Summary
미세 회전 및 재생성된 실크 fibroin monofilament의 미세 특성화에 대 한 프로토콜 제공 됩니다.
Abstract
프로토콜 누의 회전 과정을 흉내 낸에 대 한 메서드를 보여 줍니다. 기본 회전 과정에서 계약 회전 덕트 실크 단백질을 콤팩트 하 고 전단 및 신장 힘에 의해 정렬 될 수 있습니다. 여기, biomimetic 미세 채널 누의 회전 덕트의 특정 기하학을 모방 하도록 설계 되었습니다. 재생성 된 실크 fibroin (RSF) 회전 높은 농도, 첨가 온도 압력에서 드라이 스핀 섬유 아닌 통해 돌출 했다. 사후 처리 과정에서로 냈 지 섬유 했다 그려지고 에탄올 용액에 저장 됩니다. 싱크 로트 론 방사선 광각 x 선 회절 (SR-WAXD) 기술은 RSF 섬유 축 x-레이의 microbeam에 샘플 홀더를 고정 하는 단일 RSF 섬유의 미세를 조사 하기 위해 사용 되었다. 화도, crystallite 크기 및 결정 방향 섬유의 WAXD 데이터에서 계산 했다. 2 차원 WAXD 패턴의 적도 근처 회절 호 사후 처리 RSF 섬유 높은 방향 정도 나타냅니다.
Introduction
거미 및 누 주위 온도 압력에서 수성 단백질 해결책에서 뛰어난 실크 섬유를 생산할 수 있다. 전단 및 extensional 흐름 실크 동맥1액정 텍스처의 형성을 유도할 수 있다. 최근 몇 년 동안, 고 강도 인공 섬유를 생산 하기 위해서는 거미의 회전 과정을 흉내 낸에 큰 관심이 되었습니다. 그러나, 거미 실크 단백질의 대량 수 없습니다 효율적이 고 경제적으로 의해 생산 농업 식인 풍습으로 인해 거미. 상당한 양의 누 실크는 농업에 의해 쉽게 얻어질 수 있다. 그렇지 않으면, 누와 거미 유사한 회전 과정과 아미노산 성분이 있다. 따라서 누 실크 fibroin 선택 대신 인공 동물 실크 스핀 많은 연구자에 의해.
거미 및 누에에서 섬유에 그들의 회전 덕트를 통해 단백질 해결책을 압출 성형. 가장 가능성이 회전 덕트를 따라 생성 높은 스트레스 힘 더 확장 구조2실크 fibroin 분자 스트레칭. 인공 실크 섬유 기존의 젖은 회전 및 회전 건조 프로세스3,4, 고려 하지 않는 사용 하 여 회전 된 유체 힘 회전 덕트에서 생성 된 계정.
첫째, 미세 접근 실크 단백질5,6의 어셈블리를 조사 하기 위해 사용 되었다. 다음, RSF의 미세 제조 전단 및 extensional 세력7,8모델링을 통해 연구 했다. 영의 계수 및 RSF 섬유의 직경이 미세 젖은 회전에 의해 조정 될 수 있다 하지만 그려진된 섬유의 인장 강도 100 MPa7. 마지막으로, 고 강도 RSF 섬유 미세 드라이 회전 메서드를 사용 하 여 성공적으로 준비 하지만 섬유의 직경은 2 µ m8만. 최근, 미세 젖은 회전 강도 재조합 거미 실크 섬유의 생산에서 성공적으로 사용 되었다. 공기에서 후 회전 그리기9인공 섬유 표면 및 내부 결함 개선.
이 연구에서는 향상 된 미세 회전 RSF 섬유에 대 한 과정 소개 된다. 그것은 회전 마약, 전단 세력, 그리고 드라이 회전 과정을 포함 하 여 누 실크 회전 과정을 모방 하는 것을 목표로. 이 회전 방법은 고 강도 인공 실크 섬유를 생산할 수 있다 뿐만 아니라 또한 섬유의 직경을 조정할 수 있습니다. 첫째, RSF 마약 회전 전단 이었고 두 번째 순서 지 수 감퇴와 biomimic 채널에 길쭉한. 둘째, 섬유 형태와 속성에 상대 습도 (RH)의 영향 미세 드라이 회전 과정10에서 공부 했다. 기존의 회전 spinneret에 비해, 우리의 미세 시스템 높은 생체 모방 이며 건조 하 여 주위 온도에 솔루션에서 고 강도 섬유를 생산 또는 회전 방법 젖은 사용할 수 있습니다.
