Summary
दर्दनाक संधिसंधान में विभेदक निदान उपचार की सफलता के लिए महत्वपूर्ण है । संयुक्त आकांक्षा नियमित रूप से किया जाता है । मल्टीप्लेक्स पोलीमरेज़ संयुक्त महाप्राण की चेन रिएक्शन और sonication द्रव, इन नमूनों से त्वरित रोगज़नक़ पता लगाने के लिए एक व्यवहार्य उपकरण वर्णित है ।
Abstract
आर्थोपेडिक रोगियों में, विदेशी शरीर से जुड़े संक्रमण, विशेष रूप से periprosthetic संयुक्त संक्रमण (PJIs), संधिसंधान की एक विनाशकारी जटिलता है । संक्रमण जटिल उपचार की आवश्यकता है, लंबे समय से अस्पताल में परिणाम हो सकता है और काफी लागत का कारण बनता है । कई शल्य चिकित्सा संशोधन समारोह में एक नुकसान के साथ ही जीवन की गुणवत्ता में, इन रोगियों में आवश्यक हो सकता है ।
दिनचर्या ऑपरेटिव निदान सी के लिए रक्त परीक्षा-प्रतिक्रियाशील प्रोटीन (सीआरपी) और अंय उपमार्क्स, साथ ही सेल गिनती, भेदभाव, और संस्कृति के लिए संयुक्त महाप्राण विश्लेषण शामिल हैं । प्रोटोकॉल और माइक्रोबायोलॉजी के लिए Intraoperative नमूनों की भी मानक प्रक्रिया है. sonication के साथ हटाया प्रत्यारोपण के सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा, सूक्ष्म जीव विज्ञान में आणविक जीवविज्ञान तकनीक के कार्यांवयन के साथ संयोजन में, दो उपंयास वर्तमान में पजी के अंतर निदान को बढ़ाने के लिए कार्यरत तकनीकों का प्रतिनिधित्व करते हैं ।
हम यहाँ एक कारतूस आधारित मल्टीप्लेक्स पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) प्रणाली का उपयोग करते हुए संयुक्त महाप्राण और sonication द्रव का विश्लेषण करने के चरण-वार प्रक्रिया प्रस्तुत करते हैं । परिणाम पारंपरिक संस्कृतियों और पजी के लिए आम सहमति मानदंड के खिलाफ मिलान किया गया । ऊतक बायोप्सी, संयुक्त महाप्राण और sonication द्रव से पारंपरिक सूक्ष्मजीवविज्ञानी संस्कृतियों ६६.७%, ६६.७%, और ८८.९%, क्रमशः, और ८२.३% की एक विशिष्टता, ५४.६%, और ६१.५%, क्रमशः की एक संवेदनशीलता दिखाया । sonication द्रव और संयुक्त द्रव की पीसीआर नैदानिक ५०.०% और ५५.६% की एक संवेदनशीलता, क्रमशः दिखाया गया है, और दोनों १००.०% की एक विशिष्टता । दोनों पीसीआर निदान संयुक्त ६६.७% की संवेदनशीलता और १००.०% की एक विशिष्टता थी । मल्टीप्लेक्स पीसीआर इसलिए पजी निदान में मध्यम संवेदनशीलता लेकिन उच्च विशिष्टता के साथ एक तेजी से नैदानिक उपकरण प्रस्तुत करता है ।
Introduction
दर्दनाक arthroplasties आर्थोपेडिक सर्जरी में एक नैदानिक चुनौती हैं । रोकनेवाला ढीला करने के बाद, पजी प्रत्यारोपण विफलता के लिए दूसरा सबसे कारण है, और संधिसंधान सर्जरी के बाद एक विनाशकारी जटिलता प्रस्तुत करता है । पजी का इलाज मुश्किल है और उसका निदान मुश्किल है । एक पजी के चूक निदान की संभावना आवर्तक संक्रमण में परिणाम होगा, प्रमुख रुग्णता के साथ, समारोह की हानि, और जीवन की गुणवत्ता के नुकसान । इसलिए, सभी रोगियों में दर्दनाक संधिसंधान के साथ पेश करने से पहले संक्रमण से इंकार किया जाना चाहिए, चिकित्सकीय उपायों शुरू कर रहे हैं ।
रोगी इतिहास, नैदानिक परीक्षा, सीआरपी और सफेद रक्त कोशिका गिनती के लिए रक्त परीक्षा, साथ ही रेडियोग्राफी या प्रभावित संयुक्त के szintigraphy का गठन बुनियादी निदान1। ऑपरेटिव दिनचर्या में भी बाँझ शर्तों के तहत एक संयुक्त आकांक्षा शामिल करना चाहिए जहां कहीं संभव. महाप्राण का अधिग्रहण आगे निदान में एक बहुत ही मूल्यवान सामग्री है ।
सेल गिनती और संयुक्त महाप्राण में सेल भेदभाव के अलावा के रूप में अच्छी तरह से की स्थापना की परख2, प्रोटीन के पता लगाने के लिए अंतर निदान3,4,5में मदद कर सकता है । पारंपरिक सूक्ष्मजीवविज्ञानी संस्कृति रोगज़नक़ पता लगाने में सोने के मानक रहता है । दोनों ग्राम सकारात्मक और ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया, और प्रत्यारोपण सतहों के लिए अनुयाई के कारण होता है, और, पजी में एक प्रमुख रोगजनक कारक हैं । इसलिए, २००७ में, sonication के प्रक्रिया में लागू किया गया था विदेशी शरीर के निदान में आर्थोपेडिक सर्जरी में जुड़े संक्रमण, हटाए गए प्रत्यारोपण पर फिल्म को बाधित करने के लिए रोगज़नक़ का पता लगाने की अनुमति है । बैक्टीरिया इस तरह एक सक्रिय रूप से अपने आराम कर फार्म से लिया जाता है, संस्कृति में खोज फिर से संभव बनाने । हटाया प्रत्यारोपण के Sonication ऊतक नमूनों से संस्कृतियों की तुलना में एक उच्च संवेदनशीलता दिखाया (७८.५% बनाम ६०.८%)6।
