Abstract
Forurening af blodplade enheder af bakterier har længe været anerkendt som en væsentlig transfusion risiko som følge af deres post-donation opbevaringsbetingelser til. Produkter rutinemæssigt opbevares ved 22 ° C på et rysteapparat omrøring, en tilstand, som kan fremme bakterievækst. Selv om det samlede antal bakterier menes at indføres i en blodplade produkt er ekstremt lavt, kan disse bakterier formere sig til en meget høj titer før transfusion, hvilket kan medføre alvorlige bivirkninger. Formålet med denne undersøgelse var at vurdere en riboflavin baseret reduktion af patogener proces mod et panel af bakterier, der er blevet identificeret som fælles kontaminanter i trombocytprodukter. Dette panel omfattede følgende organismer: S. epidermidis, S. aureus, S. mitis, S. pyogenes, S. marcescens, Y. enterocolitica B. neotomae, B. cereus, E. coli, P. aeruginosa og K. pneumoniae. Hver blodpladeenhed blev inokuleret med en høj bakteriel belastning, og prøver blev fjernet bOTH før og efter behandling. En kolonidannende assay under anvendelse af et slutpunkt fortynding ordningen blev anvendt til bestemmelse af præ-behandling og post-behandling bakterielle titere. Log reduktion blev beregnet ved at trække efterbehandlingen titer fra forbehandling titer. Følgende reduktioner log sås S. epidermidis 4.7 log (99,998%), S. aureus 4,8 log (99,998%), S. mitis 3,7 log (99,98%), S. pyogenes 2,6 log (99,7%), S. marcescens 4,0 log (99,99%), Y. enterocolitica 3,3 log (99,95%), B. neotomae 5,4 log (99,9996%), B. cereus 2,6 log (99,7%), E. coli ≥5.4 log (99,9996%), P. aeruginosa 4,7 log (99,998%) og K . pneumoniae 2,8 log (99,8%). Resultaterne fra dette studie tyder processen kunne bidrage til at mindske risikoen for alvorlige bivirkninger transfusion hændelser forbundet med bakteriel forurening.
Introduction
Transfusion af blodplader, plasma, pakkede røde blodlegemer og fuldblod produkter spiller en vigtig rolle i moderne medicin og kan anvendes til behandling af forskellige medicinske tilstande, erstatte vitale væsker og i sidste ende redde liv. Blodplader er et cellulært produkt, der enten er isoleret fra fuldblod og samlet i en transfusable dosis eller opsamles gennem processen med blodplade aferese. Den vigtigste rolle af blodplader i kroppen er at stoppe blødningen ved sår steder og for at bevare hæmostase. Patienter, der lider et lavt blodplader celletal (trombocytopeni) er modtagelige for spontane blødninger og er transfunderet med blodplader til at bringe deres trombocyt celletal tilbage i en normalområdet. Indsamlede blodplader lagres i højst 5-7 dage og opbevares ved 22 ± 2 ° C, medens under konstant omrøring.
På trods af den livreddende egenskaber blodpladetransfusioner der stadig en lille risiko for transfusion modtagere på grund af contamination af disse produkter af parasitter, bakterier og vira 11. Gennemførelsen af viral nukleinsyre test (NAT) er faldet betydeligt risikoen for viral transmission af store blodbårne midler, såsom hepatitis C-virus (HCV), hepatitis B virus (HBV) og human immundefekt-virus (HIV) 5. En nylig publikation fra de canadiske Blood Services anslår den resterende risiko for disse midler til at være 1 pr 8 millioner donationer til HIV, 1 pr 6,7 mio donationer til HCV og 1 pr 1,7 mio donationer til HBV 15.