때문에 고해상도, 고휘도, 고 에너지 싱크 로트 론 방사선 미소 초점 x 선의를 사용할 수 있습니다 몇 마이크로미터4,11 의 직경을 가진 단 하나 섬유의 미세 하 , 12 , 13 , 14. 여기, SR WAXD 기술은 화도, crystallite 크기 및 RSF 섬유의 결정 방향 계산에 사용 되었다.
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Protocol
주의: 사용 하기 전에 모든 관련 물질 안전 데이터 시트를 참조 하십시오. 성형을 준비에 사용 되는 화학 물질의 일부는 심하게 독성이 있습니다. 개인 보호 장비 (안전 안경, 장갑, 실험실 코트, 전장 바지 및 폐쇄 발가락 신발)를 사용 하십시오.
1. 미세 회전의 RSF 용액
- 16
- Degumming 누의
- Degum 누에나방 고치 나 2 CO 3 수성 솔루션 (물에 0.5 wt %)에 두 번 30 분 각, 100 ° C에서 누에고치 및 다음 제거 하는 이온된 수와 실크를 씻는 sericin.
- Dissolving 반죽 누 누에고치의
- 건조 한 공기에 반죽 누에고치 실크; 다음 9.0 M LiBr 수 용액 1:10 (w/v) 40 ° C에서 2 h의 비율에 반죽 누에고치 실크 분해. 예를 들어 1 그램 실크 ( 그림 1a) 당 10 mL LiBr 추가.
- Centrifuging와 필터링
- RSF 솔루션 1.5 배 이온을 제거 된 물에 의해 희석. 원심 분리기 및 불순물을 제거 하는 필터 1,234.8 x g.에서 10 분 원심 분리기 4 ° C에서 250 mL 병에 RSF 솔루션 RSF 솔루션 20 µ m 필터와 진공 펌프를 사용 하 여 필터링 합니다. 더블 필터 종이 침대는 실험 효과 고려 하는 것이 좋습니다.
- Dialyzing
- 룰 반 투과성 멤브레인을 사용 하 여 3 일 동안 5 ° C에서 이온된 수에 RSF 솔루션 Dialyze (MWCO: 14000 ± 2000). RSF 솔루션의 전체 볼륨은 약 1 L, 4 투 석 가방에 로드. 이 투 석 가방 양동이에 넣어는 10 L 역삼 투 (RO)으로 가득 저온.
참고: 이온된 수의 pH 값을 집중 과정에서 겔 화를 피하기 위해 6 보다 높아야 한다. 이 프로토콜에 대 한 이온된 수의 pH 조정을 요구 하지 않았다.
- 룰 반 투과성 멤브레인을 사용 하 여 3 일 동안 5 ° C에서 이온된 수에 RSF 솔루션 Dialyze (MWCO: 14000 ± 2000). RSF 솔루션의 전체 볼륨은 약 1 L, 4 투 석 가방에 로드. 이 투 석 가방 양동이에 넣어는 10 L 역삼 투 (RO)으로 가득 저온.
- 집중
- 응축 RSF 20 wt % 용액 5 ° C. 추가 3 M CaCl 2 수성 해결책에서 강제적인된 공기에 의해 1.0 mmol/g 캘리포니아 2 + 최종 농도; RSF 솔루션 다음 강제적인된 공기에 의해 집중 38-47 wt % 흐름.
- 유리 슬라이드에 한 방울 RSF 솔루션의 무게와 다음 오븐 105에서 2 h 동안 건조 ° c.
참고: 무게 백분율 남은 고체 단백질과 CaCl 2의 총 농도 건조 하기 전에 드롭의 무게에 비해. RSF 농도 CaCl 2의 질량의 공제 후 파생 됩니다. 적어도 4 개의 반복 측정 수행 했다. 우리의 이전 연구의 캘리포니아 2 + 농도 크게 유 변 학적 특성 및 RSF 수성 해결책의 spinnability 영향을 보여주었다. 한편, 캘리포니아 2 +의 추가 β 시트의 제한 형성과 RSF 17의 집계 라는 메시지가 나타납니다. 기본 회전 마약 CaCl 2 회전 하는 회전 하기 전에 겔 화를 피하기 위해 마약의 저장 하는 동안 중요 한 역할을 간주 됩니다. 18
- 포토 마스크를 준비
- 에 마이크로 채널을 디자인 한 CAD 프로그램입니다. 고해상도 투명도 19를 생산 하기 위해 CAD 파일 인쇄.
