Abstract
Forurensning av blodplate enheter av bakterier har lenge vært anerkjent som en betydelig overføring risiko på grunn av sine post-donasjon lagringsforhold. Produktene er rutinemessig lagret ved 22 ° C med en omrørings shaker, en tilstand som kan fremme bakterievekst. Selv om det totale antall bakterier som antas å bli innført i et blodplate-produkt er meget lavt, kan disse bakteriene formere seg til en meget høy titer før transfusjon, som potensielt kan føre til alvorlige bivirkninger. Målet med denne studien var å evaluere et riboflavin basert patogen reduksjonsprosess mot et panel av bakterier som har blitt identifisert som vanlige forurensninger av blodplateprodukter. Dette panelet omfattet følgende organismer: S. epidermidis, S. aureus, S. Mitis, S. pyogenes, S. marcescens, Y. enterocolitica, B. neotomae, B. cereus, E. coli, P. aeruginosa og K. pneumoniae. Hver blodplate-enhet ble inokulert med en høy bakteriemengde og prøver ble fjernet both før og etter behandling. En kolonidannende analyse, ved hjelp av et endepunkt fortynning ordningen, ble anvendt for å bestemme før behandling og etter behandlingen av bakterielle titer. Log reduksjon ble beregnet ved å subtrahere den etterbehandlingen titer fra forbehandlingen titer. Følgende logg reduksjoner ble observert: S. epidermidis 4,7 log (99,998%), S. aureus 4,8 log (99,998%), Mitis S. 3,7 log (99,98%), S. pyogenes 2,6 log (99,7%), S. marcescens 4,0 log (99,99%), Y. enterocolitica 3,3 log (99,95%), B. neotomae 5,4 log (99,9996%), B. cereus 2,6 log (99,7%), E. coli ≥5.4 log (99,9996%), P. aeruginosa 4,7 log (99,998%) og K . pneumoniae 2,8 log (99,8%). Resultatene fra denne studien antyder at prosessen kan bidra til å redusere risikoen for alvorlige transfusjons hendelser assosiert med bakteriell forurensning.
Introduction
Transfusjon av blodplater, plasma, pakket RBC og hele blodprodukter spille en viktig rolle i moderne medisin, og kan brukes til å behandle ulike medisinske forhold, erstatte vitale væsker og til slutt redde liv. Blodplater er et cellulært produkt som enten er isolert fra fullblod og slått sammen til en transfusable dose eller samles gjennom prosessen med blodplate-aferese. Hovedrollen av blodplater i kroppen er å stoppe blødning på såret områder og for å opprettholde hemostasen. Pasienter som lider av et lavt antall blodplater celler (trombocytopeni) er utsatt for spontane blødninger og transfundert med blodplater for å bringe deres platelegemer tilbake til et normalt nivå. Innsamlede blodplatene lagres i maksimalt 5-7 dager, og lagres ved 22 ± 2 ° C, mens under konstant omrøring.
Til tross for den livreddende egenskaper av blodplatetransfusjoner er det fortsatt en liten risiko for å trans mottakere skyldes contamination av disse produktene av parasitter, bakterier og virus 11. Gjennomføringen av viral nukleinsyre testing (NAT) er betydelig redusert risiko for viral transmisjon av store blodbåret midler, så som hepatitt C-virus (HCV), hepatitt B-virus (HBV) og human immuno-deficiency virus (HIV) 5. En fersk publikasjon fra den kanadiske Blood Services anslår restrisiko for disse midlene til å være en pr 8 millioner donasjoner for HIV, en per 6,7 millioner donasjoner for HCV og 1 per 1,7 millioner donasjoner for HBV 15.