न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन परीक्षण (NAT), जैसे पीसीआर, हाल ही में पजी के निदान के लिए चिकित्सकों और विज्ञानियों के दायरे में चले गए हैं । विशेष रूप से रोगियों जो सर्जरी से पहले एंटीबायोटिक थेरेपी प्राप्त में, यह पता चला है कि पीसीआर नैदानिक प्रेरणा जीवों7,8,9की पहचान करने में फायदेमंद है । हाल ही में, प्रत्यारोपण और ऊतक संक्रमण (आईटीआई) के लिए विशेष रूप से बनाया गया एक नई मल्टीप्लेक्स पीसीआर प्रणाली, शुरू की गई थी । इस कारतूस आधारित प्रणाली रोगजनकों और एंटीबायोटिक प्रतिरोध मार्करों की पहचान के लिए जीनोमिक मार्करों की एक किस्म प्रदान करता है । अपने आवेदन रेंज में कई संकेत हैं (कृत्रिम संयुक्त संक्रमण, सर्जिकल साइट संक्रमण, कार्डियोलोजी से संबंधित संक्रमण, कैथेटर से जुड़े संक्रमण, मधुमेह पैर संक्रमण, गहरी त्वचा और ऊतक संक्रमण, प्रत्यारोपण संक्रमण, और जला घाव में संक्रमण), और नमूना सामग्री का एक व्यापक पैनल इस तकनीक (sonication द्रव, श्लेष द्रव, झाड़ू, ऊतक, मवाद, महाप्राण/रिसाव, और फिल्म) के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है10,11,12।
प्रक्रिया का सबसे बड़ा लाभ के रूप में पारंपरिक सूक्ष्म जीव विज्ञान की तुलना में, गति है: रोगज़नक़ घंटे के भीतर पहचाना जा सकता है । इसके अतिरिक्त, इस पीसीआर सिस्टम जीन इनकोडिंग प्रतिरोध मार्करों के एक व्यापक पैनल का पता लगाता है, लक्षित एंटीबायोटिक चिकित्सा की दीक्षा पर जल्दी अनुमति देता है । पीसीआर की सहायता से, सर्जन नैदानिक प्रक्रिया11में बहुत प्रारंभिक चरण में संक्रमित और गैर-संक्रमित रोगियों के बीच अंतर करने में सक्षम हो सकते हैं । यहां, हम इस मल्टीप्लेक्स पीसीआर प्रदर्शन करने के लिए प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं, जल्दी से संयुक्त महाप्राण और sonication द्रव से पजी निदान ।
Protocol
यह अध्ययन स्थानीय नैतिकता समिति (046/09, Rev .3) द्वारा अनुमोदित किया गया था । सूचित सहमति और डेटा गोपनीयता कथन शामिल सभी रोगियों से प्राप्त किया गया ।
1. संयुक्त आकांक्षा
नोट: प्रक्रिया एक शल्य थियेटर या तुलनीय रोकनेवाला शर्तों के साथ एक हस्तक्षेप कमरे में किया जाना चाहिए । एक नर्स या डॉक्टर की सहायता के द्वारा सहायता उपयोगी है लेकिन अनिवार्य नहीं है ।
- एक परीक्षा बिस्तर पर लापरवाह स्थिति में रोगी की स्थिति । सुनिश्चित करें कि ब्याज की संयुक्त कपड़े से मुक्त है । घने या लंबे शरीर के बाल बिजली कतरनी का उपयोग कर छोटा । एक रेजर के साथ शरीर के बालों को न निकालें । anteroposterior दिशा में एक fluoroscope स्थिति अगर कूल्हे संयुक्त पंचर किया जा करने के लिए है । यदि घुटने को पंचर किया जाए तो रोगी के घुटने के नीचे एक घुटने के रोल को ऐसे रखें कि घुटने में थोड़ी-सी ठोके स्थिति में१३पर आराम हो जाए.
- निम्न बाँझ उपकरण के साथ एक साधन तालिका तैयार करें: बाँझ झाड़ू, एक fenestrated बाँझ कवर कपड़ा, एक डिस्पोजेबल बाँझ स्केलपेल, सर्जिकल ब्लेड (प्रकार #11) कहा जाता है, और बाँझ प्रवेशनी के साथ 10 मिलीलीटर सिरिंज (20 गेज, ८० मिमी). शराबी त्वचा विसंक्रमित, रक्त संग्रह ट्यूबों और एक बाल चिकित्सा रक्त संस्कृति कुप्पी अलग से सेट करें ।
- एक शल्य गाउन, हुड और मुखौटा में पोशाक, और बाँझ दस्ताने पर डाल दिया ।
- अच्छी तरह से पंचर साइट पर रोगी की त्वचा धो (उदा सुपीरियर recessus14 कूल्हे के लिए घुटने और अग्रपाश्विक पोर्टल क्षेत्र के लिए) एक त्वचा विसंक्रमित के साथ ।
नोट: (आमतौर पर घुटने में ९० एस, शराबी कीटाणुनाशक के लिए कूल्हे पर १२० एस) इस्तेमाल किया विसंक्रमित के लिए आवश्यक जोखिम समय मन । -
एक fenestrated बाँझ कवर कपड़े के साथ पंचर साइट को कवर । पंचर साइट की पहचान ।
नोट: घुटने के लिए, सही साइट ऊपरी वुटने पोल के ऊपर 2 सेमी और पार्श्व पहलू के लिए 2 सेमी पार्श्व है । कूल्हे के लिए, पूर्वकाल बेहतर श्रोणि रीढ़ खोजने के लिए और ऊपरी symphysis के साथ लाइन में जब तक caudally चाल । सुनिश्चित करें कि साइट ऊरु धमनी (लगभग 4 सेमी) के लिए पार्श्व है, जो हमेशा15palpated किया जा सकता है ।- पंचर साइट पर नुकीले स्केलपेल ब्लेड के साथ त्वचा (3-4 मिमी चौड़ा और गहरा) के माध्यम से एक छोटा सा छुरा चीरा बनाओ । स्थानीय निश्चेतक लागू न करें क्योंकि वे सूक्ष्मजीवविज्ञानी संस्कृति में झूठी नकारात्मकता पैदा कर सकते हैं, उनके बैक्टीरियोस्टेटिक प्रभाव के कारण ।