- 금형 준비
- 청소 유리 슬라이드
- 화학 후드에 끓인 뜨거운 접시에 집중된 한 황산의 혼합된 솔루션 및 30 vol % 과산화 수소 솔루션 (10:1) 20 분 동안 유리 슬라이드.
주의: 황산과 과산화 수소 증기는 매우 유독.
- 화학 후드에 끓인 뜨거운 접시에 집중된 한 황산의 혼합된 솔루션 및 30 vol % 과산화 수소 솔루션 (10:1) 20 분 동안 유리 슬라이드.
- 세척 유리 슬라이드
- 이온된 수를 사용 하 여 유리 슬라이드를 세척 하 고 건조 고 순도 질소로 불어.
- 코팅 필름
- SU-8 포토 레지스트 코팅 바의 아래쪽 면과 유리의 위 표면 사이 100 µ m의 간격으로 맞춤식 코팅 장치에 의해 유리 슬라이드에 코트.
- 스핀 코팅
- 30 40.3 x g에서 spin coater를 사용 하 여 균일 한 필름을 형성 하기 위하여 유리 슬라이드에 포토 레지스트를 확산 s. 균일 한 필름의 두께 약 85 µ m.
- 응고
- 프로그램 제어 온도 오븐에 포토 레지스트를 공고히. 실 온에서 2 ° C/min에서 65 ° C에 온도 상승 고 잡고 2 분 계속 65 ° C에서 열에 65 ° C ~ 95 ° C에서에서 누른 95 ° C 오븐과 멋진 15 분 회전에서 자연스럽 게 방 오븐에 온도.
- 자외선 빛 노출
- 노출 유리의 측 12 자외선에는 포토 레지스트와 슬라이드 사진 평판 19는 포토 마스크로 투명도 사용 하 여 s.
참고: 자외선의 wavenumber는 365 nm와 노출 에너지는 273.6 mJ/cm 2.
주의: UV 빛 및 오븐 작업 하는 동안 적절 한 안전 조치를 취할.
- 노출 유리의 측 12 자외선에는 포토 레지스트와 슬라이드 사진 평판 19는 포토 마스크로 투명도 사용 하 여 s.
- 1.2.2.5 단계에서 설명한 대로 포토 레지스트를 공고히.
- 개발
- 30 미 세척 소 프로 파 놀과 유리 슬라이드에 없습니다 강 수 있을 때까지 둘 사이 번갈아 하는 개발자에 의해 유리 슬라이드에 대 한 개발자 솔루션에 초음파 레지스트 청소.
- 프로그램 제어 온도 오븐에 포토 레지스트를 공고히. 실 온에서 2 ° C/min에서 170 ° C 온도 상승 하 고 170 ° C 오븐과 멋진 30 분 설정에서 자연스럽 게 실내 온도에 오븐을.
- 청소 유리 슬라이드
- 소프트 리소 그래피
- 형과 65 ° C에서 30 분 동안 치료 8.8 g 액체입니다 (PDMS) 사전 폴리머 붓는 고 80 ° C. 액체 PDMS 사전 폴리머에서 15 분 PDMS와 경화제 (10:1 (w/w))에서 일반적으로 이루어져 있다.
- 펀치
- 드릴 여 채널의 시작 부분에서 PDMS 복제를 통해 구멍을 펀치. 드릴의 직경은 1.2 m m.
- 씰링
- 두 PDMS 층의 표면에는 산소 플라즈마 처리에 의해 패턴 없이 평면 PDMS 레이어 채널 PDMS 복제 인감.
참고: 칩의 전반적인 준비 과정은 약 72 h.
- 두 PDMS 층의 표면에는 산소 플라즈마 처리에 의해 패턴 없이 평면 PDMS 레이어 채널 PDMS 복제 인감.
- 마약 회전의 주입
- 아닌 2 µ L/분으로 마약 주사기 펌프에 의해 회전 하는 RSF 주사.
- 환경 규제
- 조정 40 ± 5 상대 습도 RH % 또는 50 ± 5 가습기를 사용 하 여 RH %. 40 ± 5 RH에서 %로-돌 다 섬유 경화 50 ± 보다 더 빨리 5 RH %.
- 생산의 RSF 섬유
- 미세 채널의 출구에 정확 하 게에 의해 RSF 드롭 터치, RSF 섬유 공기, 그리고 다음 ( 그림 1b 3 cm/s의 속도로 10 cm 공기 차이 통해 롤러에 릴 ).
- 24 헤에 대 한 봉인된 desiccator에 RSF 섬유를 저장
- 섬유 후 처리
- 80 vol %ethano 0.9 m m s -1에서 4 번으로 늘인 섬유를 그릴사용자 컴퓨터 및 다음 계속 그려진된 섬유에 의해 l 솔루션 고정 하 고 1 시간에 대 한 솔루션에 섬유를 담가. 이 치료 때문에 섬유의 길이 60 m m로 원래 15 m m에서 변경 되었습니다.
- 특성화에 대 한 샘플 준비
- 10 mm 게이지 길이와 사후 처리 섬유 종이 프레임에 수정. 적어도 20 섬유 측정, 인장 시험, SEM, FTIR, WAXS에서 포함에 대 한 필요는. 이후 그려진된 섬유 범위 5에서 10 µ m. 그림 1의 직경의 섬유 생산 및 WAXD 특성화 회로도 보여준다. RSF 섬유의 기계적 성질 (25 ± 2) ° C 소재 테스트 시스템 및 (45 ± 5) % 상대 습도 의해 시험 되었다. 확장 속도 및 게이지 길이 2 mm/min와 1 ㎝를 각각 했다.
2. 싱크 로트 론 방사선 특성의 결정 구조의 RSF 섬유
- 싱크 로트 론 방사선 특성 4 , 13 , 17
- beamline
- 의 조정 조정 엑스레이 및 0.07746 nm을 2, 3 x 2 µ m 크기의 파장 각각.
참고: 프로토콜 BL15U1 beamline 상해 싱크 로트 론 방사선 시설에서 사용 하 여 수행 됩니다.
- 의 조정 조정 엑스레이 및 0.07746 nm을 2, 3 x 2 µ m 크기의 파장 각각.
- X 선 스팟의 위치
- x 선 스팟의 위치 찾기.
참고: x 선 스팟의 위치는 싱크 로트 론 방사선 시설에서 실험실 기술자에 의해 조정 됩니다.
- x 선 스팟의 위치 찾기.
- 표준 샘플의 테스트: 세 륨 산화물 (CeO 2)
- 표준 샘플 CeO 2 분말을 테스트. 원 센터와 검출기에는 샘플에서 거리를 계산 하기 위해 CeO 2 분말 특징 이었다.
- 샘플 준비
- 10mm 게이지 길이 종이 프레임에 서로 병행에서 RSF 필 라 멘 트를 수정. 테스트 단계에 종이 프레임 접착제.
참고: 섬유를 수평 유지.
- 10mm 게이지 길이 종이 프레임에 서로 병행에서 RSF 필 라 멘 트를 수정. 테스트 단계에 종이 프레임 접착제.
- SR WAXD 테스트
- 셔터를 열고
- 방에 아무 사람은 확인 후 beamline 역의 문을 닫습니다. X 선 빔 소스의 셔터를 열고.
- 초점
- 초점에 때까지 약간 섬유를 이동. X, y, z 방향 ( 그림 1c) 소프트웨어를 통해 원격으로 섬유의 위치 조정.
- 노출 샘플
- 이동 섬유 아래로 원격으로 소프트웨어를 통해 때까지 x 선 자리에. 20 x 선 beamline에 섬유를 노출 하는 소프트웨어에 시작 버튼을 누르면 s ( 그림 1c).
- 회절 배경
- 테스트는 소프트웨어를 통해 원격으로 20 s. 이동 x 선 자리에서 섬유의 노출 시간 공기 배경의 회절. 보도 " 시작 "에 x 선 beamline 노출 소프트웨어에 단추 " 공기 매체 " 20 s.
- 셔터를 열고
- beamline
- SR WAXD 데이터 처리 13
- 소프트웨어 보정
- FIT2D (V12.077)를 사용 하 여 WAXD 데이터 처리. 원 센터와 샘플-검출기-CeO 2 분말의 회절 데이터를 사용 하 여 거리를 보정.
- 2 차원 회절 패턴
- FIT2D (V12.077)를 사용 하 여 섬유 회절 패턴에서 공기 배경 빼기.
- 화도 및 crystallite 크기
- 산란 각도 2θ의 기능으로 회절 강도 통합. 자동된 피크 분리 소프트웨어 (버전 4.12) 12 deconvolution 강도 통합을 수행 합니다. 화도, c, x의 정도 관계에서 추정 되었다:
, 어디 내가 c 결정 봉우리와의 통합된 강렬의 합계는 비정 질 헤일로 4 , 11의 통합된 강도 이다. WAXD 패턴의 통합 [200]의 피크 폭을 보여주었다, [020], [002] 반사. 이 봉우리의 FWHM 따라 crystallite 크기를 결정 하는 데 사용 했다는 a, b 및 c 축 Scherrer를 사용 하 여 ' s 수식 4.
- 산란 각도 2θ의 기능으로 회절 강도 통합. 자동된 피크 분리 소프트웨어 (버전 4.12) 12 deconvolution 강도 통합을 수행 합니다. 화도, c, x의 정도 관계에서 추정 되었다:
- Crystallite 방향 결정
- 는 crystallite의 방향을 계산 하 고 비정 질 (020)의 방위 통합 및 (210) 봉우리 11. 결정 방향 허먼 따라 양적으로 계산할 수 있다 ' s 방향. 여기, 모두 (020) 및 (210) 봉우리 두 가우스 기능을 장착 했다. 좁은 한 결정 방향 이며 다른 광범위 한 지향된 비정 질 소재 13입니다. 여기, RSF 섬유의 crystallite 방향 방위 통합 (002) 피크의 절반 최대 (FWHM)에 전체 너비를 사용 하 여 비교 했다.
- 소프트웨어 보정
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Representative Results
고 강도 RSF 섬유 미세 회전 메서드를 사용 하 여 성공적으로 생산 되었다. 응력-변형 곡선 및 뻗어 RSF 섬유 C44R40의 SEM 이미지는 그림 2에 표시 됩니다. 적어도 10 섬유는 인장 시험에서 측정 되었다. 응력-변형 곡선 섬유의 주요 스트레스와 긴장의 평균 값에 따라 선택 되었다. 섬유의 WAXD 데이터는 그림 3에 나와 있습니다. 화도 및 결정 방향 WAXD 데이터에 따라 계산 했다. 샘플 지정 사용 하 여 C와 R 회전 마약 및 상대 습도에 RSF의 농도 각각 제시. 예를 들어 섬유 40 ± 5% RH 4의 무승부로 비에 그린 후 C44R40으로 지정 되었다 44 wt %RSF 회전 마약에서 냈 지. 다른 섬유는 같은 설명에 따라 C44R50, C47R40, 및 C47R50로 변경 했다.
그림 1: 섬유 생산 및 구조 특성화의 도식. (한) 준비의 RSF 솔루션, (b) 미세 회전 RSF 단일 섬유의 (c) 싱크 로트 론 방사선 실험 설치 RSF 섬유의 과정. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: 후 처리 RSF 섬유의 응력-변형 곡선. C44R40의 쇼 SEM 이미지를 삽입 합니다. 눈금 막대 = 10 µ m. 이 그림10에서 수정 되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: 사후 처리 RSF 섬유의 WAXD SR 데이터. (A) 2 차원 WAXD 패턴 후 치료 RSF의 단일 섬유: (한) C44R40, (b) C44R50, (c) (d) C47R50, C47R40 및 (B) 반죽 B. 모리 실크; (C) 1 차원 WAXD 데이터의 사후 RSF 섬유를 취급 하 고 (D) 피크 deconvolution에서 수행한 B. 모리 실크 반죽. 이 그림은 참조10에서 수정 되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
RSF 솔루션의 투 석 동안 pH 값이 다음 농도 과정에 대 한 중요 합니다. 이온된 수의 pH 값이 6 보다 작은, RSF 솔루션 집중 과정에서 젤 쉬울 것 이다. 겔 화를 피하기 위해, CaCl2 RSF 솔루션에 추가 됩니다. CaCl2 의 농도 1 mmol RSF의 무게 당.
우리의 이전 작품의 미세 드라이-8RSF 수성 해결책 가능성을 보여주었다. 미세 채널의 형상을 단순화 된 단일 단계 지 수 함수를 했다. 거미 및 누, 회전 진한 액체 섬유 형성1,20전에 2 단계 지 수 회귀 회전 덕트를 통해 아래로 추첨을 했다. 여기, 미세 채널 형상 누 회전 덕트1의 두 번째 순서 지 수 감퇴 기능을 흉내 낸에 의해 설계 되었습니다. Microfluidic 채널의 폭 265 µ m의 터미널 폭 2,065 µ m의 초기 폭에서 감소와 신장 채널의 길이 21.5 m m. 이전 기사에서 그려진된 RSF 섬유의 직경 2 µ m 이었다. 따라서, RSF 스레드 번들 기계 테스트 및 구조 특성화8사용 했다.