Selvom bakterier typisk samle mindre opmærksomhed i offentligheden, har hyppigheden af bakteriel forurening i blodplade produkter er blevet vurderet til at være så høj som 1: 1.000 7, og fordi millioner af blodplade produkter er transfunderet hvert år mange modtagere er udsat for potentielt livstruende komplikationer ligesom sepsis 6. Forskning tyder på, at den bakterielle belastning på det tidspunktfor forurening er lav, <100 kolonidannende enheder (CFU) / produkt 2,16 imidlertid næringsrigt miljø og opbevaring ved stuetemperatur i tillader kontaminerende bakterier at formere til faretruende høje titre før transfusion. I øjeblikket er de eneste godkendte metoder til rådighed for at forhindre bakterielt forurenede produkter i at nå en trombocyt modtageren er gennem brug af kultur baserede systemer og hurtig point of care test. Kort fortalt, for kultur baserede systemer trombocytprodukter gemmes på en omrører ved 22 ° C i 12-24 timer for at tillade bakterier at formere i produktet, hvorefter en 4-8 ml prøve fjernes fra blodplade produkt og inokuleres i en flaske indeholdende næringsmedium. Flasken anbringes i et instrument, der overvåger flasken for bakterievækst. Hvis instrumentet registrerer bakterievækst i den flaske, den er markeret, og den tilsvarende blodpladeenhed kasseres. Mens denne proces er rimelig vellykket på at opdage hurtigt grofløj organismer, at mange af de langsomtvoksende arter, der ikke vokse til en høj nok titer, der skal detekteres, hvilket skaber muligheden for falsk negative enheder skal frigives til transfusion 7,12,14,16,22. I modsætning til kultur baseret detektionssystemer er hurtig point of care test typisk senere i perioden blodpladeopbevaring når den bakterielle belastning er steget markant. De højere titre er påkrævet, da point of care test er mindre følsomme end kultur baserede systemer, og kun detektere bakterier, når de når en titer ≥1 x 10 3 CFU / ml 17. Men sådanne test kan give resultater inden for 1 times prøvetagning. Variation i udførelsen af disse tests har ført til udgivelsen af et falsk negativt produkt, der forårsager en fatal septisk reaktion i modtageren 9.
En alternativ måde at bekæmpe problemet med bakteriel forurening af trombocytprodukter er gennem den rutinemæssige anvendelse af en reduktion af patogener process, der kan inaktivere kontaminerende bakterier i stedet for at forsøge at opdage dem. Brug af riboflavin som en fotosensibilisator i kombination med UV-lys, har vist sig at reducere smitsomheden af en bred vifte af patogene kontaminanter blodbårne, herunder bakterier 3,4,8,10,19-21 .Den anvendelse af riboflavin og UV lys til reduktion af patogener er ugiftig og ikke-mutagene, og riboflavin og UV-lys-behandlede komponenter er blevet vist at være sikkert til transfusion modtagere såvel som for dem, der håndterer blodprodukter 18. Kort fortalt, kan riboflavin molekyler associerer med nukleinsyrerne (DNA og RNA) af bakterier, parasitter, vira og enhver celle med kerne (f.eks hvide blodlegemer). Udsættelse for UV-lys aktiveres riboflavin, forårsager en kemisk ændring til funktionelle grupper af nukleinsyrerne (primært guaninbaser), hvilket forhindrer replikation og / eller transkription af nukleinsyrerne og forlader organismen inaktiveres 13. Kernefri celler som pladelader og røde blodlegemer påvirkes ikke af riboflavin kemi på grund af mangel af nukleinsyre.