Selv om bakterier vanligvis garner mindre oppmerksomhet i allmennheten, har hyppigheten av bakteriell forurensning i blodplateprodukter er anslått til å være så høyt som 1: 1000 7 og fordi millioner av plateprodukter er overført hvert år mange mottakere er utsatt for potensielt livstruende komplikasjoner som sepsis 6. Forskning tyder på at bakteriemengden på den tidenfor forurensning er lavt, <100 kolonidannende enheter (CFU) / produkt 2,16, men næringsrikt miljø og romtemperatur lagring lar forurensende bakterier å formere seg til farlig høye titer før transfusjon. Foreløpig er det kun godkjente metoder tilgjengelig for å hindre bakterie forurensede produkter fra å nå en plate mottaker gjennom bruk av kulturbaserte systemer og rask pasientnær testing. I korthet, for kultur-baserte systemer blodplateprodukter er lagret på et røreverk ved 22 ° C i 12-24 timer for å tillate bakterier å formere seg i produktet, hvorpå en 4-8 ml prøve fjernet fra blodplateprodukt og inokulert i en flaske holdige næringsmedier. Flasken anbringes i et instrument som overvåker flasken for bakterievekst. Hvis instrumentet registrerer bakterievekst i flasken det flagges og den tilsvarende plateenheten blir forkastet. Mens denne prosessen er rimelig vellykket på å oppdage fort grovinge organismer, har mange av de langsomtvoksende arter ikke vokse til en høy nok titer å bli oppdaget, og dermed skape potensialet for falske negative enheter til å bli utgitt for transfusjon 7,12,14,16,22. I motsetning til kulturbaserte deteksjonssystemer, er rask pasientnær testing vanligvis utføres senere i blodplatelagringsperiode når bakteriemengden har økt betydelig. De høyere titre er nødvendig siden poenget med omsorg testene er mindre følsom enn de kulturbaserte systemer, og bare pålitelig oppdage bakterier når de når en titer ≥1 x 10 3 CFU / ml 17. Men slike tester kan gi resultater innen en time etter prøvetaking. Variasjon i resultatene av disse testene har ført til utgivelsen av en falsk negativ produkt, noe som forårsaket en dødelig septisk reaksjon i resipienten 9.
En alternativ måte for å bekjempe problemet for bakteriell forurensning av blodplateprodukter er gjennom rutinemessig bruk av et patogen reduksjon process som kan inaktivere forurensende bakterier i stedet for å prøve å oppdage dem. Ved hjelp av riboflavin som et fotosensibiliserende middel, i kombinasjon med UV-lys, har vist seg å redusere infektiviteten av et bredt spekter av patogene blod-bårne forurensninger, inkludert bakterier 3,4,8,10,19-21 sikret bruk av riboflavin og UV lys for patogen reduksjon er ikke giftig og ikke-mutagene og riboflavin og UV-lys-behandlet komponenter har vist seg å være trygt for transfusjonsmottakere samt for de som håndterer blodprodukter 18. I korte trekk, kan riboflavin molekyler forbinder med nukleinsyrer (DNA og RNA) av bakterier, parasitter, virus og eventuelle kjernedannelse celle (f.eks hvite blodceller). Eksponering for UV-lys aktiverer riboflavin, å bevirke en kjemisk forandring til funksjonelle grupper av nukleinsyrene (primært guanin baser), og dermed hindrer replikasjon og / eller transkripsjon av nukleinsyrene og forlater organismen inaktivert 13. Anucleated celler som platelar og røde blodceller ikke er påvirket av riboflavin kjemien på grunn av mangel av nukleinsyre.
Tidligere arbeid med riboflavin og UV-lys-teknologi evalueres en utvalgt gruppe av bakterier ved bruk av en eksperimentell design til hensikt å etterligne en blodplate produkt forurenset med en klinisk relevant bakteriemengde (<20 CFU / produkt) 8. Målet med denne studien var å vurdere og riboflavin UV-lys prosess for høy titer bakteriell forurensning (> 1,0 x 10 5 CFU / ml) i blodplateprodukter som behandles i plasma, for å måle den totale bakterielle reduksjonskapasiteten for systemet. Basert på data innsamlet fra hemovigilance studie 1, ble et panel av hyppigst forekommende gramnegative og grampositive organismer valgt for evaluering i denne studien, og omfattet følgende arter: Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Streptococcus mitis, Streptococcus pyogenes, Serratia marcescens, Yersinia enterocolitica ,Brucella neotomae, Bacillus cereus (vegetativ form), Esherichia coli, Pseudomonas aeruginosa og Klebsiella pneumoniae. Alle organismer, unntatt B. cereus, ble oppnådd fra ATCC og en prioritet ble plassert på å skaffe bakterielle stammer som hadde blitt identifisert som å være isolert fra blodkomponenter. B. cereus testet i denne studien er et klinisk stamme isolert internt fra et forurenset blodplateprodukt.
Protocol
1. Bakterier Suspension Forberedelse:
- Fra en stripete kulturplate, aseptisk inokulere en enkelt koloni i en 250 ml steril flaske som inneholder 100 ml av den passende vekstmedium (Tabell 1) ved hjelp av steril inokulering sløyfe.