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प्रवेशनी को सिरिंज की Luer स्लिप में अटैच कर देते हैं. छुरा चीरा के माध्यम से प्रवेशनी डालें. घुटने के संयुक्त के सुपीरियर अवकाश पर, एक ४५ ° कोण पृष्ठीय और औसत दर्जे का, वुटने के शीर्ष पोल के नीचे अवकाश की ओर लक्ष्य, और लगभग 5 सेमी. महाप्राण के एक गहराई को सुई डालने से बाहर है सिरिंज पिस्टन ड्राइंग द्वारा संयुक्त द्रव ।
- fluoroscope मार्गदर्शन का प्रयोग करें जब puncturing एक हिप संयुक्त । पंचर साइट पर सुई डालें, एक ६० ° कोण पर औसत दर्जे का लक्ष्य । fluoroscope में, सुनिश्चित करें कि सुई की नोक अंग गर्दन पर बताया है । जब तक संयुक्त द्रव प्राप्त नहीं होता, तब तक प्रवेशनी को लगभग 8 सेमी (वसा के रोगियों में गहरा) की गहराई तक उन्नत किया जाता है । स्थिति में सुई पकड़ो, जबकि aspirating, अंग सतह के स्क्रैप से बचने के लिए ।
नोट: अंग के साथ सुई टिप के संपर्क intraarticular स्थिति सुनिश्चित करता है । आमतौर पर, कोई तरल पदार्थ के 5 मिलीलीटर से अधिक एक हिप संयुक्त फार्म aspirated जा सकता है, एक घुटने संयुक्त 10 मिलीलीटर से अधिक उपज जाएगा । - प्रवेशनी के हटाने के बाद, एक बाँझ घाव छुरा चीरा करने के लिए ड्रेसिंग लागू होते हैं । रक्तगुल्म गठन को रोकने के लिए, मामूली संपीड़न के साथ पैर करने के लिए एक पट्टी लागू होते हैं ।
- fluoroscope मार्गदर्शन का प्रयोग करें जब puncturing एक हिप संयुक्त । पंचर साइट पर सुई डालें, एक ६० ° कोण पर औसत दर्जे का लक्ष्य । fluoroscope में, सुनिश्चित करें कि सुई की नोक अंग गर्दन पर बताया है । जब तक संयुक्त द्रव प्राप्त नहीं होता, तब तक प्रवेशनी को लगभग 8 सेमी (वसा के रोगियों में गहरा) की गहराई तक उन्नत किया जाता है । स्थिति में सुई पकड़ो, जबकि aspirating, अंग सतह के स्क्रैप से बचने के लिए ।
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नमूना कंटेनर में एकत्रित संयुक्त महाप्राण स्थानांतरण । पूरे बाँझ काम तकनीक सुनिश्चित करें ।
- aspirated संयुक्त द्रव के साथ बाल चिकित्सा रक्त संस्कृति कुप्पी के टीका के लिए, शराबी विसंक्रमित के साथ बाल चिकित्सा रक्त संस्कृति कुप्पी की झिल्ली को संक्रमित । सिरिंज पर एक ताजा प्रवेशनी रखो और रक्त संस्कृति कुप्पी में aspirated संयुक्त द्रव के 1 से 3 मिलीलीटर सुई । कोमल आंदोलन या रोटेशन16से मिश्रण ।
- एक देशी संयुक्त महाप्राण नमूना तैयार करने के लिए, सिरिंज से प्रवेशनी निकालें. additives के बिना एक रक्त संग्रह ट्यूब खोलें और इस संग्रह ट्यूब में महाप्राण के 1 मिलीलीटर सुई । बदलें और पीसीआर विश्लेषण के लिए ढक्कन जकड़ना ।
नोट: पीसीआर विश्लेषण के लिए बिना किसी देरी के सैंपल को माइक्रोबायोलॉजी लैब में शिप करें । इसी नमूने से पारंपरिक सूक्ष्मजीवविज्ञानी एरोबिक और anaerobic संस्कृतियों को भी17सेट किया जा सकता है । - सेल गिनती और भेदभाव2के लिए EDTA युक्त एक रक्त संग्रह ट्यूब में संयुक्त महाप्राण के 1 से 4 मिलीलीटर स्थानांतरण । किसी भी देरी के बिना एक जैव रसायन प्रयोगशाला के लिए नमूना जहाज ।
2. पीसीआर निदान
- सुनिश्चित करें कि सभी तीन उपकरणों (lysator, विश्लेषक, और कॉकपिट; सामग्री की तालिका देखें) कर रहे है और सही ढंग से चल रहा है । सभी परीक्षण प्रदर्शन के लिए आवश्यक आपूर्ति (पीसीआर कारतूस, एक मास्टर मिक्स ट्यूब, नमूना ट्यूब और नमूना ट्यूब कैप, एक 0-200 µ l micropipette, और बाँझ पिपेट युक्तियाँ) कार्य बेंच पर सेट करें ।
- प्रक्रिया शुरू करने से पहले मास्टर मिक्स ट्यूब, यह कमरे के तापमान पर बाहर की स्थापना के द्वारा । सभी उपभोग्य सामग्रियों (मास्टर मिक्स ट्यूब, कारतूस, और नमूना ट्यूब) पहले से ही एक बारकोड के साथ लेबल कर रहे हैं ।
- नमूना ट्यूब की टोपी निकालें । ले १८० µ एल एकत्र नमूना (या तो संयुक्त महाप्राण, अनुभाग 1; या sonication द्रव देखें, अनुभाग 4 देखें) एक पिपेट के साथ और यह नमूना ट्यूब में स्थानांतरण । नमूना ट्यूब प्रोटीन कळेनासे कश्मीर और पूरे कार्यप्रवाह की गुणवत्ता नियंत्रण के लिए एक आंतरिक नियंत्रण जीन युक्त नमूने ट्यूब के साथ बंद करें ।
- कॉकपिट में, निचले बाएँ कोने में "नया परीक्षण" बटन को छूकर ऑपरेटिंग सॉफ्टवेयर खोलें. touchscreen के माध्यम से रोगी का डेटा या एक नमूना आईडी दर्ज करें । नमूना का चयन करने के लिए, पहले ड्रॉपडाउन से "आईटीआई कारतूस" चुनते हैं, तो आवेदन मोड के रूप में "आर्थोपेडिक्स", और अंत में नमूना प्रकार के रूप में "श्लेष द्रव" या "sonication द्रव" का चयन करें । प्रारंभ बटन दबाएं ।
- नमूना ट्यूब के तल पर बारकोड को स्कैन करें । lysator में नमूना ट्यूब डालें ।
नोट: lysis प्रक्रिया स्वचालित रूप से शुरू और लगभग 30 मिनट लेने के लिए खत्म हो जाएगा । lysis समाप्त हो गया है जब lysator स्क्रीन पर टाइमर की उलटी गिनती का संकेत होगा. - lysator से नमूना ट्यूब अनलॉक करने के लिए कॉकपिट स्क्रीन पर नमूना का चयन करें । lysator से नमूना ट्यूब निकालें और lysator के शीर्ष कवर बंद करें । नमूना ट्यूब पीसीआर कारतूस का नमूना ट्यूब स्लॉट में स्थानांतरण । पीसीआर कारतूस के mastermix स्लॉट में फ्रॉस्टेड mastermix ट्यूब डालें ।
- कॉकपिट मॉनिटर पर निर्देशों का पालन करें, mastermix और नमूना ट्यूब के साथ पीसीआर कारतूस स्कैनिंग ।
- विश्लेषक के संकेत कारतूस स्लॉट में पीसीआर कारतूस डालें । जब किया, विश्लेषक कारतूस विज्ञप्ति ।
नोट: पीसीआर शर्तों निर्माता द्वारा पूर्व निर्धारित कर रहे है और उपयोगकर्ता द्वारा बदला नहीं जा सकता है । अधिक जानकारी के लिए निर्माता के अनुप्रयोग मार्गदर्शिका देखें । पीसीआर प्रक्रिया स्वचालित रूप से शुरू होगा और लगभग 4 ज 10 मिनट ले । - कारतूस निकालें और छोड़ें । कॉकपिट टचस्क्रीन पर, निचले बाएँ कोने में "वर्तमान परीक्षण" चुनें, तो परीक्षण के परिणाम प्रदर्शित करने के लिए सही नमूना आईडी उठाओ. परिणाम मशीन की स्मृति पर सहेजें, और प्रिंट या निर्यात (यूएसबी ड्राइव के माध्यम से) आगे संदर्भ के लिए ।
नोट: बिना देरी सर्जन के लिए, रोगज़नक़ पहचान और प्रतिरोध मार्करों का पता लगाने सहित पीसीआर के परिणाम की रिपोर्ट । जीवाणु और कवक रोगज़नक़ों के ११४ deoxyribonucleic एसिड (डीएनए) के लक्ष्य के साथ एक पैनल आम तौर पर प्रत्यारोपण संक्रमण और कोमल ऊतक संक्रमण में पाया, सबसे आम एंटीबायोटिक प्रतिरोध मार्कर के साथ साथ विश्लेषण किया है ।
3. सर्जिकल प्रक्रिया: Intraoperative नमूना संग्रह
नोट: संशोधन संधिसंधान सर्जरी कौशल और विशेषज्ञता के एक विशेषज्ञ स्तर की आवश्यकता है; शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं की एक व्यापक सिंहावलोकन के लिए, कृपया सर्जन की पाठ्यपुस्तकों को देखें18। शल्य प्रक्रिया का एक पूर्ण और विस्तृत वर्णन अच्छी तरह से इस लेख के दायरे से परे होगा । यहां ध्यान नमूना संग्रह और पूर्व विश्लेषिकी के विवरण पर है । संशोधन संधिसंधान सर्जरी में, एक भी गोली एंटीबायोटिक प्रोफिलैक्सिस के प्रशासन से बचना, के रूप में सूक्ष्मजीवविज्ञानी सर्जरी के दौरान प्राप्त नमूनों के परिणामों से समझौता नहीं है । इस नियम का पालन करने की सिफारिश की है, हालांकि इस अभ्यास विवादास्पद19,20है । जब भी संभव हो संयुक्त करने के लिए मौजूदा शल्य दृष्टिकोण का उपयोग करें । अतिरिक्त सर्जिकल दृष्टिकोण नरम ऊतकों से समझौता करेंगे और निशान गठन को बढ़ा देंगे ।
- संयुक्त कैप्सूल जब तक ऊतक टुकड़े अच्छी तरह से उजागर होता है । तैयार है, तो आगे संयुक्त द्रव में एक सिरिंज के साथ arthrotomy प्रदर्शन आगे विश्लेषण के लिए बाँझ सिरिंज में एकत्र किया जा सकता है के रूप में ऊपर कहा गया है (कदम 1.7.1-1.7.3).
नोट: कोई एंटीसेप्टिक लेवेज तरल पदार्थ का उपयोग किया जाना चाहिए जब तक प्रत्यारोपण हटा दिया गया है और ऊतक नमूने लिया गया है । - संयुक्त प्रत्यारोपण निकालें । हटाने के बाद तुरंत, एक हवा और पानी तंग ढक्कन के साथ एक बाँझ प्लास्टिक कंटेनर में प्रत्यारोपण भागों हस्तांतरण.
नोट: प्रत्यारोपण हटाने के लिए विस्तृत निर्देश पाठ्यपुस्तक साहित्य में पाया जा सकता है (घुटने, उदा: Wirtz एट अल., अध्याय १६.४21; हिप, उदा: Claes एट अल., अध्याय 14.5.122) । विशिष्ट उपकरणों आवश्यक हो सकता है, के रूप में ' निर्माताओं के निर्देश द्वारा कहा गया है । प्रत्यारोपण हटाने तकनीक अलग प्रत्यारोपण प्रकार और निर्धारण तरीकों के बीच काफी भिंन होता है । छेनी और अभ्यास, एक फिसलने हथौड़ा और एक सार्वभौमिक intramedullary कील हटाने सेट का एक सेट बोनी एकीकृत प्रत्यारोपण23,24को दूर करने में सहायक हैं । - अस्थि प्रत्यारोपण अंतरफलक से झिल्ली ऊतक हटाने के लिए एक बाँझ तेज curette, संदंश और rongeur का प्रयोग करें । एक पेंच पर ढक्कन के साथ एक बाँझ प्लास्टिक कंटेनर में ऊतक के एक प्रतिनिधि नमूना हस्तांतरण, सूक्ष्म जीव विज्ञान और प्रोटोकॉल के लिए नमूनों के रूप में.
