Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Chemistry
Click here for the English version

Chemistry

פרוטוקול אופטימיזציה עבור Radiolabeling היעיל של חלקיקי זהב על ידי שימוש Published: October 10, 2016 doi: 10.3791/54759
Automatic Translation
1,2, 1, 1,2, 1, 1,2, 1, 1,2
1Advanced Radiation Technology Institute, Korea Atomic Energy Research Institute, 2Department of Radiation Biotechnology and Applied Radioisotope Science, University of Science and Technology

Summary

נוהל מפורט לסינתזה של אזיד 125 I-שכותרתו ואת radiolabeling של dibenzocyclooctyne (DBCO) -group מצומדות, 13 ננומטר בגודל ננו-חלקיקי זהב באמצעות תגובת לחץ ללא נחושת מתואר.

Protocol

זהירות: צורת החמצון של יוד רדיואקטיבי היא תנודתי למדי ויש לטפל עם מגינים להוביל נאותים בקבוקוני עופרת. כל צעדי radiochemical צריכות להתבצע במנדף פחם-מסונן מאוורר היטב, ואת הפרוצדורות צריכות להיות פיקוח על ידי זיהוי התקני רדיואקטיביות.

1. הכנת הכימיקלים והמחסנית הפוך שלב לסינתזה של 125 I-שכותרתו יזיד

  1. הכנת ריאגנטים בתמיסה
    1. ממסי 1 מ"ג של המבשר יזיד (2) ב 150 μl אתנול אבסולוטי (איור 1).
      הערה: הליך סינטטי מפורט המבשר יזיד (2) דווחה בעיתון הקודם 22.
    2. ממיסים T chloramine 1 מ"ג ב 20 μl של חיץ מלוחים פוספט 1x (pH = 7.4).
    3. ממיסים metabisulfite נתרן 2 מ"ג ב 20 μl H 2 O.
  2. preparation של המחסנית
    1. לשטוף את המחסנית tC18 עם אתנול אבסולוטי 10 מ"ל ואחריו 10 מ"ל H 2 O. אין לייבש את המטריצה ​​של מחסנית עם אוויר.