Tidligere arbejde med riboflavin og UV-lys teknologi evalueret en udvalgt gruppe af bakterier under anvendelse af et eksperimentelt design har til formål at efterligne et blodplade produkt kontamineret med en klinisk relevant bakterieindhold (<20 CFU / produkt) 8. Målet med denne undersøgelse var at evaluere riboflavin og UV-lys processen mod høj titer bakteriel forurening (> 1,0 x 10 5 CFU / ml) i blodplade, der er behandlet i plasma med henblik på at måle den samlede bakteriel reduktion systemets kapacitet. Baseret på data indsamlet fra hemovigilance undersøgelser 1, blev et panel af almindeligt forekommende gramnegative og grampositive organismer udvalgt til evaluering i denne undersøgelse og omfattede følgende arter: Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Streptococcus mitis, Streptococcus pyogenes, Serratia marcescens Yersinia enterocolitica ,Brucella neotomae, Bacillus cereus (vegetativ form), Esherichia coli, Pseudomonas aeruginosa og Klebsiella pneumoniae. Alle organismer undtagen B. cereus, blev opnået fra ATCC og en prioritet blev placeret på få bakteriestammer, der var blevet identificeret som isoleret fra blodkomponenter. B. cereus testet i denne undersøgelse er en klinisk stamme isoleret internt fra et forurenet blodplade produkt.
Protocol
1. Bakterier Suspension Forberedelse:
- Fra en udstrøget dyrkningsplade, aseptisk at inokulere en enkelt koloni til en 250 ml steril flaske indeholdende 100 ml af den passende vækstmedium (tabel 1) i form af sterile podenål.
- Placer flasken i en orbital rysteinkubator ved passende betingelser (tabel 1) i 1-2 dage, kontrol for vækst periodisk. Indstil shaker hastigheden til 140 rpm.
- Overfør aseptisk den bakterielle suspension i to sterile 50 ml koniske rør og centrifugeres rørene ved 3000 x g i 20 minutter ved 23 ° C.
- Aspirer supernatanten og resuspender hver bakteriel pellet med 15 ml sterilt peptonvand. Vortex som nødvendigt. Kombiner den suspenderede bakteriekultur i et rør / beholder.
- Titrere bestanden kultur i tre eksemplarer pr § 4 for at bestemme bestanden kultur titer.
- Opbevares i køleskab i op til 2 uger ved 477; 2 ° C indtil brug. Re-titer kulturen på tidspunktet for anvendelse, se trin 4.8.
2. Platelet Produkt Forberedelse:
- Saml en standard aferese menneskelig blodplader produkt på et akkrediteret blodbank. Det blodplader produkt skal opfylde følgende specifikationer indsamling: 90-360 ml volumen og 0,8 -3,8 x 10 6 blodplader / ul koncentration.
- Sørg for, at trombocyt produkt har hvilet i mindst 2 timer før behandling til reduktion af patogener. Opbevar produkterne ved 22 ± 2 ° C i en trombocyt inkubator uden omrøring til disse 2 timer. Efter to timer sikre blodplade produkt omrøres ved 22 ± 2 ° C i en inkubator blodplade. Bruge produktet i op til 22 timer efter samling.
- Anvendelse af en 3 ml sprøjte fjerne en 2 ml prøve til måling af pH 22C af blodplade produkt. Brug en blodgasanalysator at sikre at produktet har en pH> 6,6. Brug den samme prøve til måling af blodplade koncentrationen af blodplader produkt med en hæmatologisk analysator. Sikre, at produktet opfylder 0.80-3.8 x 10 6 blodplader / ul samling koncentration krav.
- Visuelt vurdere hvirvel af blodplade produkt. Hvis produktet har et "0" swirl produktet vil blive kasseret.
- Hold blodplade taske op under en direkte hvid-lyskilde og presse trombocyt taske kortvarigt. Visuelt observere hvirvlende mønster af blodpladeprøve. Score produktet ved hjælp af den følgende skala.
BEMÆRK: 2 - Positiv Swirl: Hvirvlende inhomogenitet synlig i hele taske med stærk kontrast. 1 - Intermediate Swirl: Nogle inhomogenitet synlige, men kun i et par steder og med dårlig kontrast. 0 - Negativ Swirl: Uklar homogenitet tilbage, før og efter at klemme trombocyt taske
3. Riboflavin og UV-lys Proces:
- TranSfer blodplade produkt til en riboflavin og UV-lys belysning og opbevaringspose anvendelse af en steril slange dockingenhed. Efter overførsel fjerne den tomme blodplader enhed opsamlingspose ved hjælp af en slange sealer og kassér den tomme pose som biologisk farligt affald.