नोट: एक reamer सभी कोमल ऊतकों की दिमाग़ी नहर स्पष्ट करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । इसके अलावा, परीक्षा के लिए श्लेष ऊतक और जोड़दार कैप्सूल के नमूने ले और उन्हें बाँझ कंटेनरों में स्टोर. कुल मिलाकर चार नमूनों को इकट्ठा किया जाना चाहिए । - सभी नमूनों और explanted पार्ट्स को तुरन्त माइक्रोबायोलॉजी लैब में भेजें ।
नोट: एंटीबायोटिक दवाओं तो दिया जा सकता है । सही एंटीबायोटिक दवाओं के विकल्प आवश्यक है और एक व्यक्तिगत निर्णय25,26होना चाहिए । चिकित्सकीय अवधारणाओं पर सर्जन और विज्ञानियों के एक अनुशासनात्मक पैनल द्वारा पहले से फैसला किया जाना चाहिए । - (जैसे पॉलीथीन पहनने, धातु या सीमेंट के कणों के रूप में) या संक्रमण और परिगलन (पीप, avascular, फाइब्रिन-लेपित, झिल्लीदार या "गदला" ऊतकों) मलबे के लक्षण से पता चलता है कि किसी भी ऊतक निकालकर पूर्व प्रत्यारोपण साइट की दुल्हन को पूरा करें । किसी भी मृत या osteitic हड्डी निकालें । सभी विदेशी सामग्री जैसे शिकंजा, तारों, cerclages, अस्थि सीमेंट मलबे या गैर resorbable टांके (देखें Claes एट अल., अध्याय 14.5.322) ।
- एक ५० मिलीलीटर सिरिंज का उपयोग कर चुनाव के एक घाव संक्रमित का उपयोग सर्जिकल साइट सिंचाई । पर्याप्त मात्रा (एक स्पंदित लेवेज प्रणाली के साथ घंटी समाधान के कम से कम 3 एल) के साथ सिंचाई । एक स्पेसर संयुक्त27को स्थिर करने के लिए आवश्यक हो सकता है ।
- कैप्सूल या प्रावरणी (लट polyglactin टांके, triclosan-लेपित, खासियत 2), और चमड़े के नीचे ऊतक (लट polyglactin टांके, triclosan-लेपित, खासियत 0) के लिए रोगाणुरोधी-लेपित resorbable गहरी टांके का उपयोग कर घाव बंद करें । गैर resorbing बाधित टांके (monofilic, खासियत 0 या खासियत 2-0) का उपयोग कर त्वचा को बंद करें ।
4. Sonication
नोट: कड़ाई से aseptically काम करने के लिए सावधान रहें । explanted सामग्री के आगे प्रसंस्करण के लिए लामिना वायु प्रवाह के साथ एक वर्ग द्वितीय सुरक्षा पीठ का प्रयोग करें ।
- खुले प्लास्टिक कंटेनर ऑपरेटिंग कमरे से explanted अंग पकड़े (३.२ कदम देखें) एक लामिना हवा के तहत काम के प्रवाह बेंच कार्य, और बाँझ ०.९% सोडियम क्लोराइड समाधान जोड़ें जब तक explanted विदेशी शरीर कम से ८०% (लगभग 500-800 मिलीलीटर) शामिल है ।
- प्लास्टिक कंटेनर को बंद करें । अच्छी तरह से हिला या प्लास्टिक कंटेनर 30 एस के लिए उच्च तीव्रता पर एक भंवर मिक्सर का उपयोग कर आंदोलन sonication स्नान में प्लास्टिक कंटेनर हस्तांतरण । sonication स्नान में द्रव स्तर की जांच करें ।
नोट: sonication स्नान द्रव स्तर प्लास्टिक कंटेनर के अंदर के रूप में ही होना चाहिए । सुनिश्चित करें कि प्लास्टिक कंटेनर और बाढ़ नहीं किया जा सकता है यदि आवश्यक जोड़ें या sonication स्नान से तरल निकालें । - ४० ± 2 kHz और पावर घनत्व ०.२२ ± ०.०४ W/cm2की एक आवृत्ति के साथ 5 मिनट के लिए नमूना Sonicate । शेक या 30 एस के लिए अच्छी तरह से नमूना भंवर ।
नोट: 1-5 मिनट के बीच Sonication बार, बैक्टीरियल व्यवहार्यता पर किसी भी प्रभाव के बिना28को भंग करने के लिए सबसे अच्छा कर रहे हैं । - लामिना फ्लो बेंच के अंदर, sonication द्रव के ५० मिलीलीटर इकट्ठा और यह एक बाँझ, कसकर सील ट्यूब करने के लिए स्थानांतरण ।
- एक केंद्रित sonication के तरल पदार्थ बनाने के लिए, 10 मिनट के लिए ट्यूब के केंद्रापसारक पर ४,२०० x g. 10 मिलीलीटर की एक अवशिष्ट मात्रा छोड़ने, एक पिपेट के साथ शेष supernatant त्यागें । pipetting और भंवर से गोली स्थगित ।
- लगाना उपयुक्त संस्कृति मीडिया (जैसे रक्त आगर, चॉकलेट आगर, Sabouraud आगर, Schaedler के आगर, कनमीसिन-Vancomycin आगर, या thioglycolate शोरबा) केंद्रित sonication द्रव प्रत्येक के ०.५ मिलीलीटर के साथ । ऊपर वर्णित के रूप में 2 मिलीलीटर के साथ बाल चिकित्सा रक्त संस्कृति कुप्पी लगाना (कदम 1.7.1 देखें) । पीसीआर विश्लेषण के लिए additives के बिना एक रक्त संग्रह ट्यूब में केंद्रित sonication द्रव के 1 मिलीलीटर स्थानांतरण ।
- inoculated संस्कृति मीडिया को मशीन (३५ ° c, 5% CO2) में स्थानांतरित करें । 14 दिनों के लिए संस्कृतियों गर्मी, और विकास के लिए दैनिक जांच ।
- 14 दिनों के बाद, कोई वृद्धि और नकारात्मक के रूप में रिपोर्ट के साथ संस्कृतियों त्यागें । यदि विकास का पता चला है, मानक पहचान तकनीकों और संवेदनशीलता परीक्षण का उपयोग कर रोगज़नक़ पहचान बाहर ले । बिना देरी के सर्जन को रिजल्ट की रिपोर्ट करें ।
नोट: यहां, रोगजनकों की पहचान मैट्रिक्स-असिस्टेड लेजर desorbtion/ionization-उड़ान के समय (मालदी-तोफ) स्पेक्ट्रोस्कोपी का उपयोग कर बाहर किया गया था । रोगाणुरोधी संवेदनशीलता परीक्षण एक semiautomated विश्लेषक29,30,31के साथ प्रदर्शन किया गया था ।
Representative Results
एक पजी की उपस्थिति, के रूप में (MSIS) के रूप में आम सहमति की बैठक द्वारा परिभाषित किया गया है, जब एक प्रमुख मानदंड या पांच छोटे मानदंडों में से कम से तीन उपस्थित थे साबित माना जाता है । प्रमुख मानदंडों में एक नालव्रण या दो अलग सूक्ष्मजीवविज्ञानी नमूनों में एक रोगज़नक़ का पता लगाने की उपस्थिति शामिल हैं । लघु मापदंड में धनात्मक कक्ष गणना (> 3, 000 ल्यूकोसाइट्स/µ l) या धनात्मक कक्ष विभेद (> 85% न्युट्रोफिल granulocytes) संयुक्त महाप्राण में, धनात्मक सीआरपी और रक्त नमूनों में अवसादन दर, ऊतक नमूनों में धनात्मक प्रोटोकॉल या सिर्फ एक सूक्ष्मजीवविज्ञानी नमूना19में एक रोगज़नक़ का पता लगाने । संवेदनशीलता और विशिष्टता न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन परीक्षण (NAT) के लिए गणना की गई, के रूप में MSIS सोने के मानक की तुलना में । रोगी विवरण, का पता चला रोगजनकों सहित, तालिका 1में दिए गए हैं ।