2. Radiosynthesis של 125 הקבוצה התותבת תזיד שכותרתו לי

  1. תגובת Radioiodination של המבשר
    1. מוסיפים את פתרון מבשר אזיד (1 מ"ג ב 150 μl של אתנול אבסולוטי) וחומצה אצטית (10 μl) לצינור 1.5 מ"ל microcentrifuge.
    2. להוסיף 150 MBq של [125 I] נאה ב 0.1 M NaOH (50 μl) לתערובת התגובה.
    3. הוספת פתרון T chloramine (1 מ"ג ב 20 μl של חיץ מלוחים פוספט 1x) ולסגור את תערובת התגובה המכיל microcentrifuge צינור.
    4. דגירה תערובת התגובה בטמפרטורת החדר למשך 15 דקות עד השלמת התגובה radioiodination.
    5. הוספת פתרון metabisulfite נתרן (2 מ"ג ב 20 μl H 2 O) לתערובת התגובהכדי להרוות את התגובה radioiodination.
    6. לסגת 0.2 μl של המוצר הגולמי ואז לדלל אותו עם 100 μl של פתרון (H 2 O / CH 3 CN, 1: 1) עבור ניתוח HPLC.
      הערה: עבור כל הניסויים HPLC, השתמש 0.1% חומצה פורמית המכיל H 2 O (ממס) ו -0.1% אצטוניטריל המכילים חומצה פורמית (B ממס) כמו eluents.
    7. נתח את המוצר הגולמי מדולל באמצעות הפוכה פאזיים אנליטיים רדיו-HPLC (C18 הפוכה שלב בטור; קצב הזרימה: 1 מ"ל / דקה; שיפוע eluent: 20% B ממס עבור 0-2 דקות, 20-80% ב ממס עבור 2-22 דקות, B ממס 80-100% עבור 22-23 דקות, ולאחר 100% B ממס עבור 23-28 דקות; זמן השמירה: 16.4 דק ') (איור 2).
  2. טיהור של המוצר הגולמי עם HPLC preparative
    הערה: ספק מספיק שריון עופרת סביב חלקי HPLC כגון מזרק, עמודה, גלאי, בקבוקונים אוספים, ואת המכל שבו הקולחים נאספו.
    1. לסגת הדואר תערובת תגובה כולו לתוך בקבוקון HPLC. יש לשטוף את צינור התגובה עם אצטוניטריל (0.5 מ"ל) ולהוסיף השטיפה לתוך אותו בקבוקון ההזרקה. לדלל את הפתרון שנאספו עם H 2 O (1 מ"ל).
    2. להזריק את המוצר הגולמי על רדיו-HPLC preparative (C18 הפוכה שלב בטור; קצב הזרימה: 10 מ"ל / דקה; שיפוע eluent: 20% B ממס עבור 0-2 דקות, 20-80% ב ממס עבור 2-22 דקות, 80-100% B ממס עבור 22-23 דקות, ולאחר 100% B ממס עבור 23-28 דקות).
    3. אספו את שיא רדיואקטיבי המייצג 125 יזיד שכותרתו אני (1) (R t בתנאי HPLC אלה הוא 17.8-18.8 דקות) במבחנת זכוכית (איור 2).
    4. מדוד את תשואת radiochemical של השבר באמצעות כיל רדיואקטיביות מינון על פי הפרוטוקול של היצרן.
    5. להזריק את המוצר המטוהר תתפס-HPLC רדיו אנליטיים באמצעות באותם התנאים HPLC לקביעת טוהר radiochemical של המוצר.
  3. מיצוי שלב מוצק של המוצר
    1. לדלל את שבריר המכיל את המוצר הרצוי (1) עם 40 מ"ל טהור H 2 O.
    2. מוסיף את הפתרון המדולל לתוך מחסנית tC18 preconditioned.
    3. לשטוף את המחסנית עם H מ"ל 15 נוספים 2 O.
    4. Elute המוצר (1) לכוד בתוך מחסנית עם 2 מ"ל אצטון לתוך בקבוקון זכוכית 10 מ"ל כי הוא מוגן על ידי מגן עופרת. מדוד את הרדיואקטיביות של מוצר eluted באמצעות כיל רדיואקטיביות מינון על פי הפרוטוקול של היצרן.
      הערה: sulfoxide דימתיל (DMSO) או אתנול אבסולוטי יכול לשמש גם עבור elution של המוצר מהמחסנית. כ 5-10% של רדיואקטיביות בדרך כלל מקלות על המחסנית, המוצר radiolabeled הנותרים לא ניתן eluted מלא באמצעות כמויות גדולות של ממיס אורגני.
    5. לאדות את אצטון עם זרם של חנקן או גז ארגון.
    6. ממיסים את מחדשsidue עם DMSO (100-200 μl) עבור השלב radiolabeling הבא.

סינתזת 3. DBCO-group-מצומדות חלקיקי זהב

  1. שינוי פני שטח של זהב 13 ננומטר בגודל חלקיקים עם פוליאתילן גליקול קבוצה-DBCO המכיל
    1. כן חלקיקי זהב נתרן מיוצב-ציטראט (3) (= גודל הממוצע 13 ננומטר) על פי דו"ח קודם 24.
    2. להוסיף בתמיסה מימית של 20 Tween (1 מ"מ, 1.5 מ"ל) אל חלקיקי זהב מיוצב ציטרט (10 ננומטר, 15 מ"ל). לנער את הפתרון עבור 20 דקות על שייקר מסלולית.
    3. להוסיף בתמיסה מימית של תיאול פוליאתילן גליקול DBCO המכילים-קבוצה (משקל מולקולרי ממוצע = 5000, 100 מיקרומטר, 1.5 מ"ל). לנער את פתרון 2 שעות על שייקר מסלולית.
  2. טיהור של חלקיקי זהב DBCO-שונה-group
    1. לטהר את חלקיקי זהב DBCO-שונה-קבוצה (4) </ Strong> על ידי צנטריפוגה רצוף (11,400 XG, 15 דק 'x 3).
    2. למזוג supernatant ולהוסיף מים טהורים עבור resuspension של כדורי ננו-חלקיקים מזהב.