- Fjern en 35 ml pose af 500 uM riboflavin stamopløsning fra dens lys beskyttende ydre wrap. Sterile dock riboflavin kit på indløbsledningen af posen behandling og opbevaring. Lad indholdet løbe ned i blodplader enhed.
- Hæng riboflavin pose / behandling og opbevaring taske sæt fra riboflavin pose og forsigtigt udtrykker resterende luft ud af posen behandling og oplagring og ind i riboflavin posen. Sikre en lille mængde af blodplade produkt er også udtrykt i riboflavin posen for at skylle eventuelle rester af riboflavin i blodplade produkt. Lad riboflavin og blodplade-opløsning løbe tilbage i posen behandling og oplagring og derefter klemme indløbsledningen. Fjern den tomme pose riboflavin osing en slange sealer og kassér den tomme pose som biologisk farligt affald.
- Sterile dock en 6 "slange linje med kvindelige sprøjte stik på indløb linje i belysning og opbevaringspose. Vedhæft en 10 ml sprøjte tønde (fjern stemplet) på den kvindelige sprøjte stikket.
- Tilsættes aseptisk 5 ml af stock bakterier ind i sprøjtekammeret via en pipette. Åbn klemmen på indløbsledningen og tillade bakterierne at dræne ind blodplade produkt. Skyl sprøjtecylinderen ved at lade nogle blodplade produkt at strømme tilbage i 10 ml sprøjtecylinderen. Fjern 10 ml sprøjtecylinderen.
- Aseptisk vedhæfte en 30 ml sprøjte og skylle indgangsporten mindst to gange for at sikre bestanden bakterier blandes i blodplade produkt. Når produktet er godt blandet, så brug en ren 5-10 ml sprøjte, og fjern en 2 ml forbehandling prøve. Ved hjælp af en ny sprøjte sikrer nogen luft indført fra podning trin eller prøveudtagning trin fjernes.
- Titrere forbehandling prøve pr afsnit 4.
- Fjern indløbsledningen fra posen behandling og oplagring og vejer produktet.
- Anbring produktet i illuminatoren og følg kommandoer til at starte en standard blodplader behandling.
- Indtast i bruger-ID.
- Fastgør og montere posen til Illuminator glaspladen.
- Indtast Prøve-ID ind i Illuminator ved hjælp af enten stregkodelæseren eller manuel indtastning tastatur.
- Scan produkttype.
- Luk kvarts klemme.
- Belysningen Enheden vil automatisk levere 6.24 J / ml energi. Den typiske behandlingstid tager 5-10 min.
- Efter behandling sterile dock en 6 "slange linje med kvindelige sprøjte stik på prøven pære linje behandling og opbevaringspose. Sikre, at produktet er godt blandet og derefter vedhæfte en 5 ml sprøjte, og fjern et 2 ml efter behandling prøve.
- Titrere efterbehandlingen samPLE per afsnit 4.
4. Bakteriel Titer
- Estimere titer af præ-behandling og post-behandling stikprøver og forberede passende antal 5 ml fortynding rør nødvendige for at udføre et slutpunkt seriefortynding af hver prøve. Fyldes aseptisk de nødvendige rør med 1,8 ml peptonvand.
- Titer hver prøve under anvendelse af en 10-fold seriefortynding ordningen. Overfør aseptisk 0,2 ml fra den ufortyndede prøve til den første fortynding røret (10 -1). Vortex denne fortynding rør og overfør 0,2 ml til næste fortynding røret. Fortsæt seriefortynding gennem det krævede antal fortyndinger.
- Overfør aseptisk 100 pi af hver fortynding skal pletteres til en passende agarplade (tabel 1).