- Plasser flasken i en orbital risteinkubator ved hensiktsmessige betingelser (tabell 1) i 1-2 dager, sjekker for vekst jevne mellomrom. Sett shaker hastigheten til 140 RPM.
- Aseptisk overføring av bakteriesuspensjonen i to sterile 50 ml koniske rør og sentrifugeres ved 3000 xg rør i 20 minutter ved 23 ° C.
- Aspirer supernatanten og resuspender hver bakteriell pellet med 15 ml sterilt peptonvann. Vortex etter behov. Kombiner den suspenderte bakteriekultur inn i en tube / container.
- Titrere lager kulturen i tre eksemplarer per seksjon 4 for å bestemme aksje kultur titer.
- Kjøle i opptil 2 uker på 477; 2 ° C inntil det er behov. Re-titer kulturen på tidspunktet for bruk, se trinn 4.8.
2. Blodplate Product Forberedelse:
- Samle en standard aferese menneskelig blodplate produktet på en akkreditert blodbank. Blodplate produkt må oppfylle følgende samling spesifikasjoner: 90-360 ml volum og 0,8 -3,8 x 10 6 plater / ul konsentrasjon.
- Sørge for at plate produktet har hvilt i minst 2 timer før prosessering for patogen reduksjon. Oppbevar produktene ved 22 ± 2 ° C i en blodplate-inkubator uten omrøring for disse 2 timer. Etter to timer sikre blodplate-produktet blir rørt ved 22 ± 2 ° C i en blodplate-inkubator. Bruke produktet i opptil 22 timer etter samlingen.
- Ved hjelp av en 3 ml sprøyte fjerne en 2 ml prøve for å måle pH-22C til blodplate-produkt. Bruk en blodgass-analysator for å sikre at produktet har en pH> 6.6. Bruke den samme prøven for å måle blodplatekonsentrasjon til blodplate-produkt ved bruk av en hematologisk analysator. Sørg for at produktet oppfyller 0.80-3.8 x 10 6 plater / ul samling konsentrasjon kravet.
- Evaluere visuelt virvel av blodplateprodukt. Hvis produktet har en "0" virvle produktet vil bli forkastet.
- Hold plateposen opp under en direkte white-lyskilden og klem plateposen kort. Visuelt observere virvlende mønster til blodplate-prøven. Resultat produktet ved hjelp av følgende skala.
MERK: 2 - Positiv Swirl: Virvlende inhomogeneity synlig gjennom hele posen med sterk kontrast. 1 - Intermediate Swirl: Noen inhomogeneity synlig, men bare i noen få steder, og med dårlig kontrast. 0 - Negative Swirl: Grumsete homogenitet som gjenstår før og etter klemme på blodplateposen
3. Riboflavin og UV-lys Process:
- Transfer blodplate produktet til en riboflavin og UV lys belysning og oppbevaringspose med en steril tubing forankringsenhet. Etter overføring fjerne den tomme blodplateenheten oppsamlingspose ved hjelp av en slange sealer og kast den tomme posen som biologisk avfall.
- Fjern en 35 ml pose på 500 mikrometer riboflavin stamløsning fra sitt lys beskyttende ytre wrap. Sterile dokk den riboflavin settet på innløpsledningen for behandling og oppbevaringspose. Tillate innholdet å renne inn i plateenheten.
- Heng riboflavin posen / behandling og oppbevaringspose satt fra riboflavin posen og forsiktig uttrykke rest luft ut av behandling og oppbevaringspose og inn i riboflavin bag. Sørge for en liten mengde av blodplateprodukt er også uttrykt i det riboflavin posen for å skylle eventuelt gjenværende riboflavin inn i blodplate-produkt. La riboflavin og blodplater oppløsning renne tilbake inn i behandlings- og oppbevaringspose, og deretter klemme innløpsledningen. Fjern den tomme riboflavin bag ossing en slange sealer og kast den tomme posen som biologisk avfall.
- Sterile dock en 6 "rør linje med kvinnelige sprøyte kontakten på inntaksledningen av belysning og oppbevaringspose. Fest en 10 ml sprøyten (fjern stempelet) på hunn sprøyte kontakten.
- Tilsett aseptisk 5 ml av lager bakterier inn i sprøytesylinderen via en pipette. Åpne klemmen på inntaksledningen og la bakteriene å renne ned i plateprodukt. Skyll sprøyteløpet ved å tillate noen blodplate produkt å strømme tilbake inn i 10 ml sprøytesylinderen. Fjern 10 ml sprøyten.