4. Radiolabeling של ננו-חלקיקי זהב DBCO-שונה-קבוצה דרך התגובה לחץ חופשי הנחושת

  1. סינתזה של 125 ננו-חלקיקי זהב שכותרתו לי באמצעות 125 I-שכותרתו יזיד (1)
    1. כן פתרון מרוכז של חלקיקי זהב DBCO-שונה-קבוצה באמצעות צנטריפוגה (11,400 XG, 15 דק '), ולהתאים את הריכוז של חלקיקי זהב עד 2 מיקרומטר.
    2. להוסיף 4.1 MBq של אזיד 125 שכותרתו אני (1) ב DMSO (5 μl) כדי השעיה של חלקיקי זהב (4) (2 מיקרומטר, 50 μl).
    3. דגירת תערובת התגובה וכתוצאה מכך ב -40 מעלות צלזיוס במשך 60 דקות.
    4. משיכת דוגמא מתמיסה בסיסית (0.2 μl) מהמוצר הגולמי ולהחיל אותו על שיתוף סיליקהכרומטוגרפיה בשכבה דקה ated (TLC) צלחת.
    5. לפתח את צלחת TLC באמצעות אתיל יצטט כשלב נייד.
    6. מניחים את צלחת TLC על סורק רדיו-TLC ולהפעיל את הסורק כדי לפקח על התגובה radiolabeling (איור 3) על פי פרוטוקול של היצרן.
  2. טיהור של המוצר הגולמי
    1. לטהר את תערובת התגובה המכיל את חלקיקי זהב 125 שכותרתו לי (4) על ידי צנטריפוגה (11,400 XG, 15 דק ').
    2. למזוג supernatant ולהוסיף מים טהורים עבור resuspension של כדורי ננו-חלקיקים מזהב.
    3. משיכת דוגמא מתמיסה בסיסית (0.2 μl) מהמוצר המטוהר ולהחיל אותו על צלחת TLC מצופה סיליקה.
    4. לפתח את צלחת TLC באמצעות אתיל יצטט כשלב הנייד.
    5. מניחים את צלחת TLC על סורק רדיו-TLC ולהפעיל את הסורק כדי לקבוע את התשואה radiochemical וטוהר radiochemical של 125 gol שכותרתו ליחלקיקי ד (4) (איור 3) על פי הפרוטוקול של היצרן.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

תגובת radioiodination של מבשר stannylated (2) בוצעה באמצעות 150 MBq של [125 I] נאה, חומצה אצטית, ו chloramine T בטמפרטורת חדר למשך 15 דקות כדי לספק את המוצר רדיואקטיבי (1). לאחר HPLC טיהור preparative של התערובת הגולמית, המוצר הרצוי הושג עם 75 ± 10% (n = 8) של תשואת radiochemical. HPLC אנליטי חשף כי טוהר radiochemical של שכותרתו לי מוצר 125 היה יותר מ -99% (איור 2), ואת הרדיואקטיביות ספציפי ציין של מוצר 1 הוא 40.7 MBq / μmol. מיצוי שלב מוצק של השבר המכיל המוצר המטוהר על ידי שימוש במחסנית ספק פתרון אצטון של 1. באמצעות זרם של חנקן או גז ארגון, הממס האורגני ניתן התאדה, ולאחר מכן השאריות ניתן מומס שוב ב DMSO או אתנול אבסולוטי עבור STE הבאp.

עבור 125 I-תיוג של חלקיקי זהב פוליאתילן-שונה-גליקול, חלקיקי זהב DBCO-group-השונים הוכנו על ידי ההליך שמוצג באיור 1. סכום עודף של תיאול פוליאתילן גליקול (MW 5,000) עם קבוצות DBCO היה הגיב עם citrated, התייצב חלקיקי זהב 13 ננומטר. לאחר שלב השינוי, המוצר היה מטוהר על ידי צנטריפוגה רצוף כדי לתת חלקיקי זהב פונקציונלי DBCO (3). בשלב radiolabeling, 3.7 MBq של 1 התווסף 2 מיקרומטר של 3 (~ 400 מיקרומטר של קבוצות DBCO), ואת תגובת התיוג בוצעה ב 40 מעלות צלזיוס במשך שעה 1. ניתוח הרדיו-TLC הראה כי יותר מ -95% של 1 הגיב עם חלקיקי זהב DBCO פונקציונלי-קבוצה (3) תוך 60 דקות. התגובה בוצעה במשך 60 דקות, ולאחר מכן המוצר הגולמי היה PURified ידי צנטריפוגה. 125 ננו-חלקיקי זהב שכותרתו לי (4) התקבלו עם> 99% (n = 4) תשואה radiochemical כפי שנקבע על ידי רדיו TLC (איור 3).