हमारे अपने परिणामों में sonication द्रव और संयुक्त महाप्राण के पीसीआर डायग्नोस्टिक के लिए एक उदारवादी संवेदनशीलता दिखाया (५०.०% और ५५.६%) लेकिन १००%11की एक बहुत मजबूत विशिष्टता । जब भी पीसीआर डायग्नोस्टिक (कुल n = ६२ परीक्षण) संयुक्त महाप्राण में एक सकारात्मक खोज दिखाया (n = 31) या sonication द्रव (एन = 31), एक ही रोगज़नक़ पारंपरिक सूक्ष्मजीवविज्ञानी संस्कृतियों में से एक में बाद में पता चला था । गैर-संक्रमण मामलों के विभिन्न नमूनों की पीसीआर ने कोई झूठा सकारात्मक परिणाम नहीं दिखाया ( चित्र 1देखें) ।
पीसीआर नैदानिक कुछ रोगजनकों कि पारंपरिक सूक्ष्मजीवविज्ञानी संस्कृति के तरीकों के साथ साबित किया गया पता लगाने में विफल रहा है । 16 में से 6 (३७.०%) सही sonication के तरल पदार्थ के नमूनों में और 13 में से 5 (३८.०%) संयुक्त द्रव संस्कृति से रोगजनकों पीसीआर का पता लगाने से चूक गए । ज्यादातर, पीसीआर निदान coagulase का पता लगाने चूक-नकारात्मक staphylococci (11 में से 8) । दोनों सामग्रियों के संयुक्त पीसीआर निदान (संयुक्त महाप्राण और sonication तरल पदार्थ, "परित पीसीआर") 18 संक्रमण मामलों में से 12 की पहचान सही ढंग से (संवेदनशीलता ६६.७%, ९५% CI: ४१.०% से ८६.७%, तालिका 2देखें) ।
चित्र 1: NAT परिणामों का सारांश. ग्राफ सामूहिक रोगी नमूनों से सारांशित परिणामों को दर्शाया गया है । दाईं ओर पर पजी मानदंड मिलान रोगियों के समूह है, बाईं ओर समूह है कि नहीं किया है । सलाखों न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन तरीकों का प्रतिनिधित्व करते हैं । झूठी सकारात्मक और झूठी नकारात्मक कुल के प्रतिशत के रूप में लाल रंग में दिखाया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
| संयुक्त | संशोधन का कारण | मिल्ने MSIS मापदण्ड? | पिछले एंटीबायोटिक उपचार? | Sonication द्रव संस्कृति | संयुक्त महाप्राण संस्कृति | नेट sonication संस्कृति | नात सिं महाप्राण |
| हिप | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | ||||
| घुटने | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
|||
| घुटने | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | Dermabacter hominis |
|||
| घुटने | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | ||||
| घुटने | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | Leifsonia एक्वाटिका |
|||
| हिप | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | ||||
| घुटने | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | ||||
| घुटने | अस्थिरता | नहीं | नहीं | ||||
| हिप | जीर्ण luxation | नहीं | नहीं | staphylococcus haemolyticus |
|||
| घुटने | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | ||||
| हिप | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | ||||
| हिप | रोकनेवाला ढीला | नहीं | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
|||
| घुटने | अस्थिरता | नहीं | नहीं | ||||
| घुटने | तीव्र संक्रमण | हाँ | हाँ | Pseudomonas aeruginosa | Pseudomonas aeruginosa | pseudomonas aeruginosa |
|
| घुटने | तीव्र संक्रमण | हाँ | नहीं | ई कोलाई |
ई कोलाई |
ई कोलाई |
|
| हिप | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | Corynebakterium एसपीपी. |
Staphlococcus epidermidis |
||
| घुटने | तीव्र संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस | Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस | Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस | staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस |
| घुटने | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | स्ट्रेप्टोकोकस agalacticae |
स्ट्रेप्टोकोकस agalacticae |
स्ट्रेप्टोकोकस agalacticae |
स्ट्रेप्टोकोकस agalacticae |
| हिप | जीर्ण संक्रमण | हाँ | हाँ | Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस | |||
| घुटने | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
|||
| घुटने | जीर्ण संक्रमण | हाँ | हाँ | Staphlococcu epidermidis |
Staphlococcus epidermidis |
||
| हिप | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
Staphlococcus epidermidis |
||
| घुटने | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
Coagulase-निगेटिव staphylococci |
Coagulase-निगेटिव staphylococci |
|
| हिप | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस | Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस | ||
| घुटने | तीव्र संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
Staphlococcus epidermidis |
Coagulase-निगेटिव staphylococci |
Coagulase-निगेटिव staphylococci |
| हिप | तीव्र संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
Coagulase-निगेटिव staphylococci |