- Anvendelse af en steril celle sprederen, fordeler prøven på hver agarplade.
- Vend og inkuberes pladerne på passende betingelser (
- Tæl plader med 30-300 kolonier. Plader indeholdende mere end 300 kolonier anses for talrige til at tælle (TNTC). Plader, der indeholder mindre end 30 kolonier anses for at være under grænsen for kvantificering (LOQ).
- Beregn titeren af hver prøve og registrere resultaterne som CFU / ml.
- Brug følgende ligning til at beregne CFU / ml:
- Hvis der ikke er kolonier på den laveste fortynding pladen, skal du bruge følgende ligning til at beregne detektionsgrænse (LOD):
og
Hvor:
N = laveste antal partikler (CFU) i pRODUKTINFORMATION som kan detekteres med stor succes.
P = sandsynligheden for, at en mikroorganisme vil være uopdaget; for en 95% sikkerhed for at opdage en mikroorganisme, P = 0,05.
V = samlede produkt volumen i ml
v = volumen belagt (ml) x fortynding niveau af pladen
- For negativ kontrol, plade 0,5 ml af peptonvand, der anvendes til de serielle fortyndinger på hver af to agarplader. Brug samme pladetype som prøverne, der skal testes. Vend og inkuberes pladen på de relevante betingelser i 1-2 dage kontrol for vækst med jævne mellemrum.
- Hvis der observeres vækst på begge agarplade, skal flaske peptonvand anvendes kasseres; resultaterne af undersøgelsen er også ugyldige.
- For Positiv kontrol, re-titer stamkulturen af bakterier, som blev anvendt. Vend og inkuberes pladerne ved de rette betingelser for 1-2 dage kontrol for vækst med jævne mellemrum. Titeren skal være ± 1,0 log CFU / ml af postened lager titer (Se afsnit 1.5) for den undersøgelse, der skal betragtes som gyldig.
Representative Results
Reduktionen af elleve forskellige bakteriearter blev evalueret ved brug af riboflavin og UV-lys baseret PRT processen. Disse midler repræsenterer nogle af de mere almindelige forureninger af trombocytprodukter og omfatter fem Gram positive og Gram negative seks organismer. Mindst seks trombocytprodukter blev evalueret pr organisme og hvert produkt blev inokuleret med nok bakterier til opnåelse af> 1,0 x 10 5 CFU / ml endelig titer af bakterier i blodplade produkt. Forud for behandling blev en prøve fjernet til bestemmelse af forbehandlingen titer, hvorefter blodplade produkt blev straks behandlet med riboflavin og UV-processen. Efter behandling af blodplader produkter blev observeret følgende reduktioner log S. epidermidis 4.7 log (99,998%), S. aureus 4,8 log (99,998%), S. mitis 3,7 log (99,98%), S. pyogenes 2,6 log (99,7%), S. marcescens 4,0 log (99,99%), Y. enterocolitica 3,3 log (99,95%), B.neotomae 5.4 log (99,9996%), B. cereus 2,6 log (99,7%), E. coli ≥ 5,4 log (99,9996%), S. aeruginosa 4,7 log (99,998%) og K. pneumoniae 2,8 log (99,8%) (figur 2). Alle enheder opfylder systemets specifikationer som angivet ovenfor for riboflavin og UV-processen. Yderligere testning reduktion blev udført med S. pyogenes under anvendelse af buffy coat afledt blodplader. Ingen signifikant forskel blev observeret i reduktionen af S. pyogenes i buffy coat afledte blodplader versus aferese blodplader (data ikke vist).
Tabel 1: vækstbetingelser for bakteriearter evalueret under anvendelse af riboflavin og UV-lys. Et panel af både gramnegative og grampositive bakterier, der har vist sig at forurene trombocytprodukter blev udvalgt til denne undersøgelse. Vækstbetingelserne (temperatur og medietype), der anvendes til at udbrede og titer organismerne er vist.
Figur 1: Riboflavin og UV-lys reduktion af patogener proces. Riboflavin blev opløst i 0,9% saltvand ved en nominel koncentration på 500 uM. Opløsningen blev sterilfiltreret tilsluttet og drænet i hver blodplade produkt. Bakterier blev tilsat aseptisk til hver blodpladeenhed og derefter behandlet med 6,2 J / ml UV-energi (ca. 6-10 minutter). I denne in vitro-undersøgelse efterbehandlingen blodpladeenhed blev udtaget for at bestemme den endelige bakteriel titer.
Figur 2: Reduktion af forskellige bakteriearter ved behandling med riboflavin og UV-lys riboflavin og UV-lys blev anvendt til at reducere de bakterielle belastninger af almindelige bakterielle kontaminanter i trombocytprodukter.. Loggen 10 reduktion er forskellenmellem den gennemsnitlige forbehandling titer og den gennemsnitlige efterbehandling titer. Klik her for at se en større version af dette tal.
Discussion
Bakteriel screening er blevet almindelig praksis i blod pengeinstitutter og for mange steder, det tjener som den primære metode til at forhindre transfusion af bakterielt forurenede blodplader. Selvom bakteriel screening typisk interdicts størstedelen af hurtigt voksende Gram-negative bakterier som S. marcescens, E. coli og E. cloacae, den kæmper for at opdage langsomt voksende gram-positive bakterier som S. aureus, Streptococcus spp. og S. epidermidis 8. Desværre er disse tre gram-positive bakterier impliceret i op mod 50% af alle forurenede blodplader enheder og transfusion af blodplader, der indeholder disse tre organismer har ført til patient dødelighed 1.
Bakteriel screening er afhængig af den bakterielle titer i en blodplade produkt er tilstrækkelig høj, således at mindst én organisme er indeholdt i den typiske 4-8 ml screening prøve. Hvis den bakterielle titer ikke er tilstrækkelig høj for en bakterie, der fanget i prøve volumen 4-8 ml, er enheden forkert markeret som negativ, og det er frigivet til transfusion. En alternativ metode til bakteriel screening kunne være at anvende en proaktiv proces, der kan udføres på alle blodpladeenheder, og som kunne gøre de kontaminerende organismer som ikke-funktionel.
I denne undersøgelse blev høje titre af bakterier med vilje sat til blodpladeenheder at teste den samlede reduktion kapacitet riboflavin og UV-lys reduktion af patogener proces. Selvom de bakterielle belastninger testet i denne undersøgelse langt overstiger de normalt findes i blodprodukter på tidspunktet for donationen, denne undersøgelse er med til at vise, at riboflavin og UV-lys proces er i stand til at reducere titeren af levedygtige bakterier i en forurenet blodplade enhed ved 2,6-5,4 log (99,7-99,9996% reduktion af kontaminerende bakterier) (figur 2). For at opnå en ACCURAte log-reduktionsværdien, er det afgørende, at operatøren har god aseptisk teknik sammen med præcise pipetteringstrin færdigheder ved udførelse af bakterielle titer trin. Upræcis pipettering ved udførelse af seriefortyndinger kan føre til en ophobning af fejl, således en unøjagtig måling titer.
De indsamlede i denne undersøgelse data understøtter tidligere arbejde med riboflavin og UV-lys, hvilket udfordrede systemet mod lavt niveau, klinisk relevant bakteriæmi (<20 CFU / enhed). Den tidligere undersøgelse blev designet til at efterligne en egentlig klinisk kontaminering begivenhed og resultaterne viste riboflavin og UV-lys var effektive i forebyggelsen af bakteriel vækst i blodpladeopbevaring periode på 7 dage. Modellering baseret på data fra den foregående undersøgelse tyder på, at de nuværende risici estimater af bakteriel forurening af trombocytprodukter kunne reduceres med så meget som 98% fra det nuværende niveau 8. Den riboflavin og UV-lys proces sammenligner positivt til bakteriel skærmING, som kun viste en 66% effektivitet til at afsløre bakterielle forureninger i blodplade enheder, når udfordret med en klinisk relevant bakteriel belastning 8.
Som med alle teknologier, at PRT behandling af trombocytprodukter forebygge komplikationer forbundet med bakterielt forurenet blodplade-enheder har sine begrænsninger. PRT systemer er ikke effektive mod bakteriesporer og ikke inaktiverer endotoksin, således at selv om en PRT systemet kan inaktivere høje titere af gram-negative bakterier den resterende endotoksin kan stadig forårsage septisk chok i modtageren. PRT er bedst udføres tidligt under opbevaring før bakterierne kan forplante sig til høje titre.
Afslutningsvis, hvilket fremgår af kombinationen af disse to undersøgelser, riboflavin og UV-lys processen er effektiv til at reducere de bakterielle belastninger af både gramnegative og grampositive organismer og kan tilbyde et levedygtigt alternativ til bakteriel screening. Rutinemæssigt treating blodplade produkter med riboflavin og UV-lys har også den fordel at reducere den potentielle overførsel af andre blodbårne agenter som virus og parasitter.
Disclosures
Alle forfattere dette papir er i øjeblikket ansat i Terumo BCT, udvikler og producent af Mirasol PRT-systemet. Offentliggørelse gebyrer for denne video-artikel, er blevet betalt af Terumo BCT.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mirasol Illuminator | Terumo BCT | N/A | |
| Mirasol Treatment/Storage Bag | Terumo BCT | N/A | |
| Hematology Analyzer | Beckman-Coulter | Ac•T diff | |
| Blood Gas Analyzer | Siemens | RapidLab 1265 | |
| Sterile Docking Device | Terumo BCT | TSCD | |
| Platelet Incubator | Helmer | PC2200 | |
| Orbital Incubator Shaker | Lab-Line | 4628 | |
| Dry Incubator | Fisher | Iso-temp | |
| Class II A/B3 Biosafety Cabinet | Thermo-forma | 1286 | |
| Tubing Sealer | Sebra | Smart Sealer II | |
| Table Top Centrifuge | IEC | Centra GP8R | |
| 10 ml Syringe | BD | 309604 | |
| 30 ml Syringe | BD | 309650 | |
| 5 ml Dilution Tube | VWR | 211-0058 | |
| 50 ml Conical Tube | Corning | 430290 | |
| Micropipette | Gilson | P-200 | |
| Micropipette | Rainin | R-200 | |
| Repeat Pipette | Eppendorf | 4780 | |
| 1-200 µl Filter Tip | Costar | 4810 | |
| 25 ml Disposable Serrological Pipette | Costar | 4489 | |
| 5 ml Disposable Serrological Pipette | Costar | 4487 | |
| 35 ml 500 µM Riboflavin | Terumo BCT | 35 mL 500 µM | |
| Brucella Agar with 5% Horse Blood | BBL | 221547 | |
| Brain Heart Infusion | Teknova | B9993 | |
| Peptone Water | BD | 257087 | |
| Trypticase Soy Broth | BD | 299113 | |
| Trypticase Soy Agar | Remel | R01917 | |
| Heat Inactivated Horse Serum | Gibco | 26050 |
References
- Brecher, M. E., Hay, S. N.
- Brecher, M. E., Holland, P. V., Pineda, A. A., Tegtmeier, G. E., Yomtovian, R. Growth of bacteria in inoculated platelets: implications for bacteria detection and the extension of platelet storage. Transfusion. 40 (11), 1308-1312 (2000).
- Cardo, L. J., et al. Pathogen inactivation of Leishmania donovani infantum in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Vox Sang. 90 (2), 85-91 (2006).
- Cardo, L. J., Salata, J., Mendez, J., Reddy, H., Goodrich, R. Pathogen inactivation of Trypanosoma cruzi in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Transfus. Apher. Sci. 37 (2), 131-137 (2007).
- Dodd, R. Y. Current viral risks of blood and blood products. Ann. Med. 32 (7), 469-474 (2000).
- Dodd, R. Y. Bacterial contamination and transfusion safety: experience in the United States. Transfus. Clin. Biol. 10 (1), 6-9 (2003).
- Dumont, L. J., et al. Screening of single-donor apheresis platelets for bacterial contamination: the PASSPORT study results. Transfusion. 50 (3), 589-599 (2010).
- Goodrich, R. P., Gilmour, D., Hovenga, N., Keil, S. D. A laboratory comparison of pathogen reduction technology treatment and culture of platelet products for addressing bacterial contamination concerns. Transfusion. 49 (6), 1205-1216 (2009).
- Greco-Stewart, V. S., et al. Serratia marcescens strains implicated in adverse transfusion reactions form biofilms in platelet concentrates and demonstrate reduced detection by automated culture. Vox Sang. 102 (3), 212-220 (2012).
- Keil, S. D., et al. Inactivation of Plasmodium spp. in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Transfusion. 53 (10), 2278-2286 (2013).
- Kleinman, S., Chan, P., Robillard, P. Risks associated with transfusion of cellular blood components in Canada. Transfus. Med Rev. 17 (2), 120-162 (2003).
- Larsen, C. P., Ezligini, F., Hermansen, N. O., Kjeldsen-Kragh, J. Six years' experience of using the BacT/ALERT system to screen all platelet concentrates, and additional testing of outdated platelet concentrates to estimate the frequency of false-negative results. Vox Sang. 88 (2), 93-97 (2005).
- Mundt, J. M., Rouse, L., Van den Bossche, J., Goodrich, R. P. Chemical and Biological Mechanisms of Pathogen Reduction Technologies. Photochem. Photobiol. , (2014).
- Murphy, W. G., et al. Screening platelet concentrates for bacterial contamination: low numbers of bacteria and slow growth in contaminated units mandate an alternative approach to product safety. Vox Sang. 95 (1), 13-19 (2008).
- Brien, S. F., et al. Current incidence and residual risk of HIV, HBV and HCV at Canadian Blood Services. Vox Sang. 103 (1), 83-86 (2012).
- Pearce, S., Rowe, G. P., Field, S. P. Screening of platelets for bacterial contamination at the Welsh Blood Service. Transfus. Med. 21 (1), 25-32 (2011).
- Ramirez-Arcos, S., Kou, Y., Perkins, H. Evaluation of a universal point-of-issue assay for bacterial detection in buffy coat platelet components. Vox Sang. 107 (2), 192-195 (2014).
- Reddy, H. L., et al. Toxicity testing of a novel riboflavin-based technology for pathogen reduction and white blood cell inactivation. Transfus. Med. Rev. 22 (2), 133-153 (2008).
- Ruane, P. H., et al. Photochemical inactivation of selected viruses and bacteria in platelet concentrates using riboflavin and light. Transfusion. 44 (6), 877-885 (2004).
- Tonnetti, L., Proctor, M. C., Reddy, H. L., Goodrich, R. P., Leiby, D. A. Evaluation of the Mirasol pathogen reduction technology system against Babesia microti in apheresis platelets and plasma. Transfusion. 50 (5), 1019-1027 (2010).
- Vanlandingham, D. L., et al. Photochemical inactivation of chikungunya virus in plasma and platelets using the Mirasol pathogen reduction technology system. Transfusion. 53 (2), 284-290 (2013).
- Walther-Wenke, G., et al. Monitoring bacterial contamination of blood components in Germany: effect of contamination reduction measures. Vox Sang. 100 (4), 359-366 (2011).