איור 1
איור 1. Radiosynthesis של 125 יזיד שכותרתו אני (1) ו -125 ננו-חלקיקי זהב שכותרתו לי (4). ריאגנטים ותנאים: (א) [125 I] נאה, חומצה אצטית, chloramine T, RT, 15 דקות, 75 ± 10% (n = 8) תשואת radiochemical; (ב) DBCO-PEG-SH (MW 5,000), H 2 O, RT, 2 שעות; ~ 40 מעלות צלזיוס, 60 דקות,> 99% תשואה radiochemical. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

t = "איור 2" src = "/ files / ftp_upload / 54,759 / 54759fig2.jpg" />
איור 2. הכרומתוגרמה אנליטית HPLC של יזיד שכותרתו לי 125 (1). (א) Radiochromatogram של המוצר הגולמי. (ב) Radiochromatogram של המוצר המטוהר. (ג) chromatogram UV (254 ננומטר) של המוצר המטוהר. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 3
איור 3. תוצאות רדיו-TLC של 125 ננו-חלקיקי זהב שכותרתו לי (4) (R f של 4 = 0.05, R f של 1 = 0.45, eluent: אתיל אצטט) (א) אחרי התגובה של 60 דקות ו (ב) לאחר טיהור./ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54759/54759fig3large.jpg "target =" _ blank "> לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

באופן כללי, התשואה radiochemical הנצפה של אזיד מטוהרים 125 שכותרתו-I (1) היה 75 ± 10% (n = 8). Radiolabeling הושג עם 50-150 MBq של רדיואקטיביות, ותוצאות radiochemical הן די עקביות. אם [125 I] Nai (t 1/2 = 59.4 ד) כי עבר התפרקות רדיואקטיבית במשך יותר מחודש שמשה תגובת radioiodination, תשואת radiochemical של 1 נצפה להיות ירידה קלה (53-65%). לכן, מומלץ כי [125 I] Nai להיות מנוצל ברגע זה מיוצר או מועבר למעבדה על מנת לקבל תשואה radiochemical מותאם. בנוסף, פתרון chloramine T מוכן טרי צריך לשמש גם התגובה להשיג את התשואה radiochemical הרצוי.

מכיוון מבשר (2) היה הידרופובי למדי, 150 μl אתנול אבסולוטי יש להוסיף לפזר 1 מ"ג [125 I] נאה. מסיסות ירידה של מבשר לעתים קרובות תוצאות תשואה radiochemical נמוכה של 1. DMSO יכול לשמש גם עבור המסת 2 בשלב radiolabeling. בנוסף, חומצה אצטית יש להוסיף את הפתרון מבשר להשיג תשואה גבוהה radiochemical בשלב radioiodination.

לפני השימוש HPLC preparative לטיהור המוצר גולמי המכיל 1, בעמודה HPLC שלב הפוכה צריך להישטף עם A ממיסים ו- B (קצב הזרימה: 10 מ"ל / דקה; שיפוע eluent: 100% B ממס עבור 0-10 דקות, 100 -0% B ממס עבור 10-25 דקות, ו -0% B ממס במשך 25-30 דקות) כדי להסיר עקבות כמות הזיהומים מהמערכת. לאחר מכן, בעמודת HPLC השלב ההפוכה equilibrated עם 20% B ממס ב -80% ממס למשך 20 דקות לפחות כדי להשיגזמן השמירה העקבית של 1.

השבר המכיל 1 מטוהרים צריך להיות מדולל עם יותר מ 4 פעמים את הנפח של H 2 O בנוהל מיצוי שלב המוצק. אחרת, חלק המוצר המטוהר לא יכול להיות לכוד במחסנית tC18. כאשר אצטון משמש elute מטוהרים 1 ממחסנית, נפח הסופי יכול להיות מופחת על ידי אידוי של אצטון עם זרם של חנקן או גז ארגון בטמפרטורת הסביבה.

בין כמה iodines רדיואקטיבי, 125 נבחרתי והשתמשתי במחקר הנוכחי. סוגים שונים של רדיו-איזוטופים יוד צריך להיבדק באמצעות השיטה הנהוגה כיום במחקרים ביולוגיים ורפואיים אחרים (למשל, 124 ואני הדמיה PET, 131 ואני למטרות טיפוליות).