||
| हिप | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
Staphlococcus epidermidis |
||
| हिप | तीव्र संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphlococcus epidermidis |
Coagulase-निगेटिव staphylococci |
||
| घुटने | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस | Staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस | staphylococcus स्ताफ्य्लोकोच्चुस |
|
| हिप | जीर्ण संक्रमण | हाँ | नहीं | Enterococcus faecialis |
Enterococcus faecialis |
Enterococcus एसपीपी. |
Enterococcus एसपीपी. |
| घुटने | जीर्ण संक्रमण | हाँ | हाँ | Enterocuccus faecalis |
Enterocuccus faecalis |
Enterococcus एसपीपी. |
Enterococcus एसपीपी. |
तालिका 1: रोगी विवरण और रोगजनकों का पता लगाया । रोगी विवरण के तालिका परिणाम, संशोधन सर्जरी के कारण सहित, MSIS मानदंड मिलान और पारंपरिक माइक्रोबायोलॉजी और NAAT विश्लेषण में पता चला रोगजनकों ।
| मापदंड | पीसीआर Sonicate | पीसीआर महाप्राण | परित हुई पीसीआर |
| P मान | ०.००३६ | ०.००१३ | ०.०००१ |
| संवेदनशीलता | ५०.०% | ५५.६% | ६६.७% |
| विशिष्टता | १००.०% | १००.०% | १००.०% |
| सकारात्मक पूर्वानुमानित मूल्य | १००.०% | १००.०% | १००.०% |
| ऋणात्मक पूर्वानुमानित मान | ५९.१% | ६१.९% | ६८.४% |
तालिका 2: सूक्ष्मजीवविज्ञानी विधियों के परिणाम. sonication द्रव, संयुक्त महाप्राण और परित पीसीआर के पीसीआर डायग्नोस्टिक के मूल्यांकन के तालिका परिणाम । n = 31 महाप्राण और sonication के लिए नमूना, क्रमशः, n = ६२ pooled पीसीआर डेटा के लिए ।
Discussion
विदेशी शरीर संक्रमण महंगा उपचार, लंबे समय से अस्पताल में भर्ती और प्रभावित जोड़ों के कार्यात्मक कमी के साथ आर्थोपेडिक और ट्रामा सर्जरी में एक उभरती हुई समस्या है । अवकलन डायग्नोस्टिक चुनौतीपूर्ण है । कई शोधकर्ता और चिकित्सकों इस विषय पर ध्यान दे रहे हैं, विदेशी शरीर से जुड़े संक्रमणों का निदान करने के लिए अधिक सटीक और विश्वसनीय तरीके खोजने का प्रयास कर रहे हैं । तिथि करने के लिए, कई अलग नैदानिक उपकरण मूल्यांकन किया जा रहा है और नैदानिक पथ३२में कार्यांवित ।
sonication प्रक्रिया एक अमूल्य विधि है, ऊतक नमूनों6से पारंपरिक संस्कृतियों की तुलना में एक बेहतर संवेदनशीलता दिखा । हमारे अध्ययन में, हमने दिखाया है कि sonication द्रव संस्कृतियों ६१.५% की एक विशिष्टता के साथ ८८.९% की एक संवेदनशीलता है । ऊतक नमूनों और संयुक्त tracheal से पारंपरिक संस्कृतियों दोनों ८२.३% और ८४.६%, क्रमशः की एक विशिष्टता के साथ ६६.७% की एक संवेदनशीलता थी । अन्य शोधकर्ताओं इन पारंपरिक सूक्ष्मजीवविज्ञानी प्रक्रियाओं के लिए समान परिणाम दिखाएँ6,३३,३४,३५. यह अक्सर आलोचना की है कि sonication प्रक्रिया संदूषण के लिए प्रवण है, तो विशेष देखभाल नमूनों की हैंडलिंग में लिया जाना चाहिए ।
ऊतक नमूनों या तरल पदार्थ में एक रोगज़नक़ के डीएनए का पता लगाने की संभावना पेचीदा है । नेट एक तेजी से प्रक्रिया है जो कुछ घंटों के भीतर परिणाम वितरित कर सकते हैं, के रूप में समय लेने वाली सूक्ष्मजीवविज्ञानी संस्कृति के तरीकों की तुलना में । शक के बिना, NAT रोगजनकों का पता लगाने में एक अच्छी संवेदनशीलता है, लेकिन संदूषण का पता लगाने के जोखिम को पकड़, इस प्रकार विशेष३६कमी । पजी निदान में इस पीसीआर तकनीक के महान लाभ विशेष रूप से रोगियों को जो एंटीबायोटिक थेरेपी सर्जरी के करीब प्राप्त या एक लंबी अवधि के लिए7,8में प्रलेखित किया गया था । अध्ययन का सुझाव है कि sonication द्रव की NAT आगे संवेदनशीलता और विशिष्टता३७बढ़ा सकते हैं । दुर्भाग्य से, इस तकनीक को नियमित रूप से प्रयोगशालाओं में उपलब्ध नहीं है, अपने समय लेने वाली कार्यप्रवाह के कारण ।
वहां पीसीआर तकनीक को सामांय में कुछ सीमाएं हैं: नेट व्यवहार्य और गैर व्यवहार्य बैक्टीरिया के बीच कोई भेदभाव के साथ डीएनए का पता लगाता है, परिणाम मुश्किल की व्याख्या कर रही है । ब्रॉड रेंज पीसीआर केवल राइबोसोमल 16S ribonucleic एसिड (16S rRNA) का पता लगाएगी, रोगजनकों के बीच अंतर नहीं होगा३७। अधिक विशिष्ट प्रणालियों को नियमित रूप से जीन इनकोडिंग एंटीबायोटिक प्रतिरोध मार्कर का पता लगाने नहीं है । एक लक्षित एंटीबायोटिक चिकित्सा इसलिए आगे संवेदनशीलता परीक्षण के बिना सीमित हो सकता है ।
इस अध्ययन में लागू प्रणाली इन सीमाओं में से कुछ पर काबू पाता है, विशिष्ट बैक्टीरिया और जीन इनकोडिंग प्रतिरोध मार्करों की पहचान के बीच अंतर । कुल मिलाकर, नेट परख एक तेज और उपयोगी पूरक के रूप में माना जा सकता है पजी7,8,9,३८पुष्टि ।
यह संयुक्त आकांक्षा में आगे की योजना और सर्जरी में आवश्यक है: नमूना कंटेनरों बाँझ और तैयार होना चाहिए, और शीघ्र नमूना परिवहन उपलब्ध होना चाहिए. सर्जनों की योजना बनाई प्रक्रियाओं पर अपने विज्ञानियों संक्षिप्त और क्या नमूना सामग्री की उंमीद करनी चाहिए । संयुक्त आकांक्षा जब प्रदर्शन, कड़ाई से बाँझ शर्तों सुनिश्चित किया जाना चाहिए, संयुक्त के iatrogenic संक्रमण को रोकने के लिए. वसा रोगियों में, संयुक्त पंचर चुनौतीपूर्ण हो सकता है, और fluoroscopic मार्गदर्शन सहायक हो सकता है । संशोधन संधिसंधान सर्जरी विशेषज्ञता का एक बहुत ही उच्च स्तर की आवश्यकता है, और केवल एक कुशल सर्जन द्वारा प्रदर्शन किया जाना चाहिए । Explanted सामग्री ऑपरेटिंग कमरे में आवश्यक से किसी भी अब नहीं रखा जाना चाहिए, लेकिन जितनी जल्दी हो सके सूक्ष्मजीव के लिए भेजा जा. इस प्रोटोकॉल के भीतर एक बहुत महत्वपूर्ण हिस्सा संदूषण के संभावित जोखिम है । न केवल नमूने जुटाने जबकि, लेकिन यह भी माइक्रोबायोलॉजी लैब में नमूनों को संभालने, सभी कर्मियों शामिल (आर्थोपेडिक सर्जन, नर्स, तकनीशियन, विज्ञानियों) जल्दी और सही ढंग से काम करना चाहिए, और प्रक्रियाओं में उचित प्रशिक्षण है.