실험은 RSF 집중력과 상대 습도 영향을 지름 및 회전 건조 과정에서 RSF 섬유의 미세 보여줍니다. RSF 섬유 40 %RH 늘인 큰 직경 50 %RH 회전 하는 섬유 보다 더 많은 결정 구조를 보여 줍니다. 그러나, 50 %RH 냈 지 섬유 40 %RH 냈 지 보다 더 높은 결정 방향이 있다. 결과 다른 humidities에서 물의 증발 속도 관련이 있을 수 있습니다. 40 %RH 물의 높은 증발 속도 intramolecular 상호 작용을 향상 하 고 단단한 실크 섬유를 졸-겔에서 실크 fibroin의 빠른 상전이 용이 하 게. 더 낮은 증발 비율 50 %RH 물 잔류물 물 응고 섬유의 높은 콘텐츠를 이끌어 낸다. 작은 분자 윤활제로 물 실크 fibroin 방향을 용이 하 게 하 고 미세한 섬유를 늘여를 부분적으로 응고 섬유를 만드는. 이 과정은 물 기본 회전 과정 실크 섬유의 형성에 영향을 어떻게 이해 하는 데 도움이 됩니다.
사후 처리 RSF 섬유의 기계적 성질 반죽 실크4보다 더 있습니다. 후 처리, 후 섬유의 crystallinities 대폭 증가 했다. 사후 처리 RSF 섬유의 FWHM로 냈 지 섬유 보다 작습니다. 그것은 그 후 처리 향상 정자 섬유 축 방향을 나타냅니다. 그러나, 후 처리 과정의 복잡성 RSF 고 강도 섬유의 대량 생산을 제한합니다.
기존의 spinneret에 비해, 미세 채널은 천연 실크 동맥의 형상을 모방 하는 데 적합 합니다. 한편, 미세 회전 뛰어난 기계적 특성9재조합 거미 실크를 생산 하기 위해 사용 되었다. 전단 및 elongational 섹션은 어셈블리와 단백질 분자와 소의 방향을 유도 하 미세 회전 칩에 통합 했다. 따라서, 미세 회전 높은-성능 동물 실크의 생산 뿐만 아니라 솔루션에서 다른 합성 섬유에 유망 하다. 그러나, 미세 회전 방법만 단일 필 라 멘 트를 생산할 수 있는 그리고 그것은 인공 섬유의 높은 생산을 감당할 수 없습니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
이 작품은 주최 국립 자연 과학 재단의 중국 (21674018), 국가 핵심 연구 및 중국의 개발 프로그램 (2016YFA0201702 /2016YFA0201700), 그리고 "Shuguang 프로그램" 상하이 교육 개발 지원 재단과 상하이 시 교육 위원회 (15SG30), 상해시 영 교수 프로그램 (A201302), 중앙 대학 및 111 프로젝트 (No.111-2-04)에 대 한 근본적인 연구 자금을 구별.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| B. mori Cocoons | Farmer in Tongxiang, Zhejiang Province, China | ||
| Sodium carbonate, anhydrous, 99.8% | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd., China | Analytically Pure | |
| Lithium bromide, 99.1% | Shanghai China Lithium Industrial Co., Ltd., China | Analytically Pure | |
| Calcium chloride, anhydrous, 96.0% | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd., China | Analytically Pure | |
| Ethanol, anhydrous, 99.7% | Sinopharm Group Chemical Reagent Co.,Ltd., China | 10009218 | Analytically Pure |
| SU-8 photoresist | MicroChem Corp., USA | ||
| Developing solution | MicroChem Corp., USA | ||
| Sylgard 184 | Dow Corning, USA | ||
| Isopropanol | Shanghai Lingfeng Chemical Reagent Co., Ltd., China | Analytically Pure | |
| Concentrated sulfuric acid | Pinghu Chemical Reagent Factory, China | Analytically Pure | |
| 30 vol% hydrogen peroxide | Shanghai Jinlu Chemical reagent Co., Ltd., China | Analytically Pure | |
| Acetone | Shanghai Zhengxing Chemical Reagent Factory, China | Analytically Pure | |
| Oxygen plasma treatment | DT-01, Suzhou Omega Machinery Electronic Technology Co., Ltd., China | ||
| Syringe pump | KD Scientific, USA | KDS 200P | |
| Humidifier | SEN electric | ||
| Driller | Hangzhou Bo Yang Machinery Co., Ltd., China | bench drilling machine Z406c | |
| Material testing system | Instron, USA | Model: 5565 | |
| PeakFit | Systat Software, Inc., USA | Version 4.12 |
References
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