ככל שאנחנו מבינים, פרוטוקול radiolabeling הנוכחי הוא הדוח הראשון מתאר syntheti המפורטצעדים ג עבור קבוצה יזיד שכותרתו לרדיואיודין. לאחרונה פרסמנו קבוצה פרוסטטית תזיד אחרת, אשר יש מבנה שונה 23. עם זאת, יזיד רדיואקטיבי (1) בשיטה הנוכחית ספק תוצאות radiochemical מעט טובות יותר מהשני מבחינת יעילות radiolabeling עם מולקולות קבוצה-DBCO המכיל. קיימים קבוצות תותבות (כלומר, N -hydroxysuccinimide ו maleimide) עבור התיוג של יוד רדיואקטיבי לא יכול לספק-סגולי אתר. עם זאת, השיטה הנוכחית מדגימה יעילה radiolabeling פשוטה יחד עם bioorthogonality מעולה. מאז הקבוצה אזיד פונקציונלי ידוע להיות מאוד יציבה בתנאים פיזיולוגיים בסביבות vivo, המוצר רדיואקטיבי (1) יכול להיות מנוצל מראש ממוקד בדיקות הדמיה vivo. אנו צופים כי שיטה זו תיושם ביעילות היא במבחנה ב רדיואיזוטופיים יוד vivo labeling של ביומולקולות ו ננו המכיל מבנה cyclooctyne מתוח.

בהתבסס על הרדיואקטיביות הספציפית של 1, היחס הטוחן המחושב של 125 חלקיקים שאני וזהב הוא ~ 1:. 1 125 ננו-חלקיקי זהב שכותרתו לי (4) ניתן להשתמש במחקרי הדמית biodistribution המולקולריים של ננו. השיטה הנוכחית יכולה להיות מיושמת גם תיוג יוד רדיואקטיבי בגדלים שונים ובצורות שונות של ננו זהב.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Chloramine T trihydrate Sigma 402869
[125I]NaI in aq. NaOH Perkin-Elmer NEZ033A010MC
Sodium metabisulfite  Sigma S9000
Formic acid Sigma 251364
Sep-Pak tC18 plus cartridge Waters WAT036800
Dimethyl sulfoxide  Sigma D2650
Acetone Sigma 650501
Ethanol Sigma 459844
Gold(III) chloride trihydrate Sigma 520918
Tween 20  Sigma P1379
DBCO PEG SH (MW 5,000) NANOCS PG2-DBTH-5k
TLC silica gel 60 F254 Merck
Analytical HPLC Agilent 1290 Infinity Model number
Preparative HPLC Agilent 1260 Infinity Model number
Analytical C18 reverse-phase column Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18
Preparative C18 reverse-phase column Agilent PrepHT XDB-C18
Radio TLC scanner Bioscan AR-2000 Model number
Radioisotope dose calibrator Capintec, Inc CRC -25R dose calibrator Model number