Sonication और नेट प्रत्यारोपण जुड़े संक्रमण के निदान में मूल्यवान उपकरण हैं । फिर भी, परिणाम हमेशा सावधानी से पूछताछ की जानी चाहिए । हम आर्थोपेडिक सर्जन, विज्ञानियों और संक्रामक रोग विशेषज्ञों के एक दौर तालिका चर्चा में परिणाम पर चर्चा की सिफारिश, और पैथोलॉजिस्ट व्यक्तिगत चिकित्सीय रणनीति पर सहमत करने के लिए ।
पजी के नैदानिक पथ में इस तकनीक को लागू करने के लिए कई फायदे हो सकते हैं । यह एक परिणाम के साथ एक तेजी से नैदानिक घंटे के भीतर है । कई जीन इनकोडिंग प्रतिरोध मार्करों के विश्लेषण के कारण, एक लक्षित एंटीबायोटिक थेरेपी नैदानिक पाठ्यक्रम में एक बहुत ही प्रारंभिक चरण में जगह ले सकते हैं । एक पक्ष प्रभाव के रूप में, व्यापक रेंज एंटीबायोटिक्स संकेत है, जहां वे वास्तव में जरूरत है के लिए बचाया जा सकता है । अंय नमूना प्रकार (जैसे ऊतक नमूनों, झाड़ू, रक्तगुल्म, आदि) भी हमारे प्रोटोकॉल के अनुसार जांच की जा सकती है । चूंकि पीसीआर कारतूस एक बंद व्यवस्था है, कोई समस्या निवारण आवश्यक है या उपयोगकर्ता पक्ष पर संभव है । प्रोटोकॉल के किसी भी अनुकूलन निर्माता द्वारा कार्यांवित किया जाना चाहिए । सॉफ्टवेयर और हार्डवेयर (कारतूस) दोनों में परिवर्तन लगातार निर्माता द्वारा किए गए है प्रणाली को बढ़ाने, लेकिन कोई विवरण नए संस्करणों में सटीक परिवर्तन पर सार्वजनिक कर रहे हैं ।
Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
लेखक इस अध्ययन के समर्थन के लिए Curetis GmbH का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| sterile plastic container | Lock & Lock, Distributor ISI GmbH, Solingen, Germany | EAN 8803733184403 | Transport container for implants |
| Bactosonic 14.2 | Bactosonic, Bandelin, Berlin, Germany | 3290 | "Sonication machine" |
| 50ml Falcon tubes | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 352070 | Centrifugation |
| PEDS medium blood culture flasks | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 442194 | culture medium |
| Columbia agar with 5% sheep blood | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254071 | culture medium |
| Mac Conkey agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254078 | culture medium |
| chocolate agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254089 | culture medium |
| sabouraud agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254096 | culture medium |
| thioglycolate bouillon | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 221788 | culture medium |
| Schaedler agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254084 | culture medium |
| kanamycin/vancomycin agar | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 254077 | culture medium |
| Bactec FX blood culture system | Becton & Dickinson, Heidelberg, Germany | 441386/441385 | culture medium |
| Unyvero A50 Analyzer | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 60001 | PCR machine |
| Unyvero L4 Lysator | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 60002 | PCR machine |
| Unyvero C8 Cockpit | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 60003 | PCR machine |
| Unyvero M1 Masterix Tube | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 10002 | consumables PCR |
| Unyvero i60 ITI Cartridge | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 10040 | consumables PCR |
| Unyvero Sample Tube Cap | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 10004 | consumables PCR |
| Unyvero Sample Tube | Curetis, Holzgerlingen, Germany | 10003 | consumables PCR |
| S-Monovette 2.7ml | Sarstedt AG, Nümbrecht, Germany | 05.1729.001 | Transport container (aspirate) |
| scalpel typ 11 | pfm medical, Cologne, Germany | 200130011 | scalpel for stab incision |
| PP Container 70mL 55x45mm | Sarstedt AG, Nümbrecht, Germany | 759,922,721 | Transport container (tissue specimen) |
| Vicryl Plus | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany | VCP247H | surgical suture material |
| Prolene 0 | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany | EH7920H | surgical suture material |
| Prolene 2/0 | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Germany, Norderstedt, Germany | EH7697H | surgical suture material |
| Kodan Tinktur forte farblos | Schülke & Mayr GmbH, Norderstedt, Germany | 104005 | alcoholic skin disinfectant |
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