Summary
이 문서에서는 유전자 조작된 췌장암 쥐에서 고해상도 초음파의 활용. 기본 목표 탐지 및 내 인 성 췌 장 종양의 평가 대 한 자세한 지침을 제공 하는.
Abstract
LSL-KraG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; Pdx-1-Cre (KPC) 마우스 모델 췌장암에서 소설 치료 평가를 설립 하 고 자주 사용 유전자 변형 모델을 나타냅니다. 종양 발병 8 주 몇 달 사이 섹 모델 변수입니다. 따라서, 비-침략 적 이미징 도구는 화면 종양 발병 및 치료에 대 한 모니터 해야 합니다. 이 문제를 해결 하려면 다른 접근은 지난 년 동안 등장 했습니다. 고해상도 초음파 비 침해, 빠른 세션 시간 및 방사선 노출 없이 높은 이미지 해상도 같은 주요 장점이 있습니다. 그러나, 쥐에서 초음파 사소한 하 고 충분 한 해부학 지식을 이며 실용적인 기술을 성공적으로 전 임상 췌장암 모델에서 고해상도 초음파를 수행 하는 데 필요한. 다음 문서와 함께 내 생 췌장암 모델에 특히 초점 murine 모델에서 복 부 초음파에 대 한 자세한 체험 가이드 제공 됩니다. 또한, 일반적인 실수 및 그들을 피하기 위해 방법의 요약을 제공 합니다.
Introduction
유전자 조작된 마우스 모델 연구 밀접 하 게 인간의 발암1,2,3의 복잡 한 성격을 정리 하는 능력 때문에 증가 중요성을 얻고 있다. 하나는 가장 자주 췌장암 개발 연구 모델을 사용, 진행 및 치료 응답 종양 억제기 p534의 비활성화와 결합 하는 Kra oncogene에서 활성화 돌연변이 의해 특징입니다. 이 LSL KraG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; Pdx-1-Cre (KPC) 마우스 모델 모방 침략 암 전 침략 적인 췌 장 intraepithelial neoplasia (PanIN) 병 변에서 단계별 진행. Phenotypically, 거의 모든 마우스는 출산 후 첫 6 개월 이내 PDAC를 개발. 그러나, 섹 모델 몇 개월4주 8에서 높은 변수 종양 발병을 밝혀 이식된 모델에 비해. 췌 장 종양에 도달 특정 크기 (지름 5-9 m m), 종양의 성장을 빠르게 가속 및 마우스5전 임상 시험 등록 해야 합니다. 따라서, 종양 발병 및 종양 크기의 정확한 탐지 물류 전 임상 연구 및 치료 모니터링에 대 한 필수적인 전제 조건입니다. 일반적으로, 몇 가지 방법을 같은 자기 공명 영상 (MRI)6,7,,89 또는 고해상도 초음파 단층 종양 검사 실시를 채택 될 수 있다 고 치료10. 각 기술은 그것의 장점과 단점이 있다. 비록 MRI-컴퓨터 단층 촬영 (CT) 또는-이미징 고해상도 데이터 수집 뿐만 아니라 정확한 볼륨 계산, 일반 진정에서 장시간된 시험 시간을 허용 하 고 매우 비싼 장비 필요, 그리고 자주 허용 하지 않습니다 시간의 긴 기간 동안 스캔. 대조적으로, 작은 동물 초음파 쥐11복 부 병 리에 대 한 화면을 사용할 수 있는 설정된 방법입니다. 이미징이 방법의 장점은 짧은 시간, 높은 해상도, 스캔 그리고 도플러 초음파 또는 대비 사용 가능성 향상 된 동시에 장기의 관류를 시각화 하기 위해 초음파 (CEUS). 그러나, 해 부 지식, 3D 상상력과 철저 한 실습은 올바른 이미지 해석 필요 합니다.