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Jewett, J. C., Bertozzi, C. R. Cu-free Click Cycloaddition Reactions in Chemical Biology. Chem. Soc. Rev. 39, 1272-1279 (2010).
  2. Debets, M. F., et al. Bioconjugation with Strained Alkenes and Alkyne. Acc. Chem. Res. 44, 805-815 (2011).
  3. Sletten, E. M., Bertozzi, C. R. From Mechanism to Mouse: A Tale of Two Bioorthogonal Reactions. Acc. Chem. Res. 44, 666-676 (2011).
  4. Koo, H., et al. Bioorthogonal Cu-Free Click Chemistry in vivo for Tumor-Targeted Delivery of Nanoparticles. Angew. Chem. Int. Ed. 51, 11836-11840 (2012).
  5. Chang, P. V., et al. Copper-Free Click Chemistry in Living Animals. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 107, 1821-1826 (2010).
  6. Bostic, H. E., Smith, M. D., Poloukhtine, A. A., Popik, V. V., Best, M. D. Membrane Labeling and Immobilization via copper-free Click Chemistry. Chem. Commun. 48, 1431-1433 (2012).
  7. Someya, T., Ando, A., Kimoto, M., Hirao, I. Site-Specific Labeling of RNA by Combining Genetic Alphabet Expansion Transcription and Copper-Free Click Chemistry. Nucl. Acids Res. 43, 6665-6676 (2015).
  8. Lee, S. B., et al. Mesoporous Silica Nanoparticle Pretargeting for PET Imaging Based on a Rapid Bioorthogonal Reaction in a Living Body. Angew. Chem. Int. Ed. 52, 10549-10552 (2013).
  9. Sachin, K., et al. F-18 Labeling Protocol of Peptides Based on Chemically Orthogonal Strain-Promoted Cycloaddition under Physiologically Friendly Reaction Conditions. Bioconjugate Chem. 23, 1680-1686 (2012).
  10. Evans, H. L., et al. Copper-Free Click - A Promising Tool for Pre-targeted PET Imaging. Chem. Commun. 48, 991-993 (2012).
  11. Campbell-Verduyn, L. S., et al. Strain-Promoted Copper-Free "Click" Chemistry for 18F Radiolabeling of Bombesin. Angew. Chem. Int. Ed. 50, 11117-11120 (2011).
  12. Arumugam, S., Chin, J., Schirrmacher, R., Popik, V. V., Kostikov, A. P. 18F]Azadibenzocyclooctyne ([18F]ADIBO): A Biocompatible Radioactive Labeling Synthon for Peptides using Catalyst Free [3+2] Cycloaddition. Bioorg. Med. Chem. Lett. 21, 6987-6991 (2011).
  13. Bouvet, V., Wuest, M., Wuest, F. Copper-Free Click Chemistry with the Short-Lived Positron Emitter Fluorine-18. Org. Biomol. Chem. 9, 7393-7399 (2011).
  14. Satpati, D., Bauer, N., Hausner, S. H., Sutcliffe, J. L. Synthesis of [64Cu]DOTA-ADIBON3-Ala-PEG28-A20FMDV2 via Copper-Free Click Chemistry for PET Imaging of Integrin αvβ6. J. Radioanal. Nucl. Chem. 302, 765-771 (2014).
  15. Lee, D. E., et al. Facile Method To Radiolabel Glycol Chitosan Nanoparticles with 64Cu via Copper-Free Click Chemistry for MicroPET Imaging. Mol. Pharmaceutics. 10, 2190-2198 (2013).
  16. Zeng, D. 64Cu Core-Labeled Nanoparticles with High Specific Activity via Metal-Free Click Chemistry. ACS Nano. 6, 5209-5219 (2012).
  17. Jeon, J., et al. Radiosynthesis and in vivo Evaluation of [125I]2-4(iodophenethyl)-2-Methylmalonic Acid as a Potential Radiotracer for Detection of Apoptosis. J. Radioanal. Nucl. Chem. 308, 23-29 (2016).
  18. Adam, M. J., Wilbur, D. S. Radiohalogens for Imaging and Therapy. Chem. Soc. Rev. 34, 153-163 (2005).
  19. Jeon, J., et al. Radiosynthesis of 123I-Labeld Hesperetin for Biodistribution Study of Orally Administered Hesperetin. J. Radioanal. Nucl. Chem. 306, 437-443 (2015).
  20. Kil, K. E., et al. Development of [123I]IPEB and [123I]IMPEB as SPECT Radioligands for Metabotropic Glutamate Receptor Subtype. ACS Med. Chem. Lett. 5, 652-656 (2014).
  21. Chen, M. K., et al. The Utility of I-123 Pretherapy Scan in I-131 Radioiodine Therapy for Thyroid Cancer. Thyroid. 22, 304-309 (2012).
  22. Jeon, J., et al. Efficient Method for Iodine Radioisotope Labeling of Cyclooctyne-Containing Molecules using Strain-Promoted Copper-Free Click Reaction. Bioorg. Med. Chem. 23, 3303-3308 (2015).
  23. Choi, M. H., et al. Synthesis and Evaluation of an 125I-Labeled Azide Prosthetic Group for Efficient and Bioorthogonal Radiolabeling of Cyclooctyne-Group Containing Molecules using Copper-Free Click Reaction. Bioorg. Med. Chem. Lett. 26, 875-878 (2016).
  24. Kim, Y. H., et al. Tumor Targeting and Imaging Using Cyclic RGD-PEGylated Gold Nanoparticle Probes with Directly Conjugated Iodine-125. Small. 7, 2052-2060 (2011).

Tags

כימיה גיליון 116 Radiolabeling רדיואיזוטופיים radiotracer יוד רדיואקטיבי תגובת Bioorthogonal תגובה קליק ללא נחושת קבוצה פרוסטטית תזידו חלקיקי זהב
פרוטוקול אופטימיזציה עבור Radiolabeling היעיל של חלקיקי זהב על ידי שימוש<sup&gt; 125</sup&gt; שכותרתו לי אזיד תותבת קבוצה
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Jeon, J., Shim, H. E., Mushtaq, S.,… More

Jeon, J., Shim, H. E., Mushtaq, S., Choi, M. H., Park, S. H., Choi, D. S., Jang, B. S. An Optimized Protocol for the Efficient Radiolabeling of Gold Nanoparticles by Using a 125I-labeled Azide Prosthetic Group. J. Vis. Exp. (116), e54759, doi:10.3791/54759 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter