra kontrasten och bilddetaljerna.
Obs:högre frekvenser är associerade med kortare våglängder, vilket är nödvändigt för förbättrad bildupplösning. De flesta givare kan arbeta inom en rad frekvenser (till exempel 6-10 MHz)24. Frekvensen kan justeras med hjälp av skannerkontrollerna på ultraljudsenheten, och ökande frekvens resulterar i en tydligare bild. Ökande frekvens minskar samtidigt djupet av ljudvågspenetration; Därför kan det vara nödvändigt att minska frekvensen för att visualisera djupare strukturer, men upplösningen kan äventyras24. Av denna anledning är det viktigt att välja högsta möjliga frekvens för att nå önskat vävnadsdjup. Justeringar av förstärkningskontrollerna kommer att förändra förstärkningen av ljudvågor som återvänder till givaren från vävnaderna och påverkar graden av kontrast i bilden24. Förstärkningen bör ställas in på en punkt där optimal kontrast mellan hypereko- och hypoekovävnader uppnås, och dessa inställningar kan behöva justeras beroende på de strukturer som avbildas.
3. Erhållande av fostermätningar
Anm.:Graviditetslängdsåldern hos många tamdjursarter kan uppskattas med hjälp av etablerade referensintervall för fostermätningar från ultraljudsundersökningar. De vanligaste mätningarna inkluderar rak kron-rumplängd (SCRL), bröstdjup (CD) och huvudlängd (HL)17. Även om tillräckliga data ännu inte har samlats in för att utveckla tillförlitliga riktlinjer för graviditetslängdsåldern i Reeves muntjac hjortar, kan mätningar samlas in för att börja fastställa dessa referenser. Fetala hjärtfrekvens (FHR) har visats hos andra arter av hjortdjur och idisslare att öka linjärt när dräktigheten fortskrider till en viss punkt (vanligtvis runt dag 60 av dräktigheten), då hjärtfrekvensen börjar minska17. FHR kan användas för att uppskatta graviditetslängd ålder tillsammans med andra ultraljud observationer, men det används oftare som ett mått på fetala livskraft17,24. FHR har beräknats i Reeves muntjac så tidigt som 35 dagar efter observerad parning.
- För att mäta SCRL, lokalisera livmodern på monitorn och gör fina justeringar av givarens position tills en sagital vy över hela fostret erhålls (figurerna 2 och 3). Frys bilden och mät avståndet mellan skallens mest dorsala aspekt och sacrumbasen (figurerna 2 och 3).
- För att mäta CD, få en sagittal vy över fostret (samma bild kan användas för att mäta SCRL) och mäta avståndet mellan bröstkorgens dorsala och ventrala aspekter (figurerna 2 och 3).
- För att mäta HL, med samma sagittala vy av fostret som beskrivs för SCRL- och CD-mätningarna, mät avståndet från occipitalkammen till näsbasen (figurerna 2 och 3).
- För att beräkna fostrets hjärtfrekvens, identifiera hjärtat i fostrets brösthåla genom att visualisera dess rytmiska sammandragningar. Beräkna pulsen genom att räkna antalet sammandragningar (hjärtslag) som inträffar inom en 1 min tidsperiod.
Anmärkning: Om ultraljudsenheten som används har Doppler kapacitet, denna funktion kan användas för att ytterligare hjälpa till att skilja hjärtat från andra ospecificerade fetala rörelser. - Kontrollera att alla sparade bilder och videoloopar innehåller all nödvändig identifierande information, inklusive djurnamn eller djurnummer, datum, mätningar och lämpliga strukturetiketter.
4. Förfarandemässiga slutsatser och återkrav
- Ta bort all återstående ultraljudskontaktgel från djurets buk med en mjuk trasa eller pappershanddukar. Rengör gelén från givaren före förvaring.
- Om du använder sederingsprotokollet som beskrivs i steg 1. 1, administrera atipamezole subkutant med en dos på 0, 25 mg/kg för att vända effekterna av medetomidin. Om du använder ett annat sederingsprotokoll där en antagonist är tillgänglig, administrera detta medel till djuret enligt publicerade doser vid slutet av förfarandet för att påskynda återhämtningen.
- Placera muntjac på en mjuk bäddad yta i sternal liggande, med huvudet något förhöjt för att minska risken för uppstötning och aspiration av rumenalinnehåll. Övervaka djuret noga tills det är helt återhämtat och kan ambulera runt inneslutningen utan hjälp.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Med hjälp av protokollet som beskrivs här kan graviditet diagnostiseras och övervakas i Reeves muntjac hjort med minimalt invasiva tekniker. Den tidigaste tidpunkten att graviditet kunde upptäckas av författarna var cirka 35 dagar efter observerat parningsbeteende.