다음 문서에서 섹 모델에서 고해상도 초음파를 이용 하 여에 대 한 상세한 프로토콜 제공 됩니다. 또한, 표준 초음파 이미지 묘사 되며 조사에 대 한 오리엔테이션을 촉진 하기 위하여 기관 구조와 분류.
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Protocol
이 프로토콜은 대학 의료 센터 괴팅겐, 독일 (33.9-42502-04-15/2056)에서 동물 보호 지침. 개별 동물의 특정 요구 사항에 따라 검토 보드, 일부 프로토콜 단계에 따라 수정할 수 있습니다.
1. 복 부 촉진 KPC 마우스의
- 피하기 위해 불필요 한 초음파 검사, 식별 수도 아마도 intraabdominal 병 변 고 이후에 복 부 초음파 검사를 받아야 한다 쥐 마우스 복 부를 만져.
- KPC 마우스 모델에서 나이의 8 주 이상 복 부 촉진 주간 시작을 수행 합니다. 고해상도 초음파 또한 이식된 종양 모델 (예를 들어, orthotopics) 또는 다른 유전자 조작된 마우스 모델에 적용할 수 있습니다.
참고: 종양 활동 및 연구 목표 (예방 연구, 치료 개입 연구)에 따라 매우 작은 종양 (1-2 m m)의 탐지는 모니터 종양 발병 가능 종양 palpated 수 있습니다 전에.
- KPC 마우스 모델에서 나이의 8 주 이상 복 부 촉진 주간 시작을 수행 합니다. 고해상도 초음파 또한 이식된 종양 모델 (예를 들어, orthotopics) 또는 다른 유전자 조작된 마우스 모델에 적용할 수 있습니다.
- 감 금 소에 마우스를 놓고 부드럽게 마우스 꼬리 리프트 하 고 부드럽게 인덱스와 비-고정 손 (그림 1)의 엄지를 위아래로 이동 하 여 복 부를 만져.
- 마우스는 부드러운 촉진 허용, 천천히 압력을 증가 하 여 진행 합니다. 더 큰 저항 위와 더 낮은 복 부에 쉽게 검색할 수 있습니다. 가끔, 하드 배설물 해석 될 수 있습니다 실수로 종양으로 질량.
2입니다. 준비 작업 공간
- 적어도 3 명의 다른 작업 단위에 대 한 공간을 제공: 사전 검사 영역, 단계 및 복구 케이지를 스캔. 필요한 자료는 그림 2에 묘사 된다.
- 주요 작업 플레이트 청소 (예를 들어 70%와 에탄올) 난방 플랫폼 (그림 3) 스캔 이전에 전환. 38-40 ° C의 목표 온도 도달 하면 첫 번째 마우스 전송 하기 전에 다는 것을 확인 하십시오.
- 초음파 기계에 스위치와 인수 데이터 (그림 4)에 대 한 새 폴더를 만듭니다. 복 부 영상 B 모드 설정이 적용 됩니다. 또한, 복 부 변환기 컴퓨터의 활성 포트에 연결 되어 확인 하십시오. 시스템을 장착 하는 변환기를 사용 하 여 작업 단계의 상단에 변형기 머리를 수정.
- 난방 격판덮개 또는 열 매트 (또는 사용 난방 램프) 포스트 절차 체온 조절 및 스캔된 마우스의 신속한 복구를 보장 하기 위해 복구 케이지를 준비. (그림 5)는 질 식의 위험으로 침구의 열망을 피하기 위해이 장의 하단에 쿠션으로 직물의 얇은 레이어를 넣어.
3. 흡입 마 취
- 유도 챔버로 마우스를 넣어 진행 합니다. 가스 캐리어 흐름 (1 L/min 산소 또는 공기) 밸브 열고 isoflurane 농도 4% 유도 챔버의 천천히 증가 채도 수 있도록 설정 합니다. 그 자리에는 적절 한 isoflurane 청소 (수동 또는 능동 필터링) 다는 것을 확인 하십시오. 약 2-4 분 후 마우스는 깊은 진정의 밑에 일반적으로 있을 것입니다.
- 원뿔을 통해 2 %isoflurane 작업 단계에 투여 하 여 진정 작용을 유지 합니다.
- 조심 스럽게 작업 단계로 유도 챔버에서 동물 전송. 코 콘 일정 가스 흐름에 대 한 확인 하십시오. 마 취 선 콘센트의 원뿔에 마우스 주 둥이 넣어. 초기 검색에 대 한 일반적인 위치는 부정사 위치가입니다. 마우스 췌 장 머리 또는 꼬리 종양 (그림 6)의 가시성을 개선 하기 위해 오른쪽 또는 왼쪽에 배치할 수 있습니다.
- 복 부 초음파 고통 스러운 라기보다는, 고통 무료 조건 및 깊은 마 취 상태에 대 한 지표로 서 발 꼬 집 음 시험을 수행 합니다. 마우스는 여전히 활성 또는 적극적으로 주위를 움직이고, 다시 옮긴 다 동물 반복 및 장기간 유도 위한 유도 실에서 다시.
- 눈 보호 연 고를 사용 하 여 액체 손실로 인해 각 막 부상을 방지 하기 위해.
- 마 취 동안 모니터링 시스템을 사용 합니다. 그러나, ECG 및 직장 온도 사용 되지 않습니다 정기적으로 복 부 초음파 검사. 중요 한 것은, 쥐 취 thermoregulate 수가 잃게됩니다. 따라서, 저체온증 이나 호흡 곤란 허 걱 등 가사에 대 한 임상 증상 관찰 밀접 하 게. 경우 어떤 증상 즉시 명백한 중지 isoflurane 장소와 복구 장에 마우스입니다.
4. 초음파 설정
- 제조업체의 지침에 설명 된 대로 초음파 시스템에 전환 합니다. 기본 설정은 활성화 복 패키지와 함께 일반 영상에 넣어 다는 것을 확인 하십시오. 일반적으로 B-모드-영상 표준으로 서 데이터 수집에 사용 됩니다.
- 다음 매개 변수 최적화 된 이미지 품질을 달성: 주파수 40 MHz, 2D 이득 25-30 dB, 이미지 깊이 10 m m, 이미지 폭 10 m m, 3-6 m m 사이 센터 3 초점 영역.
5. 마우스 준비
- 위와 더 낮은 말단 접착 테이프를 사용 하 여 수정 합니다. 때문에 고정 (그림 7) 동물에 어떤 부상을 피하기 위해 최대한 주의 해야 합니다.
- 전자 애완 동물 클리퍼 스를 사용 하 여 모든 복 부 털을 제거 합니다. 모피 텍스처 때문에 흉 곽까지 더 낮은 복 부에서 시작 합니다. 이 지역에 있는 피부 상해를 피하기 위해 프로세스 xiphoideus 에 주의.
참고: 마우스 모피 초음파 파도 반영 하 고 가시성을 감소 시킵니다. - Depilatory 크림을 사용 하 여 수행 하는 최적화 된 피부 준비 및 모피의 완전 한 제거. 코 튼 팁 (그림 8)를 사용 하 여 면도 복 부에 크림의 얇은 레이어를 관리 합니다. 뒤에 모든 잔재 (그림 9, 그림 10, 그림 11)를 완전히 제거 하는 물을 충분히 건조 조직 (후 30 s 나중에 따라 또는 사용 하는 크림) 크림을 제거 합니다. 크림 나머지 초음파 후 피부와 점 막 자극을 일으킬 수 있는 고 따라서 건강에 영향을 미칠 수 있습니다.
- 적절 한 검색 되도록 조건 (그림 12) 복 부에 초음파 젤 많이 적용 됩니다. 일반적으로, 따뜻한 초음파 젤 마우스에 대 한 저체온증을 최소화 하기 위해 사용 됩니다.