- Aseptisk feste en 30 ml sprøyte og skylle innløps minimum to ganger for å sikre aksje bakterier blir blandet inn i blodplateprodukt. Etter at produktet er godt blandet, bruk en ren 5-10 ml sprøyte og fjerne en 2 ml forbehandling prøven. Ved hjelp av en ny sprøyte sikre eventuell luft innført fra vaksinasjonen trinn eller prøvetaking trinn er fjernet.
- Titrere forbehandling sample per § 4.
- Fjern innløpsledningen fra behandlings- og oppbevaringspose og veie produktet.
- Sett inn produkt i lyset og følge kommandoer på skjermen for å starte en standard plate behandling.
- Skriv inn i Operatør ID.
- Fest og montere posen til Illuminator platen.
- Skriv inn Sample ID i Illuminator enten ved hjelp av strekkodeleser eller manuell inntasting tastaturet.
- Scan produkttype.
- Lukk kvarts klemmen.
- Belysningsinnretningen automatisk vil levere 6,24 J / ml av energi. Den typiske behandlingstiden tar 5-10 min.
- Etter behandling sterile dock en 6 "rør linje med kvinnelige sprøyte kontakten på prøven pære linjen av behandlingen og oppbevaringspose. Sørg for at produktet er godt blandet og deretter legge en 5 ml sprøyte og fjerne en 2 ml etterbehandling prøven.
- Titrere etterbehandling sample per § 4.
4. Bakteriell Titer
- Estimer titer av de før behandling og etter behandlingen prøver og fremstille det passende antall av 5 ml fortynningsrør trengs for å utføre et sluttpunkt seriefortynning av hver prøve. Aseptisk fylle de nødvendige rør med 1,8 ml peptonvann.
- Titer hver prøve ved hjelp av en 10-fold seriefortynningsmetode ordningen. Overfør aseptisk 0,2 ml av den ufortynnede prøven til den første fortynning røret (10 -1). Vortex denne fortynningen rør og overføre 0,2 ml til den neste fortynning røret. Fortsett seriefortynning gjennom det nødvendige antall fortynninger.
- Aseptisk overføring av 100 ul av hver fortynning til å bli belagt med en passende agarplate (tabell 1).
- Ved hjelp av en steril celle spreder, jevn fordeling av prøven på hver agar-plate.
- Invertere og inkuber platene ved de passende betingelser (
- Telle plater med 30-300 kolonier. Plater som inneholder mer enn 300 kolonier anses for mange til å telle (TNTC). Plater som inneholder mindre enn 30 kolonier anses å være under kvantifiseringsgrensen (LOQ).
- Beregn titer på hver testprøve og registrere resultatene i CFU / ml.
- Bruk følgende formel for å beregne CFU / ml:
- Hvis det ikke er noen kolonier på den laveste fortynning plate, brukes følgende formel for å beregne deteksjonsgrensen (LOD):
og
Hvor:
N = laveste antall partikler (CFU) i pRODUKTINFORMASJON som kan oppdages med selvtillit.
P = sannsynligheten for at en mikroorganisme skal være ubemerket; for en 95% tillit til å oppdage en mikroorganisme, p = 0,05.
V = total produktvolum i ml
v = volum plett (ml) x fortynning nivået for platen
- For negativ kontroll, 0,5 ml porsjon av den peptonvann som brukes for de serielle fortynninger på hver av to agarplater. Bruk samme plate type som de prøver som skal undersøkes. Snu platen og inkuber ved hensiktsmessige betingelser i 1-2 dager for å kontrollere vekst jevne mellomrom.
- Dersom veksten observert på hver agar-plate, må den flaske peptonvann anvendes kastes; resultatene av undersøkelsen er også oppheves.
- For positiv kontroll, re-titer stamkulturen av bakterier som ble brukt. Invertere og inkuber platene ved de passende betingelser i 1-2 dager for å kontrollere vekst jevne mellomrom. Titeren skal være ± 1,0 log CFU / ml postened lager titer (se avsnitt 1.5) for studien skal være gyldig.
Representative Results
Reduksjonen av elleve forskjellige bakteriearter ble evaluert ved bruk av riboflavin og UV-lys basert PRT prosess. Disse midler representerer noen av de mer vanlige forurensninger av blodplateprodukter og inkluderer fem Gram positive og Gram-negative organismer seks. Minst seks blodplateprodukter ble evaluert per organisme, og hvert produkt ble inokulert med nok bakterier for å gi> 1,0 x 10 5 CFU / ml endelig titer av bakterier i blodplate-produkt. Før behandling ble en prøve tatt ut for å bestemme den forbehandling titer, hvoretter blodplate-produkt ble raskt behandlet med riboflavin og UV-prosess. Etter behandling av blodplateprodukter følgende logg reduksjoner ble observert: S. epidermidis 4,7 log (99,998%), S. aureus 4,8 log (99,998%), Mitis S. 3,7 log (99,98%), S. pyogenes 2,6 log (99,7%), S. marcescens 4,0 log (99,99%), Y. enterocolitica 3,3 log (99,95%), B.neotomae 5,4 log (99,9996%), B. cereus 2,6 log (99,7%), E. coli ≥ 5,4 log (99,9996%), P. aeruginosa 4,7 log (99,998%) og K. pneumoniae 2,8 log (99,8%) (figur 2). Alle enheter møtte systemspesifikasjoner som nevnt ovenfor for riboflavin og UV prosess. Ytterligere reduksjon testing ble utført med S. pyogenes bruker buffycoat avledet blodplater. Ingen signifikant forskjell ble observert i reduksjon av S. pyogenes i buffy coat avledet plater versus aferese blodplater (data ikke vist).
Tabell 1: Vekst betingelser for bakteriearter evaluert ved hjelp av riboflavin og UV-lys. Et panel av både gram-negative og gram-positive bakterier som er blitt vist å forurense blodplateprodukter ble valgt for dette studiet. Vekst forhold (temperatur og medietype) som brukes til å forplante seg og titer organismene er vist.
Figur 1: Riboflavin og UV lys patogen reduksjonsprosess. Riboflavin ble oppløst i 0,9% saltløsning ved en nominell konsentrasjon på 500 pM. Løsningen ble steril tilkoblet og drenert inn i hver blodplate-produkt. Bakterier ble tilsatt aseptisk til hver blodplate-enhet, og deretter behandlet med 6,2 J / ml av UV-energi (ca. 6-10 min). I denne in vitro-studie etterbehandlingsblodplate-enhet ble prøvetatt for å bestemme den endelige bakterielle titer.
Figur 2: Reduksjon av forskjellige bakteriearter som behandles med riboflavin og UV-lys Riboflavin og UV-lys ble brukt til å redusere den bakterielle masse vanlige bakterielle forurensninger av blodplateprodukter.. Loggen 10 Reduksjonen er forskjellenmellom gjennomsnittlig forbehandling titer og gjennomsnittlig etterbehandling titer. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Discussion
Bakteriell screening har blitt vanlig praksis i blodbankinstitusjoner og for mange steder den fungerer som den primære metoden for å hindre overføring av bakterielt forurenset blodplater. Selv om bakteriell screening vanligvis interdicts flertallet av raskt voksende Gram-negative bakterier som S. marcescens, E. coli og E. cloacae, sliter det å oppdage sakte voksende Gram-positive bakterier som S. aureus, Streptococcus spp. og S. epidermidis 8. Dessverre er disse tre gram-positive bakterier innblandet i overkant av 50% av alle forurensede plate enheter og transfusjon av blodplateprodukter som inneholder disse tre organismer har ført til pasient dødelighet 1.
Bakteriell screening er avhengig av den bakterielle titer i et blodplate-produkt for å være tilstrekkelig høy nok slik at minst en organisme inneholdes i typiske 4-8 ml screening prøven. Dersom bakterie titer er ikke tilstrekkelig høy for en bakterie som skal fanges opp i 4-8 ml prøvevolum, er enheten feilaktig flagget som negative, og det er utgitt for transfusjon. En alternativ tilnærming til bakteriell screening kan være å anvende en aktiv prosess som kan utføres på alle blodplateenhetene og som kan gjengi de forurensende organismer som ikke-funksjonell.
I denne studien ble høye titere av bakterier med hensikt tilsatt til blodplateenhetene for å teste den totale reduksjonen kapasiteten av riboflavin og UV-lys patogen reduksjonsprosess. Selv om bakterielle masse ble testet i denne undersøkelsen langt overstiger de som normalt finnes i blodprodukter ved tidspunktet for donasjon, bidrar dette studie for å vise at riboflavin og UV-lys prosess er i stand til å redusere titeren av levedyktige bakterier i en forurenset plateenhet av 2,6 til 5,4 log (99,7 til 99,9996% reduksjon av forurensende bakterier) (figur 2). For å få en Accurate log reduksjon verdi, er det avgjørende at operatøren har god aseptisk teknikk sammen med presise pipettering ferdigheter når du utfører bakterie titer trinn. Upresise pipettering ved utførelse av seriefortynninger kan føre til en akkumulering av feil, og dermed en unøyaktig måling titer.
Dataene som samles inn i denne studien støtter tidligere arbeid med riboflavin og UV-lys, som utfordret systemet mot lavt nivå, klinisk relevant bakteriemi (<20 CFU / enhet). Den forrige undersøkelsen ble designet for å etterligne en faktisk klinisk forurensning arrangementet og resultatene viste riboflavin og UV-lys var effektive i å hindre bakterievekst over 7-dagers blodplatelagringsperioden. Modellering basert på data fra den forrige studien antyder at dagens risikoestimater for bakteriell forurensning av blodplateprodukter kan bli redusert med så mye som 98% fra dagens nivå 8. Den riboflavin og UV lys prosess sammenligner gunstig til bakteriell skjerming, som bare viste en 66% effektivitet for å oppdage bakteriell forurensning i plate enheter når utfordret med en klinisk relevant bakteriemengde 8.
Som med alle teknologier, for å PRT behandling av blodplateprodukter forhindre komplikasjoner forbundet med bakterielt forurenset blodplateenhetene har sine begrensninger. PRT systemer er ikke effektive mot bakteriesporer og ikke inaktiverer endotoksin, således selv om en PRT system kan inaktivere høye titere av Gram-negative bakterier gjenværende endotoksin kan likevel føre til septisk sjokk i resipienten. PRT er best utføres tidlig under lagring før bakteriene kan overføres til høye titer.
Som konklusjon, som vist ved en kombinasjon av disse to studiene, er riboflavin og UV-lys prosess effektiv til å redusere den bakterielle masse både Gram-negative og Gram-positive organismer, og kan gi et levedyktig alternativ til bakteriell screening. Rutinemessig treating plate produkter med riboflavin og UV-lys har også den ekstra fordelen av å redusere potensialet overføring av andre blodbårne agenter som virus og parasitter.
Disclosures
Alle forfatterne av dette papiret er for tiden ansatt ved Terumo BCT, utvikler og produsent av Mirasol PRT-systemet. Publiserings avgifter for denne video-artikkelen har blitt betalt av Terumo BCT.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mirasol Illuminator | Terumo BCT | N/A | |
| Mirasol Treatment/Storage Bag | Terumo BCT | N/A | |
| Hematology Analyzer | Beckman-Coulter | Ac•T diff | |
| Blood Gas Analyzer | Siemens | RapidLab 1265 | |
| Sterile Docking Device | Terumo BCT | TSCD | |
| Platelet Incubator | Helmer | PC2200 | |
| Orbital Incubator Shaker | Lab-Line | 4628 | |
| Dry Incubator | Fisher | Iso-temp | |
| Class II A/B3 Biosafety Cabinet | Thermo-forma | 1286 | |
| Tubing Sealer | Sebra | Smart Sealer II | |
| Table Top Centrifuge | IEC | Centra GP8R | |
| 10 ml Syringe | BD | 309604 | |
| 30 ml Syringe | BD | 309650 | |
| 5 ml Dilution Tube | VWR | 211-0058 | |
| 50 ml Conical Tube | Corning | 430290 | |
| Micropipette | Gilson | P-200 | |
| Micropipette | Rainin | R-200 | |
| Repeat Pipette | Eppendorf | 4780 | |
| 1-200 µl Filter Tip | Costar | 4810 | |
| 25 ml Disposable Serrological Pipette | Costar | 4489 | |
| 5 ml Disposable Serrological Pipette | Costar | 4487 | |
| 35 ml 500 µM Riboflavin | Terumo BCT | 35 mL 500 µM | |
| Brucella Agar with 5% Horse Blood | BBL | 221547 | |
| Brain Heart Infusion | Teknova | B9993 | |
| Peptone Water | BD | 257087 | |
| Trypticase Soy Broth | BD | 299113 | |
| Trypticase Soy Agar | Remel | R01917 | |
| Heat Inactivated Horse Serum | Gibco | 26050 |
References
- Brecher, M. E., Hay, S. N.
- Brecher, M. E., Holland, P. V., Pineda, A. A., Tegtmeier, G. E., Yomtovian, R. Growth of bacteria in inoculated platelets: implications for bacteria detection and the extension of platelet storage. Transfusion. 40 (11), 1308-1312 (2000).
- Cardo, L. J., et al. Pathogen inactivation of Leishmania donovani infantum in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Vox Sang. 90 (2), 85-91 (2006).
- Cardo, L. J., Salata, J., Mendez, J., Reddy, H., Goodrich, R. Pathogen inactivation of Trypanosoma cruzi in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Transfus. Apher. Sci. 37 (2), 131-137 (2007).
- Dodd, R. Y. Current viral risks of blood and blood products. Ann. Med. 32 (7), 469-474 (2000).
- Dodd, R. Y. Bacterial contamination and transfusion safety: experience in the United States. Transfus. Clin. Biol. 10 (1), 6-9 (2003).
- Dumont, L. J., et al. Screening of single-donor apheresis platelets for bacterial contamination: the PASSPORT study results. Transfusion. 50 (3), 589-599 (2010).
- Goodrich, R. P., Gilmour, D., Hovenga, N., Keil, S. D. A laboratory comparison of pathogen reduction technology treatment and culture of platelet products for addressing bacterial contamination concerns. Transfusion. 49 (6), 1205-1216 (2009).
- Greco-Stewart, V. S., et al. Serratia marcescens strains implicated in adverse transfusion reactions form biofilms in platelet concentrates and demonstrate reduced detection by automated culture. Vox Sang. 102 (3), 212-220 (2012).
- Keil, S. D., et al. Inactivation of Plasmodium spp. in plasma and platelet concentrates using riboflavin and ultraviolet light. Transfusion. 53 (10), 2278-2286 (2013).
- Kleinman, S., Chan, P., Robillard, P. Risks associated with transfusion of cellular blood components in Canada. Transfus. Med Rev. 17 (2), 120-162 (2003).
- Larsen, C. P., Ezligini, F., Hermansen, N. O., Kjeldsen-Kragh, J. Six years' experience of using the BacT/ALERT system to screen all platelet concentrates, and additional testing of outdated platelet concentrates to estimate the frequency of false-negative results. Vox Sang. 88 (2), 93-97 (2005).
- Mundt, J. M., Rouse, L., Van den Bossche, J., Goodrich, R. P. Chemical and Biological Mechanisms of Pathogen Reduction Technologies. Photochem. Photobiol. , (2014).
- Murphy, W. G., et al. Screening platelet concentrates for bacterial contamination: low numbers of bacteria and slow growth in contaminated units mandate an alternative approach to product safety. Vox Sang. 95 (1), 13-19 (2008).
- Brien, S. F., et al. Current incidence and residual risk of HIV, HBV and HCV at Canadian Blood Services. Vox Sang. 103 (1), 83-86 (2012).
- Pearce, S., Rowe, G. P., Field, S. P. Screening of platelets for bacterial contamination at the Welsh Blood Service. Transfus. Med. 21 (1), 25-32 (2011).
- Ramirez-Arcos, S., Kou, Y., Perkins, H. Evaluation of a universal point-of-issue assay for bacterial detection in buffy coat platelet components. Vox Sang. 107 (2), 192-195 (2014).
- Reddy, H. L., et al. Toxicity testing of a novel riboflavin-based technology for pathogen reduction and white blood cell inactivation. Transfus. Med. Rev. 22 (2), 133-153 (2008).
- Ruane, P. H., et al. Photochemical inactivation of selected viruses and bacteria in platelet concentrates using riboflavin and light. Transfusion. 44 (6), 877-885 (2004).
- Tonnetti, L., Proctor, M. C., Reddy, H. L., Goodrich, R. P., Leiby, D. A. Evaluation of the Mirasol pathogen reduction technology system against Babesia microti in apheresis platelets and plasma. Transfusion. 50 (5), 1019-1027 (2010).
- Vanlandingham, D. L., et al. Photochemical inactivation of chikungunya virus in plasma and platelets using the Mirasol pathogen reduction technology system. Transfusion. 53 (2), 284-290 (2013).
- Walther-Wenke, G., et al. Monitoring bacterial contamination of blood components in Germany: effect of contamination reduction measures. Vox Sang. 100 (4), 359-366 (2011).