I de tidiga stadierna av dräktigheten diagnostiserades graviditet genom att visualisera en vätskefylld livmoder identifieras som ett anekoiskt utrymme i kaudal buken. Inom livmodern uppträdde det utvecklande embryot som en hyperekotisk, äggformad struktur med få identifierbara egenskaper (figur 1). När graviditeten fortskrider blev fetala strukturer uppenbara och en avgörande diagnos kunde göras efter observation av skelettmineralisering och fetala hjärtslag (figurerna 2 och 3).
Fetala mätningar kan erhållas och användas för att fastställa referensriktlinjer för uppskattning av graviditetslängd ålder i fall där ett exakt avelsdatum inte är känt, även om vi ännu inte har fullt utvecklat detta system i muntjac. Rak kron-rump längd (SCRL), HL och CD är standard fetala mätningar som vanligtvis används för att uppskatta fetala ålder i många arter17, och dessa mätningar erhölls från ultraljud bilder av muntjac graviditeter med hjälp av protokollet beskrivs här. Alla tre av dessa mätningar kan erhållas från samma korrekt placerade sagittalbild (figurerna 2 och 3), men separata bilder kan användas om hela fostret inte kan fångas i en enda sagittal vy. I framtiden kan dessa tekniker också användas för att identifiera variationer i tillväxt och utveckling som observerats under olika experimentella förhållanden och för att bestämma fostrets livskraft.
Figur 1. Ultraljud bild visar tidig graviditet i en Reeves muntjac rådjur. Doe i denna studie hade varit inrymt med en intakt manlig muntjac i 46 dagar, men ett exakt avelsdatum är inte känt. Fetala funktioner är inte urskiljbara i detta skede av dräktigheten.
Figur 2. Ultraljudsbild av samma graviditet avbildad i figur 1, 91 dagar efter införandet av doe till bocken. (CD - bröstdjup, HL - huvudlängd, P - placentome, SCRL - rak kron-rumplängd).
Figur 3. Ultraljud bild av en andra graviditet visar lämplig positionering för att erhålla fetala mätningar. Bild tagen 91 dagar efter införandet av doe till bocken. (CD - bröstdjup, HL - huvudlängd, P - placentome, SCRL - rak kron-rumplängd).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Detta protokoll beskriver tillämpningen av transabdominal ultrasonography för graviditet diagnos i Reeves muntjac rådjur. Överensstämmer med andra ultraljud studier, lämplig utrustning och tekniska färdigheter är absolut nödvändigt för en framgångsrik reproduktiv undersökning av muntjac doe. Noggrann översyn av grundläggande däggdjur anatomi, de fysiska principerna för diagnostiska ultraljud och det typiska ultrasonographic utseendet på buken inälvor kommer att bidra till att minska felaktiga diagnoser. Dessutom är val av lämpliga givare och förtrogenhet med instrumenterings- och skannerkontroller avgörande för att få högkvalitativa bilder och korrekt tolkning.
För många oerfarna ultrasonografer är bild artefakter en vanlig orsak till dålig bildupplösning och felaktig bedömning av strukturer. Efterklang vid hud-givare gränssnittet är en av de vanligaste påträffade artefakter i veterinära buken ultraljud, och kan minskas avsevärt genom att eliminera förekomsten av gas mellan de två ytorna. Adekvat hårborttagning och generös applicering av akustisk gel på huden bör vara tillräckligt för att minimera effekten av denna artefakt. Diskussioner om andra bild artefakter finns i olika texter av mänskliga och veterinära ultrasonography, och kommer därför inte att diskuteras mer i detalj här; en allmän kunskap om dessa fenomen kommer dock att göra det möjligt för ultrasonografen att kontrollera dem mer effektivt24.
Om man genomför en reproduktiv undersökning bör det förstås att livmodern kan vara svår att visualisera hos ett normalt, icke-befruktande djur. I tidig graviditet kan livmoderns lumen bli identifierbar som hypoekotisk till anekoiskt utrymme när graviditetssäcken bildas. I detta skede i muntjac kan livmodern vanligtvis hittas genom att skanna på nivån av, eller något kaudal till, bröstkörtlarna. Före skelettmineralisering eller utseendet på ett foster hjärtslag, graviditet kan misdiagnosed i närvaro av andra reproduktiva villkor orsakar vätska att ackumuleras i livmodern, som kan inkludera patologi såsom pyometra, hydrometra eller mucometra. Ultraljudsdiagnoser bör göras i samband med en fullständig klinisk bedömning av djuret före sedering för proceduren. I tidig dräktighet kommer conceptus att visas som en sfärisk till äggoid, hyperechoic struktur inom fosterhinnan säcken. Specifika utvecklingsmässiga tidpunkter är inte väl karakteriserade i denna art; Skelett mineralisering och fetala hjärt rörelse verkar dock vara konsekvent detekterbara vid cirka 8 veckor efter parning.
Under idealiska förhållanden kan transabdominal ultraljud vara ett otroligt användbart verktyg för utvärdering av reproduktiva strukturer i många arter, inklusive Reeves muntjac. Värdet av denna teknik är dock i hög grad beroende av den specifika kapaciteten hos djurens inhysningsanläggningar. Till skillnad från mer passiva mekanismer för graviditetsdetektering, såsom visuell observation av parningsbeteende och efterföljande bukdistention av doe, kräver ultraljud fysisk och/ eller kemisk fasthållning av djuret under en tidsperiod som varar 5-10 min eller längre. I många anläggningar är detta inte möjligt eller praktiskt, och undersökningens nödvändighet bör övervägas på grundval av studiens specifika mål. Dessutom kan vissa fysiologiska eller patologiska tillstånd föreslå att ultrasonography kontraindiceras hos vissa djur på grund av de potentiellt skadliga effekterna av nöd relaterade till fångst och sedering. Det är viktigt att bedöma varje djurs lämplighet för ultraljudsundersökning innan studien påbörjas, och en veterinär bör konsulteras i planeringsstadierna för dessa projekt.
Nuvarande praxis för graviditet upptäckt i Reeves muntjac och andra vilda arter är vanligtvis passiva till sin natur (observation av parning beteende och buken distention i gör). Serumprogesteron eller graviditetsrelaterade glykoproteinnivåer kan mätas för att bekräftadiagnosen 18,25, men resultaten av dessa analyser ger ingen information om graviditetsstadiet eller fostrets livskraft. Ultraljud erbjuder fördelen med att tillåta realtidsbedömning av reproduktiv status med noggrannhet som liknar eller är större än för serumhormonanalyser18, samtidigt som minimal invasivitet och ångest för djuren bibehålls. I operationer där avelsdatum är svårt eller omöjligt att fastställa kan ultraljud ge en mer exakt mekanism för att uppskatta graviditetsstadiet än hormonella analyser, även i avsaknad av publicerade graviditetstabeller. Dessutom verkar fysisk och kemisk återhållsamhet för ultraljudsundersökning orsaka minimal ångest för friska muntjac och ger ett idealiskt tillfälle att utföra en grundlig fysisk undersökning och samla in ytterligare prover (blod, urin, etc.) för allmänna hälsobedömningar.
Graviditetslängd ålder uppskattning genom ultrasonographic mätningar har fastställts i många arter, inklusive nötkreatur1,får2,3,getter 4, och hästar5, och har beskrivits i ett begränsat antal hjortdjur arter samt8-19. I avsaknad av exakta avelsdatum eller etablerade dräktighetstabeller kan fosteråldern för Reeves muntjac endast uppskattas grovt baserat på fosterutvecklingsparametrar som beskrivs för andra arter. Ett specifikt mål för det arbete som beskrivs här är att fastställa mer formella riktlinjer för foster åldrande i denna art. Med tillräckliga normativa data på plats, framtida tillämpningar av ultrasonography i denna koloni kommer att omfatta identifiera avvikelser i fetala utveckling i närvaro av olika experimentella variabler och bedöma fetala livskraft. Dessutom kan känslighet och specificitet av transabdominal ultraljud bestämmas och jämföras med andra vanliga mekanismer för att upptäcka graviditet hos hjortdjur arter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inget att avslöja.
Acknowledgments
Författarna vill tacka Jeanette Hayes-Klug och Kelly Anderson för förvaltningen av muntjackolonin, Dr Alan Young för att ha introducerat oss till muntjac och Mr Cleve Tedford från Cervid Solutions Inc. för att ha tillhandahållit frömuntjac för detta projekt. Detta arbete stöddes av NIH-bidrag R01AI093634.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
| Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
| V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
| Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
| Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
| 5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
| 3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
| 22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
References
- White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
- Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
- Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
- Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
- Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
- Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
- Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
- Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
- Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
- Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
- Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
- White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
- Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
- Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
- Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
- Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
- Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
- Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
- Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
- Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
- Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
- Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
- Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
- Nyland, T. G., Mattoon, J. S. Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 2nd edition, Saunders. Philadelphia. 19-29 (2002).
- Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