- 직접 변환기 머리에 초음파 젤의 얇은 층을 적용. 노치 변환기 끝에 감동 하 여 테스트를 수행 합니다. 화면에서 상단 왼쪽에 신호 변환기가 올바르게 배치 하는 경우를 볼 수 있습니다.
6. 복 부 초음파
- 확고 한 압력을 사용 하 여 복 부에 변환기를 조정 합니다. 무거운 압축 마우스 복 부의 호흡 또는 혈액 순환 장애를 발생할 수 있습니다 하 고 피해 야 한다.
- 아래로 검색 합니다. 작업 플랫폼 및 x 축과 y 축에 대 한 바퀴의 프레임을 조정 합니다.
- 첫 번째 단계로 두 신장 식별 합니다. 일반적으로 그들은 낮은 복 부에 균질 성 구조를 hyperechogenic로 나타납니다. 연결 된 베 나 renalis 찾을 수 있습니다 쉽게 더 베 나 정 맥 열 등 (그림 13)에 이르게.
- 획기적인 혈관 베 나 lienalis 역할을 사용 하 여 췌 장에 대 한. 베 나 renalis 와 베 나 lienalis를 구별 하려고 합니다. 베 나 lienalis 의 검출 시 췌 정확 하 게 지역화할 수 있습니다. 정상 췌 오히려 멤브레인 (그림 14 와 그림 15) 고체 구조 보다 복 부 구멍을 통해 확산입니다.
7. 췌 장 종양 탐지 및 볼륨 평가
- 모든 주변 구조에서 췌 장 병 변 식별 합니다. 그들은 일반적으로 hypoechoic 휘도가 원형 또는 길쭉한 조직 질량 (그림 16)으로 표시 됩니다. 종양 보통 회사 이며 거의 스캔 헤드에 의해 압축 될 수 있습니다. 참고, 때때로 종양 및 작은 창 자 루프 사이 명확 하 게 구별 하기 힘들 수도. 췌 장 종양에서 관찰 하지 한다 창 자 연동에 주의.
- 에 종양 감지 화면 위쪽 및 아래쪽을 전체 크기의 인상을 가져오고 초음파 캘리퍼스를 사용 하 여 큰 직경을 측정. 적당 한 이미지를 발견 되 면 화면을 고정 하 고 측정 도구를 사용 하 여 종양 크기를 정확 하 게 결정. 참고, 나중을 위해 꼬리, 몸 또는 췌 장의 머리에 종양 지역화 여부를 차별화 하는 것이 중요할 것 이다.
- 라이브 모드를 다시 변경 하기 전에 작업을 기록 하는 사진을 저장 해야 합니다. Note, 조정 바퀴를 출시 하 고 초음파 프로브 마우스 복 부를 누르면 더욱 그럴 수 있습니다 이미지를 고정 하는 동안 따라서, 동결 모드를 변경 하기 전에 압축 조정 수정.
- 첫 비행기의 측정을 완료 한 후 경도 위치 (그림 17)에서 90 °에 의해 스캔 헤드를 회전 하거나 종양의 경도 확장을 검색 하는 쪽으로 마우스를 설정 합니다. 일부 종양 적절 한 가시성에 대 한 마우스의 위치를 변경 해야 합니다. 췌 장 꼬리 종양에 대 한 마우스 췌 장 머리 종양의 왼쪽 (그림 11 및 그림 20)에 대 한 (그림 10 과 그림 19), 그것의 오른쪽에 배치 수 있습니다.
8입니다. 종양 볼륨의 정량화
참고: 모든 노력을 하나의 주요 목표는 종양 볼륨의 정확한 결심 이다. 사용할 수 있는 몇 가지 기술이 있다는 타원 면의 수식을 포함 하는 계산 방법 이지만 대학 의료 센터 괴팅겐에서 선호 합니다.
- 모든 3 개의 이전 취득 직경 있습니다 해당 종양 (그림 21)의 대략적인 양을 계산 합니다.
- 또는, 스캔 머리의 모터 시스템을 사용 하 여 후속 볼륨 계산 및 3 차원 재구성 종양의 자동된 검색을 수행 하.
9입니다. 복구
- 스캔, 후 신중 하 게 모든 접착 테이프를 제거 하 고 신중 하 게 모든 초음파 젤을 제거 건조 조직으로.
- 조심 스럽게 복구 ( 그림 21)으로 마우스를 전송 합니다. 호흡기 장애를 발생할 수 있습니다 mouse´s 얼굴에 어떤 덮 음 조직을 하지 마십시오. 복구에 대 한 측면 위치 기본 설정 해야 합니다.
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Representative Results
초음파 이미징 인간의 질병의 murine 모델에 몇 가지 문제를 해결 하는 데 사용 되는 다양 하 고 비-침략 적 기술입니다. 모든 다른 이미징 접근 주요 장점에 비해 높은 처리량, 비용 효율, 짧은 획득 시간과 실시간 이미징 있습니다. 그러나,이 도구는 정확 하 고 높은 품질의 이미지를 생성 하는 전문 지식이 필요 합니다. 원치 않는 유물 경우 특히 적어도 일부 경험 초음파 이미징 일반적으로 매우 도움이 됩니다. 췌장암에 관하여이 도구는 종양 발병, 진행 및 치료에 응답을 결정 수 있습니다. 또한, 다른 직경의 측정으로 그것 시간이 지남에 종양 볼륨의 정확한 정량화를 허용합니다. 이 연구는 보여줍니다과 유전자 조작된 마우스 모델에서 췌장암에 대 한 고해상도 초음파 영상 검사 도구로 사용 하는 방법을 자세하게에서 설명 합니다.
그림 1 : 복 부 촉진. 부드럽게 손을 고정 아닌 고정 손을 부드럽게 아래로 이동 하 여 절차를 시작 하는 동안 꼬리를 당긴 다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2 : 미리 모든 필요한 항목의 개요와 지역 검색. 피부 소독 (1), 거 즈 스폰지 (2), 70% 소 프로 파 놀 (3) 초음파 젤 유리 장 (4), 안과 연 고 (5), 티슈 물티슈 (6), 의료 테이프 (7), 물 컨테이너 (8), 애완 동물 클리퍼 스 (9) depilatory 크림 작은 컨테이너 (10), 코 튼 팁 적용 눈 연 고 또는 초음파 젤 (11). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3 : Isoflurane 기화와 지역 검색. 조정 가능한 프로브 홀더 (1), 유도 챔버 (2) isoflurane 기화 기 (3)를 포함 하 여 작업 단계. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4 : 초음파 장치. 초음파 시스템은 3 개의 초음파 프로브 및 해당 포트 함께 제공 됩니다. 키보드와 마우스 PC 시스템에 포함 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5 : 복구 케이지. 감 금 소의 바닥은 얇은 조직으로 준비 하 고 미리 스캔 절차 후 충분 한 난방 수 있도록가 열. 온도 섭씨 (° C)에 표시 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 6 : 작업 단계에 고정된 마우스. 마우스는 작업 단계에는 부정사 위치에 배치 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 7 : 애완 동물 클리퍼 스를 사용 하 여 후 면도 마우스. 복 부 털 컷, 하지만 머리의 작은 부분을 정기적으로 유물을 일으킬 유지. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 8 : Depilatory 크림의 사용. 복 부의 면도 영역에 depilatory 크림의 얇은 레이어를 관리 합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 9 : 마우스의 완전히 면도 복 부. 물을 충분히 모든 크림 잔재를 씻어 하는 데 사용 됩니다, 그리고 모피의 완전 한 제거만 최적의 스캐닝 절차를 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 10 : 마우스의 오른쪽. 췌 장 꼬리 종양 스캔에 대 한 최적의 방향입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 11 : 마우스의 왼쪽. 췌 장 머리 종양 스캔에 대 한 최적의 방향입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 12 : 마우스 복 부에 초음파 프로브. 방지 하기 위해 마우스를 어떤 상해 든 지 너무 많은 압력을 사용 하지 마십시오. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 13 : 부분 오른쪽 복 부의 초음파 이미지 복 부 대동맥 및 열 등 한 베 나 정 맥 같은 구조에 있는 주요 선박 신장 및 간 닫습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 14 : 왼쪽된 복 부 부분의 초음파 이미지 왼쪽된 신장, 비장 사이의 췌 장의 막 구조는, 랜드마크로 베 나 lienalis 기관 (노란색 화살표)를 통해 실행 되 고 기본 구조로 사용할 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 15 : 췌 장의 경계. (내용)으로 복 부 췌 장 (노란색 화살표)의 왼쪽된 테두리를 표시합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 16 : 식별 췌 장 종양. 라운드 췌 장 종양을 나타나는 hypodense 부정사 위치, 화살표는 주변 정상 조직에의 테두리를 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 17 : 경도 위치. 췌 장 종양의 길이 결정합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 18 : 췌 장 종양의 경도 검사. 공기에 의해 발생 하는 간섭 십이지를 가득 합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 19 : 마우스의 오른쪽: 종양이 췌 장 꼬리 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 20 : 마우스의 왼쪽: 췌 장 머리 종양 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 21 : 종양 볼륨 정량화. 이전 표시 된 두 개의 검사 위치에서 모든 3 개의 직경의 취득, 후 볼륨 계산을 수행 합니다. 따라서,는 타원 면의 공식은 사용 된다: 4/3 π/2 * b/2 * c/2. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 22 : 복구. 완전히 복구 될 때까지 난방 격판덮개 전송 동물 검색 후 마우스의 눈에서 흰 눈 연 고 통지. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
이 프로토콜, 췌 장 종양 유전자 조작된 마우스 모델에서 고해상도 복 부 초음파 이미징 사용 하 여 측정에 대 한 자세한 설명을 제공 합니다. 최근, Sastra 외. 췌 장 종양 마우스 모델, 하지만 준비 및 모든 추가 단계에 대 한 전제 조건11를 표시 했다 처리에 대 한 아무 시각된 지침을 계량 하는 방법 자세한 설명 출판. 이 원고의 전반적인 목표는 고해상도 초음파 쥐에 대 한 포괄적인 시각 가이드를 제공 하입니다.
우리가 우리의 설명 유전자 조작된 쥐에 내 인 성 췌 장 종양에 집중,이 메서드는 orthotopic 이식 모델도 사용할 수 있습니다. Orthotopic 모델, 심지어 매우 작은 종양을 1-2 m m 걸릴 속도 종양 발병 조사 abdominally 검출 될 수 있다. 주관적이 고 재현 하기 어려운 복 부 촉진 될 수 있는, 초음파 검사는 아주 작은 췌 장 종양의 발병을 감지 하는 섹 모델에 이전 촉진 없이 적용할 수 있습니다. 또한, 작은 창 자 루프 공기 가득 같은 복 부 구조는 겹쳐 있을 수 있습니다. 이와 관련, 작업 단계에는 동물의 위치를 변경 하려면 유용할 수 있습니다. 대부분 종양 부정사 위치;에 구상 될 수 있다 그러나, 일부 종양 마우스의 왼쪽 (췌 장 머리 종양) 또는 오른쪽 (췌 장 꼬리 종양)에 놓으면 검색만 수 있습니다. 따라서, 마우스의 적절 한 위치 효율적인 가시성을 높이기 위해 중요 하다.
복 부 장기 또는 해 부 변이의 부족 표시 발생할 수 있습니다. 증가 가시성 및 초음파 이미지의 해상도, 초점 뿐만 아니라 밝기 및 대비 설정을 해야 변경할 수 따라. 이미지 유물 결함/잘못 프로브, 마우스 모피의 불완전 한 제거, 초음파 젤의 부족 금액 또는 부족 한 접촉 압력의 마우스 복 부와 프로브 수 있습니다. 또한, 약간 프로브를 기울이기 시야 또한 상당히 높일 수 있습니다.
또한, 종양 성장 속도 론 작은 동물 초음파에 의해 경도 모니터링할 수 있습니다. 기술의 주요 장점 등 낮은 비용 (초음파 기계의 가용성 주어진), 방사선 노출 없이, 짧은 스캔 시간, 따라서 작은 긴장 마우스. 종 암 연구에 비추어 특히 반복 검색 쉽게 수행 하 고 진정 또는 작은 동물 CT 또는 MRI 검사에 필요한 마 취의 긴 기간 필요성 없이 동물에 작은 부담을 박 았.
고해상도 초음파 다양 한 전 임상에서 더 자주 사용 됩니다 때문에 더 강력한 초음파 시스템의 기술 진보는 향상 된 해상도와 점점 자동된 이미지 최적화 도구, 작은 동물, 현재 개발 되 고 있다 미래에 학문입니다. 프로토콜 내에서 중요 한 단계는 올바른 마우스 준비 및 위치, 뿐 아니라 올바른 복 부 장기 및 혈관의 식별.
초음파는 감지 및 췌 장 종양의 정량화를 위한 유용한 도구가 유전으로 설계 된 높은 해상도 및 orthotopic 마우스 모델. 다른 설립된 상상 기법에 비해이 초음파 기반 방법 빠른 세션 시간 및 비용 효율성을 결합 합니다. 올바른 수집 및 해석 초음파 이미지의 적절 한 실습 교육 및 경험을 필요로 하기 때문에이 비디오 프로토콜 췌장암 모델의 모든 측면에 대 한 자세한 지침으로 제공 합니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
이 연구는 독일 Krebshilfe 에 의해 지원 되었다 (AN 최대 Eder 그룹: 110972), (SMB)에 DGVS 박사 논문 장학금 및 대학 의료 센터 괴팅겐에는 Else Kröner Fresenius 재단 장학금 (RGG)을. 우리 전문가 기술 지원 또한 블 룸 베르크와 Ulrike Wegner 감사합니다. 우리는 또한 유지 하는 마우스에 대 한 대학 의료 센터 괴팅겐의 동물 시설에서 모든 동물 기술자를 감사 합니다. 모든 실험은 독일 동물 복지 규정에 따라 수행 했다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Visual Sonics Vevo2100 High Resolution Ultrasound System, including imaging stage and anesthesia line | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11945 | |
| Vevo 2100 MicroScan Transducer MS-550-D (22-55MHz) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | VS-11874 | |
| Vevo Anesthesia System (anesthesia induction chamber with fresh and waste gas inlet) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-12055 | |
| Vevo Imaging Station (working stage with nose cone for anesthesia supply) | FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada | SA-11982 | |
| electronic pet clippers | Panasonic Marketing Europe, Germany | 5025232484324 | Panasonic ER-PA10-s |
| Labotect Hot plate | Labor tech Göttingen, Germany | 13854 | |
| eye cream (ophthalmic ointment) | Schülke&Mayr, Germany | 9080249 | |
| veterinary isoflurane | Abbvie, Germany | 4831867 | |
| depilatory cream | RB healthcare UK, United Kingdom | 8218535 | |
| 70% ethanol (v/v) in distilled water | TH. Geyer, Germany | 22941000 | |
| ultrasound gel | Asmuth, Germany | 13477 | |
| tissue wipes | Kimberly-Clark Germany, Germany | 7558 | |
| cotton tips | Meditrade, Germany | 75481116 | |
| glass bowl for ultrasound gel | ARC France, France | H1149 | |
| water bowl | W & P Trading Co., USA | B00K2P6PLQ | |
| gauze sponges | Fuhrmann, Germany | 960504 |
References
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